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1、名校名 推荐实验三学习细菌培养的基本技术教学目的1 通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配制，理解配制培养基的一般步骤和方法。2 理解灭菌的基本原理以及实验室中常用的灭菌方法。3 初步掌握细菌培养的基本技术。实验原理1 配制培养基时要注意原料的选择和调节适宜的PH2 配制好的培养基必须经过灭菌，灭菌是指杀死一定环境中的所有微生物细胞、芽孢和孢子。3 对不同的材料，应当采取不同的灭菌方法：培养基一般采用高压蒸汽灭菌法，而接种环则用火焰灼烧法方法步骤一、培养基的配制1 称量2 溶化：加入材料（蛋白胨、牛肉膏、琼脂等）加热溶化3 调 PH：1mol/L 的 NaOH溶液， PH试纸， 7 4 7 64 分装：
2、加热溶化后，每管1/55 加棉塞：棉塞能防止杂菌污染，保证通气良好。不能太松、不难太紧，2/3 在管内6 包扎二、灭菌1 开锅加水2 放入待灭菌的材料：管中向上，竖放，不能太挤3 加盖4 排出锅内冷空气：达49Kpa 时，排气两次5 维持： 98 Kpa ，20min6 排气：锅内压力降为0 时，才能排气三、搁置斜面将锅内试管等取出，在冷却至50时，搁置斜面，斜面长度不能超过试管总长度的1/2四、接种1 洗净双手，用酒精擦拭2 等手上酒精挥发以后，点燃酒精灯3 接种左手夹住菌种试管和接种斜面试管，拧松棉塞接种环灼烧灭菌右手无名指和小指夹住棉塞（不能放下），灼烧管口一周接种环伸入试管内，在末长菌
3、的部位冷却，后挑取少量菌体，立即抽出在火焰旁迅速将接种环由斜面底部向外轻轻画蛇形细线抽出接种环，再用火焰灼烧管口，并在火焰上方将棉塞塞上4 熄灭酒精灯5 填写标签五、培养： 25下 5-7d ，37下 24h。- 1 -名校名 推荐【同类题库】不同微生物生长所要求的最适温度不同。请就测定大肠杆菌生长最适温度的实验回答下列问题：(1)配制的相应培养基可属于。 ( 填字母 )A天然培养基 B 半固体培养基 C 液体培养基D 伊红一美蓝选择培养基(2)依次按称量、溶化、调pH、分装 ( 每管 5ml) 、包扎的顺序，完成培养基的配制，再用（方法）灭菌后，取8 支试管，分别标明 20、 28、 37、45四种温度，每种温度2 管。(3)向每管中接人处于期的大肠杆菌菌液 0 lml ，混匀。在相应温度下培养24h。(4)测定结果显示， 45下的菌体最少，因为细胞内的等发生了不可逆的破坏。(1)A 、C(2 分 ) 加棉塞 (1 分 ) 高压蒸气灭菌法 (1 分 )(3) 对数 (1 分 )(4) 蛋白质和核酸。 (1 分)- 2 -
