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1、实验一 波尔多液的配制及质量检验(3 学时) 一.实验原理 波尔多液是用硫酸铜和生石灰配制的天蓝色胶悬状悬浮液,呈碱性,质量好的波尔多液 沉降慢,粘附性强。其有效成分为碱式硫酸铜,CuSO4XCu(OH)2YCa(OH)2ZH2O。 二.实验目的 通过实验掌握波尔多液的配制方法,了解原料质量和不同配制方法与波尔多液质 量的关系,波尔多液的性质及其防病特点。 三.实验材料 1.仪器:250ml 烧杯 6 个,100ml 烧杯 30 个,50ml 烧杯 3 个,50ml、100ml 量筒各 6 个,玻璃棒,温度计,电炉(或水浴锅),电子天平,pH 试纸。 2.药品:CuSO45H2O,CaO(生石
2、灰) 四.实验方法与步骤 (一)10石灰乳的配制 称取生石灰 10g,放入烧杯中,滴入少量水,使石灰化成粉状,再加入定量的水,配成 10石灰乳 100ml。 (二)10CuSO4 溶液的配制 称取 CuSO45H2O13.7g,加少量水使其溶解,然后加定量水配制成 10的硫酸 铜溶液 100ml。 (三)不同比例波尔多液的配制 分别取一定量 10的硫酸铜溶液和 10石灰乳,加水稀释成下表所指定的溶积和浓度, 并按表中规定的方法配成波尔多液。,1,1 - 对照死亡率,处理死亡率 - 对照死亡率 100,100,2,每一浓度处理试虫总数,死亡虫数,五.波尔多液质量检查 沉降速度观察:将用不同配制方
3、法配成的波尔多液,分别倒入 100ml 量筒中,分别静 置 15min、30min、60min 后观察各量筒中波尔多液药粒沉降体积,用量同上的刻度表示。 pH 值测定:用 1-14 的 pH 试纸测定波尔多液的 pH 值,确定其酸碱性。 六.实验报告 将上述实验结果写成实验报告,并对不同方法配制的波尔多液质量进行比较。 实验二 杀虫剂熏蒸作用测定(3 学时) 一.实验原理 杀虫剂熏蒸作用室内毒力测定的基本原理是利用某些杀虫剂具有明显的挥发成有毒气 体的性能,让有毒气体经昆虫的气门进入气管、呼吸系统而起毒杀作用。 熏蒸作用测定时必须注意以下几点: 1实验操作必须在密闭的容器中进行; 2供试昆虫不
4、能接触药剂,避免药剂经口器、表皮进入昆虫体内而发生熏蒸以外的其 它毒杀作用。 二.实验目的 学习并掌握杀虫剂熏蒸作用测定方法。 三.实验用具及材料 (一)实验用具:1.500ml 具塞三角瓶;2.橡皮筋;3.滤纸;4.指形管;5.毛笔;6.棉 线;7.纱布 (二)供试药品及试虫:敌敌畏、丙酮;玉米象成虫或其它储粮害虫。 四.实验方法与步骤 用毛笔将试虫移入指形管中,每管 1020 头,用纱布封口。 药剂配制:用丙酮将敌敌畏分别稀释成 5000g/ml、500g/ml、50g/ml、5g/ml、 0.5g/ml 备用。 药膜制备及试虫处理:将 22cm 的滤纸分别在浓度为 5000g/ml、50
5、0g/ml、50 g/ml、5g/ml、0.5g/ml 的药液中湿润,然后迅速放入三角瓶底,并将装有试虫的纸 形管用棉线吊起悬入三角瓶中,塞紧瓶塞,置于 25条件下 24 小时后检查死亡虫数,以药 剂的不同浓度为处理,以丙酮处理为对照。 3.实验结果统计 按下式分别计算不同浓度处理的试虫死亡率和更正死亡率,并把结果填入下表。,死亡率(),更(校)正死亡率(),21,3,x x,11,a y bx,注意:当自然死亡率超过 10时,说明实验方法有问题,应重做。,4.求 LD50 值 1)绘图法 以剂量死亡率作图,曲线呈 S 型 以剂量对数为横坐标,以死亡率机率值为纵坐标作图,对 S 型曲线进行拟合
6、,所得图 形呈直线,当纵坐标机率值为 5 时,横坐标数值的反对数值即为 LD50 值。 求回归直线方程 y=abx:,y y b 21,实,验,三 杀虫剂胃毒毒力测定(3 学时,综合性),1、实验目的 通过学习了解杀虫剂胃毒毒力测定原理、方法;掌握药膜法测定胃毒毒力的程序、方法。 2、实验原理 杀虫剂胃毒毒力测定的基本原理是使药剂随食物经口器被试虫吞食,经中肠吸收后起毒 杀作用。 测定胃毒毒力的方法有三种: 毒饵法:将药剂与昆虫喜食的饲料混合制成毒饵,饲喂供试昆虫,这种方法的缺 点是不能避免触杀和熏蒸作用的发生。 微量注射法:用微量注射器将一定量药剂自试虫口器注入,这种方法因操作时易 刺破昆虫
7、口腔柔软组织,故一般很少应用。 叶片夹毒法:将定量的药粉或药剂附着在一定面积的圆形叶片上,与另一片同样,4,面积的无毒叶片粘合在一起,喂养昆虫,然后根据取食面积计算实际吞食药量,此法适用于 植食性、取食量大的咀嚼式口器的昆虫,如鳞翅目幼虫、蝗虫、蟋蟀等,所以本实验采用叶 片夹毒法进行。 3 实验材料与用具 实验材料: 供试药剂:5氟虫腈胶悬剂、 供试昆虫:室内不接触农药条件下饲养的小菜蛾 3 龄幼虫 实验用具:培养皿、滤纸、烧杯、胶头滴管、蒸馏水、甘蓝叶片等。 4 实验步骤 (1)蒸馏水将氟虫腈等比稀释 2000、4000、8000、16000、32000、64000、128000 倍备用,
8、对照为蒸馏水; 培养皿底部垫上滤纸,滴加少量蒸馏水均匀打湿,标记。 每培养皿接入 10 头试虫,每处理或对照重复 3 次。 将叶牒,在药液或蒸馏水中浸渍 5-10s 后取出,晾干,置于相应浓度标记的培养皿中。 (5)24 小时后,观察实验结果,统计死亡率、校正死亡率(均为 3 个重复的平均值),计 算毒力回归方程及 LC50 值。 5 结果观察及计算 24 小时后检查昆虫生存和死亡情况,并按下表记录,逐步计算毒力回归方程及 LC50 值。,实验四 杀菌剂的毒力测定-抑菌圈法(3 学时,综合性) 1 实验目的,5,学习并掌握抑菌圈法测定杀菌剂毒力的方法。 2 实验原理 抑菌圈法最先用于研究抗菌素
9、对细菌的作用,对研究杀细菌剂具有特殊的意义。后来也 常用于测定其它杀菌剂对只长孢子不长菌丝或极少菌丝的病原菌的毒力。主要是通过抑菌圈 的大小来判断化学物的毒力,通常抑菌圈面积或直径的平方与浓度对数成线性关系。 3 实验材料与用具 供试材料 水稻白叶枯病菌,代森铵水剂 供试用具 高压灭菌锅、超净工作台、酒精灯、接种针、消毒培养皿、无菌移液管、镊子、消毒小 烧杯、PDA 培养基 4 实验步骤 (1)无菌操作把无菌水约 10m1 注入纯粹培养菌种斜面试管中,用消毒接种环轻轻地把 斜面上的孢子刮下,配成孢子悬浮液。 (2)把已灭菌的三角瓶琼脂培养基在水浴中加热融化。待冷却至 4550左右,以无 菌操作
10、把孢子悬浮液加入(每三角瓶培养基约 lml),立即摇动,使孢子悬浮液充分与培养基 混合,然后迅速倒入培养皿中(一瓶培养基约可倒 4 个培养皿),静置凝固。 (3)取消毒小烧杯,作好标记,然后分别盛取各种试验药液,并于其中放入约 6 条滤 纸条。用镊子取出这些经药剂浸渍过的滤纸条,按试验的混合组合顺序放入已凝固的琼脂培 养基平面上,滤纸条垂直交叉放置。在取沾药滤纸条时,要使滤纸条在烧杯壁上停留片刻, 使多余的药液流走。 (4) 将放有沾有药剂的滤纸条的培养皿置于 25-28恒温培养箱中,培养 48 小时后 测量抑菌圈直径,取平均值。 5 实验结果观察及计算 将实验结果记录于下表,计算各处理的抑菌
11、圈直径,计算毒力回归方程并绘制毒力曲线。 表 7.1 杀菌剂的抑菌作用,6,实验五 乳油的配制及质量检验(3 学时) 一.实验原理 乳油是农药的一种重要加工剂型,具有含量高,药效好,使用方便等优点。一般是由农 药原药与有机溶剂(当药剂为液体时不加)、乳化剂混合而成,呈单向透明状液体。 乳油的质量标准: 1 有效成分含量合格;2pH68; 3 稳定度在 99.5以上,正常条 件下储藏不沉淀,不分层,在硬水中形成稳定的乳浊液。 但是,如果加工不良或贮存太久,乳油本身会分层或下部有沉淀,有的加入水中后,成 粗乳状分散体系,有油层和沉淀物的药剂,使用时易产生药害或药效不好等。 二实验目的 学习乳油的配
12、制方法,明确乳化性能的测定原理。 三.实验材料 (一)实验仪器:1.烧杯;2.量筒(100ml、10ml);3.移液管;4.坩埚;5.泥三角; 酒精灯;7.电子天平 (二)供试药品: 1.40辛硫磷; 2.48毒死蜱; 3.80敌敌畏;4.碳酸钙; 5.7 稀盐酸; 6.丙酮; 7.Tween-20 四.实验方法 (一)乳油的配制:用 50ml 小烧杯在电子天平上称取 80的敌敌畏乳油 2.5g,加入丙 酮 2g,使其充分混合,再加入 0.5gTween20,然后用水浴锅稍加热助溶即为 40的敌敌 畏乳油。 (二)乳油的质量鉴定 硬水母液的配制:称取 5g 化学纯碳酸钙,溶于少量(10ml)7
13、稀盐酸中,于坩埚中 加热蒸发至干,加少量蒸馏水溶解后,再蒸发至干,重复 45 次,以除去多余的盐酸,使 之呈中性,然后用水稀释至 100ml,即为硬水母液。 CaCO3HCICaCI2H2O CO2 乳油分散性观察:取 1ml 硬水母液,用 99ml 蒸馏水稀释,置于 251的恒温水浴 锅中,用滴管加 2 滴乳油,仔细观察在水中的自发分散能力,将分散能力分为 5 级:,7,.立即分散,有良好的反转现象; .缓慢分散,无反转现象; .稍加搅拌才能分散; .用力搅拌才能分散; .用力搅拌也不分散。 初乳态(乳化性)观察: 初乳态是乳化剂经分散(搅拌)后的乳液外观,初乳态能迅速反映乳液的性能, 用
14、1ml 移液管吸去 0.1ml 乳油滴入 100ml 硬水溶液中,充分搅拌后观察乳化状态,一般有以 下几种: 乳 液 名 称 乳 液 外 观 (1) 可 溶 解 透 明 (2) 可 溶 化 灰 色 或 者 蓝 色 透 明 ( 半 透明) (3) 乳 白 状 乳 白 色 不 透 明 (4) 不 乳 化 分 辨 出 两 相 稳定性观察: 经初乳态观察后,将其静置 30 分钟,观察乳油的稳定性,将稳定性分为四级: A.无分离物析出(无乳油、无沉淀) 微量分离物析出 少量分离物析出 D.较多分离物析出 五.实验报告 将测定和观察结果按下表填写,并加以分析。,实验三 十二烷基磺酸钠 HLB 值的初步测定
15、及其对表面张力的降低作用(3 学时,验证性) HLB 值既表面活性剂在一定温度和硬度的水溶液中,用来度量表面活性剂分子中亲水 基团和亲油基团所具有的综合亲水亲油效应的数值,是表面活性剂的重要性质之一。而表面 活性剂加入很少量就能显著降低其水溶液的表面张力。,HLB值=,亲水基质量+憎水基质量,8,20,实验目的: 了解 HLB 值的概念、计算方法,掌握表面活性剂 HLB 值的粗略估计方法和液体表面张 力的测定方法。 实验原理: (1)HLB 值的粗略估计 HLB 值的计算方法: 对非离子型的表面活性剂,HLB 的计算公式为: 亲水基质量,HLB 值的划分标准:规定石蜡无亲水基,亲油性为 100
16、%,HLB=0;聚乙二醇,全部,是亲水基,亲水性为 100%,HLB=20。其余非离子型表面活性剂的 HLB 值介于 020 之间。 HLB 值的粗略估计:通过表面活性剂在水中的溶解分散情况(表 1)来粗略估计表面活 性剂的 HLB 值。 表 3.1 表面活性剂HLB 值的粗略估计方法,液体表面张力的测定方法(滴重法): 当液滴自移液管中慢慢流出时,由于表面张力,液滴首先聚集成滴,并逐渐增大,当液 滴重量微超过表面张力时则液滴就会从移液管中滴落。据此,在单位体积被测液体的滴数与 蒸馏水滴数的相比,按下式计算:*n=0*n0。(0、n0 分别为蒸馏水的表面张力与 1mL 滴数;、n 分别为实验溶液的表面张力与滴数。 实验材料与用具 (1)实验材料 表面活性剂:十二烷基磺酸钠,用时蒸馏水配制成 8mmol/L(2.8%)溶液; 标准硬水、蒸馏水。,9,(2)实验用具 电子分析天平、100mL 量筒,1 毫升移液管,洗耳球,胶头滴管,烧杯。 4 实验步骤 HLB 值的初步测定 用注射器或移液管吸取 1mL 表面活性剂试样加入量筒中,加标准硬水 29ml,上下