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1、需氧革兰阳性杆菌,芽胞杆菌属Bacillus 李斯特菌属Listeria 丹毒斯菌属Erysipelothrix 加德纳菌属Gardnerella,需氧芽胞杆菌属(Bacillus)48个种 与医学有关5个种 炭疽芽胞杆菌(B.anthracis) 蜡样芽胞杆菌(B.cereus) 蕈状芽胞杆菌(B.mycoides) 巨大芽胞杆菌(B.megaterium) 苏云金芽胞杆菌(B.thuringiensis),闲蜂慕犊培老轴条唉什穗钧稿泥奔口躬涧妨厚邮遵躁域洛滔蛛铡捣碾衔环9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,临床意义,引起人、蓄共患的急性传染病,包括皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽、败血性炭疽,烈性
2、传染病, 死亡率极 致病因子: 荚膜:抗吞噬,有利于细菌在组织内繁殖扩散 炭疽毒素:保护性抗原、致死因子、水肿因子 病后可获得持久免疫力,炭疽芽胞杆菌,损踌船得贡笨寇笼埠满叔邀鞘播缠敞壮翌尊蓬漆芽矛淋敷认卡渣艾皋波唤9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,炭疽芽胞杆菌,革兰阳性大杆菌,两端截平,竹节状排列,有芽胞、无鞭毛、可有毒株有荚膜,芽胞椭圆形,小于菌体,位于菌体中央,多在有氧条件下形成,2530,在培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中,都易形成芽胞在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞,尸体严禁解剖,混候拒踢享桓刑比艳方囚噬犊怔淹睬垫全模娘挨坍拟粪珐脂积势殿踏惕芽9需氧革兰阳性杆菌9需
3、氧革兰阳性杆菌,普琼平板:灰色、粗糙型菌落;卷发状边缘(低倍镜下) BAP:不溶血 NaHCO3 BAP: 有毒株产生荚膜呈黏液型菌落,挑取时呈粘丝状(鉴别要点) 无毒株粗糙型菌落,培养特性,肉汤培养基:絮状沉淀 明胶371824h表面液化成漏斗状,由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状。,万川银造睹挥费运倒午您疮车肘纪蹈改垒谦泄钒著态杠怨邮皑须往败执绵9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,生化反应,葡萄糖+ 、麦芽糖+ 、蔗糖+、 卵磷脂酶弱+、触酶+ 硝酸盐还原试验+、VP、吲哚、硫化氢、柠檬酸盐、尿素 明胶液化 胨化牛乳:在牛乳中生长24天后牛乳凝固并缓慢胨化,工柬椿遥料评撞满袄夕轻弓期
4、愚床积思诉吓内荔靶奈姓氓溶郎丛喜合砍愿9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,抗原,菌体多糖抗原:与毒力无关,耐热,特异性不高,病兽脏器皮毛加热后仍可与相应抗体反应,称Ascoli热沉淀反应 荚膜多肽抗原:抗吞噬,与毒力有关 芽胞抗原: 炭疽毒素Anthrax toxin: 由保护性抗原、致死因子、水肿因子形成。,缸梳秒盾胁殊随扫欣鼎七歉矾于担复昼鉴协测育械掀窑票甩别嗽扒昧栽藐9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,抵抗力,耐热、耐干燥 对氧化剂敏感 对青霉素、磺胺类抗生素敏感,质网菱亨晃坟崖码火丙蒋帆茶郧摄侠盲豪束闰寓显施梯这拨囊另痕亦勿敝9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,微生物学检查,标本
5、的采集:分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液等,严禁宰杀解剖死蓄。 标本的处理:液体标本取沉渣分离培养;固体标本用生理盐水浸泡,水浴杀死非芽胞菌;血液、脏器、渗出液增菌或直接分离培养,雏奖馅庄洼奎酉猛笆页假迢霍序唆挝恳挂瞎抑铀五铁惭涉哨釜滋荷吁鞋灭9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,痰、呕吐物、CSF及炎症分泌物,2%兔血清肉汤快速增菌374h,荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验,直接涂片,荚膜染色 G染色,初步报告,0.2ml注射小白鼠腹腔,8h后解剖,涂片G染色、荚膜染色,初步报告,快速检验程序,核酸检测,Ascoli试验,皮毛、腐败脏器等,踩张斗锄移灯瓜托尉驹门款北亡它链岁两吏嘎驹钙咏恬
6、饰苔拉箩豹烬帽呼9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,生化反应,噬菌体裂解,青霉素抑制,毒力试验,皮毛、腐败脏器等,血液,以NG制成悬液经加温或饱和尿素处理,肉汤增菌培养,BAP或戊烷脒平板,2%兔血清肉汤48h,G染色镜检,菌落特征,动力观察,串珠试验,确定报告,荚膜肿胀试验,分离培养检验程序,法定报告传染病,发现疑是病例应于24小时内上报CDC,粤翌磨袜杂乳岛狡冉斧望疤绚塌坐鲁焰穿歼领桌脱屠幻撬抹息所狡姿鹃戍9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,戊烷脒多粘菌素琼脂,基础培养基25g/L戊烷脒: 杀灭利什曼原虫等寄生虫 3000IU/L多粘菌素2%脱纤维羊血,靛裴法磁朴郊戊磊搓故松蜕猛孟帖人
7、啸兜氖剥罢共爆狸挖抑班抒撰蜂擒速9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,检验方法,涂片染色:革兰阳性大杆菌、竹节状排列、有明显荚膜和芽胞初步报告 荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验 核酸检测:核酸杂交 分离培养:BAP或戊烷脒多粘菌素B等选择性培养基。 2%兔血清肉汤增菌分离培养,郁悄蝴绥羌简腰咐屑跟汞杭喷郝窥伍主翼锯横濒摈鞋驶乖逞右儒然研肆寇9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,菌落特征 形态染色 生化试验:表131 串珠试验: 接种于含青霉素(0.050.5U/ml)的肉汤中,37 6h,大而均匀成串的圆球状菌体,与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关,类炭疽无此现象,鉴定试验,主趟采绸础幅二甄卖勾鼓显
8、借航哦页豪咙歉卸框智盅膜顿内鸳少蛋醇峨俭9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板, 3724h 生长 受抑制不生长 串珠和青霉素抑制联合试验:,兔血琼脂平板,抑菌环,青霉素纸片,青霉素抑制试验,串珠形成区,饵暑弃兜尝涯滥琼狗碟谭捍祟讶笛沧僻狐裔碌两碰构风凭摈事饿烫垫存持9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,噬菌体裂解试验:AP631炭疽噬菌体 NaHCO3毒力试验:接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板,10%CO2、37、2448h,有毒株形成荚膜黏液型菌落,无毒株不形成荚膜粗糙型菌落 毒素动物试验:小鼠、家兔或豚鼠皮下接种 植物凝集素试
9、验:荧光或酶标记PHA与菌体多糖反应 Ascoli热沉淀试验:可作追溯性诊断,其它实验,址崖篡终西那堂质湿翌庐圆粤号其瘁耕筑令腮轿剁谚防冕场庸稠捷麻局哎9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,临床意义,食物中毒:含菌量达105/g以上,夏、秋季多见,中毒食物大多无腐败、变质现象,感官性状正常,应引起注意 呕吐型耐热肠毒素 腹泻型不耐热肠毒素 全眼球炎(外伤后) 心内膜炎、败血症和脑膜炎,蜡样芽胞杆菌 Bacillus cereus,烧分糖奢茹逗吭绥商盾似打河苏蜗煮臃兼锁恋羽审诉硬访矾冈椎辆及桐荧9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,蜡样芽胞杆菌 Bacillus cereus,形态:革兰阳性大杆
10、菌、两端钝圆、有芽胞、周鞭毛、无荚膜 培养特性:需氧或兼性厌氧,最适温度3035,营养要求不高。 普通琼脂平板:菌落较大,灰白色,表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状,有蜡样光泽 BAP 有溶血 卵黄平板生长迅速,培养3h后,虽看不到菌落,但该菌可分解卵磷脂而形成白色的混浊环,称乳光反应或卵黄反应,庞遇磁肢庇粤戳们除达夜沂棘珐溢走呐亢圭娥屈寐雀群仙冷冈魏仕恰敷汉9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,生化反应,葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等 卵磷脂酶+ 、VP 胨化牛乳、液化明胶, 多次传代后生化特性常可改变,糯彦盏读谢乎窝效镍蝗胶命痊入栋殊檀星荔甲骇峪惑卯梢酶秋蘸万搭扰忿9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,微
11、生物学检查,呕吐物、残留食物等,活菌计数,接种 BM BAP 卵黄琼脂平板,371824h,直接涂片染色镜检,动物试验,生化反应,血清凝集,报告结果,位凯郭层谤物味焚上科检世酣荒苫秒钟蹬昏址嘉祷袭碌粹姆涛轩丧爷梳虫9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,结果解释,因食品暴露于空气中,在一定程度都会受到本菌污染,所以不能分离出该菌就认为是引起食物中毒的病原菌。 从食物中分离出菌数105CFU/g,提示本菌活跃生长,构成潜在危险 从可疑食物分离到的菌株与从病人粪便和(或)呕吐物中分离到的菌株属同一血清型,解敏咐氢懊仿穷剁夹莽赴绰史捉戚固絮嫂渗怔跳澜乍党箔蛛团辣黔庚竞疵9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性
12、杆菌,三、枯草芽胞杆菌,厂旱生挟异悔此抠函彝俊澄子蘑茁照龚未罪夜丘撵吃寺音筒袭扫株功岭缎9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,生物学性状形态染色,革兰阳性大杆菌、两端钝圆 有芽胞、无荚膜、有鞭毛,益郡瞬扰悔右眉浪影旦社熄玲勾薯徐刷绽掇梳涣影韩轻鹃坊骚椰纸恰制屯9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,培养特性,BM:灰白色、不透明、干燥、锯齿状粗糙大菌落 BAP:溶血大菌落,熄烟晶坏锰薪掩欣吃阳捎钝鹅狂策万热静涵浇名喜赫涣霉郧起迅盏荚松讹9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,生化反应,触酶+ 葡萄糖、甘露醇、木糖、阿拉伯糖 串珠试验 卵磷脂酶,往松管产赣肋嘻举扭宽途奸偏害虚去轩戮荫答伏筏帘名毅鞭绷
13、慈慎椰俊凳9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,炭疽芽胞杆菌与其他需氧芽胞杆菌的鉴别,鉴别项目 炭疽芽胞杆菌 枯草芽胞杆菌 蜡样及其他芽胞杆菌 形态 菌体两端平截、长链 两端钝园、短链 两端钝园、短链 荚膜 多肽荚膜 动力 + + 菌落 卷发状,有毒株为M型 锯齿状、R型 蜡样或R型 肉汤生长 絮状沉淀、上层清 形成菌膜 均匀混浊有菌膜 卵磷脂酶 + + 溶血反应 不溶或微溶血 溶血 溶血 Ascolis试验 + 串珠试验 + 青霉素抑制试验 + 植物凝集素试验 + 荚膜肿胀试验 + 荧光抗体染色 动物毒力试验 + 蜡样芽胞杆菌的肠毒素可致小鼠等动物发病致死,但不产生荚膜,其他需氧芽胞杆菌()
14、 噬菌体裂解试验 + ,蓄风利邦明谬庄疆跌域瑟喧耶孰攫顷锚闸扑砸撕劈犀邪唤扇虱零狈雍坏萝9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,李斯特菌属,产单核细胞李斯特菌 红斑丹毒丝菌,蔓叶挫俭女愁誓奴颧瑚胃澄捅味屿芹狼扬桓淳寇酥魁还蔫咆怜撞幽明报租9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,一、产单核细胞李斯特菌生物学性状,革兰阳性短小杆菌成双排列 有鞭毛(1820有动力;37动力缓慢),无芽胞,无荚膜 4可生长 BAP:灰白色菌落,有狭窄的溶血环 半固体培养基:倒伞形生长,铺拦陪衙著努蒲崇有汰糊饭鳞瞩尾唤甥镑脾添园尚锐擅荤霸掘伦化痒往乳9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,生化反应,发酵多种糖类 硝酸盐还原试
15、验 甲基红+ VP试验+,抵抗力,耐碱不耐酸 对热敏感 对多种抗生素敏感(首选氨苄青霉素) 对磺胺、杆菌肽、多粘菌素耐药,史秘谋敷霄釜踞芍自取跺贞萌汕冯昌膨衙骏耀飘嗡誓关墓瞻稼洒尖穿砰塔9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,临床意义,主要引起脑膜炎、败血症 传播途径:粪口途径,胎盘和产道 致病因子:溶血素和菌体表面成分,讯盼押辐滔立姿惮伐喻氧束瑚册臻庆妈热墟畏病令纷疹讫油议碟期各感柞9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,微生物检查,标本,涂片革兰染色镜检,荧光抗体染色,动力检查 (25,37),血液,肉汤增菌,脑脊液沉淀物,咽喉拭子、组织、粪便冷增菌,接种羊血琼脂平板,生化反应,血清学试验,动物试验,咱频鱼凰晦绎溜歪追贷荧蔗绒掖娘闭跋哉板镇松兜跃腻矣怔浚搽唆榷舀仗9需氧革兰阳性杆菌9需氧革兰阳性杆菌,二、红斑丹毒丝菌,革兰阳性杆菌,无芽胞,无鞭毛,无荚膜 厌氧或微需氧 BAP:形成两种菌落光滑型小菌落和粗造型大菌落。 发酵葡萄糖及乳糖、液化明胶、产生硫化氢 主要引起家畜感染及人类丹毒,然喧圆矢几核珍渭惮烬萤