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1、名校名 推荐植物细胞工程的基本技术课标要求1、能力要求1、理解和掌握植物组织培养的操作过程2、理解和掌握植物体细胞杂交的操作过程2、内容要求1、理解植物细胞的全能性2、了解植物细胞脱分化和再分化的结果3、掌握植物组织培养的特点4、理解植物体细胞杂交和植物细胞培养的联系知识网络体系原理：生物学原理和分子生物学原理水平：细胞整体水平或细胞器水平概念目的：改变细胞内的遗传物质，获得细胞产品细胞的全能性：概念、原因、大小植物细过程：外植体愈伤组织胚状体植物体胞工程植物组脱分化：形成愈伤组织织培养再分化：植物细胞选择性表达，形成胚状体特点：子代与亲代性状高度遗传植物体细去细胞壁：纤维素酶、果胶酶诱导剂：
2、 PEG胞杂交融合完成的标志：新细胞壁的形成过程：原生质体融合 +组织培养重难热点归纳理解细胞全能性的概念，把握细胞全能性的特点：细胞全能性是指生物体的细胞具有形成完整个体的潜能的特性。 受精卵、生殖细胞和已分化的体细胞均具有全能性。 生物体的细胞具有全能性的根本原因是细胞内含有形成完整个体所需的全套基因。 同一个体的每一个已分化的体细胞都由受精卵经有丝分裂而来， 体细胞核内基因与受精卵一样， 因此都具有全能性。 分化的体细胞之所以没有表达出全能性， 是因为基因选择性表达。 在离体和适当的条件下， 分化的体细胞也能表达其全能性。 全能性表达的难易程度： 受精卵生殖细胞体细胞；植物细胞动物细胞。
3、植物组织培养操作的特点：1名校名 推荐（1）选择外植体时，由于外植体的脱分化难易因植物种类、器官来源及生理状况的不同而有很大差异。 花和幼嫩的组织脱分化较为容易， 而植物的茎、 叶和成熟的老组织则较难。另外制备外植体时应选取有形成层的部分， 因为形成层细胞易脱分化。（2）消毒。植物组织培养要想取得成功，必须有效防止细菌等的污染。因为如果培养基上有细菌等微生物存在时， 它们比植物细胞生长、 繁殖得更快， 而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。 因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。（3）光照。离体的植物细胞、组织和器官脱分化形成愈伤组织时，需避光处理。愈伤组织
4、再分化形成植物幼苗时，需光照处理。（4）激素调控：生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成；当细胞分裂素的效应高于生长素时， 主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成。3、植物体细胞杂交杂种细胞的筛选和培养：以烟草与大豆细胞融合为例。 烟草与大豆的原生质体融合后， 将原生质体转移到适当的培养基上培养， 使原生质体再生出细胞壁。 这时，在细胞混合物中， 不仅有烟草 - 大豆细胞，还有烟草细胞、大豆细胞、烟草 - 烟草细胞、大豆 - 大豆细胞，因此需要对杂种细胞进行筛选。得到烟草 - 大豆细胞后，再通过植物组织培养技术，培育杂种植株。经典例题剖析1. 下列属于组织培养的是：A.
5、 花粉培养成单倍体植株 B. 芽发育成枝条C.根尖分生区发育成成熟区D.未受精的卵发育成植株 解析 解答此题需从以下几个方面入手： 首先，组织培养是指离体的植物器官、 组织或细胞经脱分化形成愈伤组织， 再经再分化形成具有根、 芽结构的胚状体， 然后由胚状体发育成完整植物体的过程。 花粉粒能培养成单倍体， 是在离体条件下培养形成的。第二，芽发育成枝条、 根尖分生区发育成成熟区， 是体内分化的器官和组织形成了机体的一部分， 未受精的卵发育成植物体， 这就是自然情况下单倍体的形成过程，是在母体的调控下完成的。 答案 A2. 在细胞工程原生质体融合育种技术中， 其技术的重要一环是将营养细胞的细胞壁除去
6、，通常是采用纤维素酶和果胶酶的酶解破壁法处理。 如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞将：A. 皱缩B. 胀破2名校名 推荐C.呈球形D.保持原状 解析 成熟植物去壁后，置于清水中，由于细胞内外浓度差较大， 又无细胞壁保护，细胞会大量吸水，直至细胞破裂。 答案 B3. 不能用于人工诱导原生质体融合的方法是A. 振动B. 电刺激C.PEGD.重压 解析 原生质体是除去细胞壁的植物细胞，它实际上就是植物细胞的原生质部分。当进行植物体细胞杂交时， 先用纤维素酶、 果胶酶除去细胞壁， 分离出具有活力的原生质体，获得原生质体后就可以进行植物体细胞杂交了。 植物体细胞杂交的过程实质是不同植物体细胞
7、的原生质体融合的过程。将不同植物体细胞放在一起培养，必须通过一定的技术手段进行人工诱导。 诱导方法有物理法和化学法两大类。 物理法就是利用离心、 振动、电刺激等促使原生质体融合； 化学法是用聚乙二醇等试剂作为诱导剂诱导细胞的原生质体融合， 聚乙二醇简称为 PEG。重压不能促使原生质体的融合。 答案 D4. 在离体的植物器官、 组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中， 下列哪一项条件是不需要的A. 消毒灭菌B. 适宜的温度C. 充足的光照D. 适宜的养料和激素 解析 解答该题需从如下三个方面入手分析：由离体的植物器官、组织或细胞形成愈伤组织的过程是植物组织培养过程中的一个阶段。该阶段要进行细胞的增
8、殖和细胞的脱分化， 这就必须要有适宜的养料和激素，必须要有适宜的温度，这样，才能保证细胞进行正常的新陈代谢。由离体的植物器官、 组织形成愈伤组织必须是在无菌条件下， 只有在这样的条件下，才能保证培养产生出的细胞是正常细胞， 否则培养基内将长出许多霉菌， 与离体细胞争夺营养与生存空间，形不成愈伤组织。由于此阶段形成的是愈伤组织， 并没有形成具有根、 茎、叶的植物体， 因此不需要光照。 答案 C5. 要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要A. 具有完整细胞核的细胞B. 离体状态C. 导入外源基因3名校名 推荐D.一定的营养物质和激素 解析 考查植物组织培养的知识。 要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株， 需要具有完整细胞核的细胞，细胞处于离体状态，培养基中含有一定的营养物质和激素。 答案 C4
