《2010版药典黄曲霉毒素检验法[参考]》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2010版药典黄曲霉毒素检验法[参考]（1页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实用标准文案 精彩文档 2010 版药典黄曲霉毒素检验法（文字版） 附录 V 黄曲霉毒素测定法 本法系用高效液相色谱法( 附录 D)侧定药材饮片剂制剂中的黄曲霉毒素( 以黄曲霉毒 B1、黄曲霉毒索B2、黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素G2总量计），除另有规定外，按下列方法测定。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇- 乙腈 - 水 (10 ：18：42) 为流动相，流速每分钟0.8ml ；采用柱后衍生法检测。衍生溶液为0.05%的碘溶液 （取碘0.5g ，加人甲醇100ml 使溶解，用谁稀释至1000ml 制成），衍生化泵流速每挣钟0.3ml 衍生化温度70；以 荧光检测
2、器 检测，激发波长ex=360nm(或 365nm） ，发射波长em=450nm 。 两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5 。 混合对照品溶液的制备精密量取黄曲霉毒素混和标准品（黄曲霉毒B1、黄曲霉毒索 B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.0ug/ml、0.3ug/ml 、1.0ug/ml、0.3ug/ml ） 0.5ml ，置 10ml 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。精密量取储备液1ml，置 25ml 量瓶 中，用甲醇稀释至刻度，即得。 供试品溶液的制备取供试品粉末约15g（过二号筛） ，精密称定，加氯化钠3g，置于 均质瓶中，精密加入70% 甲醇溶液75ml，高速搅
3、拌2 分钟（搅拌速度大于11000 转/ 分钟） ，离心 5 分钟（离心速度2500 转/ 分钟），精密量取上清液15ml，置 50ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇 匀，用微孔滤膜（0.45um）滤过，量取续滤液20.0ml ，通过免疫亲和柱（AflaT-estP ） ，流速 每分钟3ml，用水 20ml 洗脱，洗脱液弃去，使空气进入柱子，将水挤出柱子，再用适量甲醇洗 脱，收集洗脱液，置2ml 量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀。即得。 测定法分别精密吸取上述混和对照品溶液5ul 、10ul 、15ul 、20ul 、25ul ，诸如 液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，另精密吸取上 述供试品溶液20-25ul ，注入液相色谱仪，测定峰面积，从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲 霉毒素 B1、黄曲霉毒索B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2的量，计算，即得。 【附注】（1）本实验应有相应的安全、防护措施，并不得污染环境。 （2）残留有黄曲霉毒素的废液或废渣的玻璃器皿，应置于专用贮存容器（装有10% 次氯酸钠溶 液）内，浸泡24 小时以上，再用清水将玻璃器皿冲洗干净。
