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1、实验6:-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测,1.制备固定化a-淀粉酶 2.进行淀粉水解的测定,实验目的:,1、在果汁生产中利用_,可以提高果汁的出汁率和澄清度。 2、洗衣粉中添加_,可以更有效地清除顽渍。 3、常用的酶制剂有_等四类。,知识回顾:,定义:含有酶的制品 分类:液体酶制剂、固体酶制剂 酶的生产: 提取法 发酵法 (通过微生物发酵获得所需要的酶) 优点:催化效率高、低能耗、低污染 缺点:易失活、难回收,不能被再次利用、难分离,酶制剂,固定化酶:就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 定义:即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于
2、水的载体上) 固定化酶技术的优点: (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离; (2)固定在载体上的酶可以被反复利用。,固定化酶技术,吸附法、 交联法、 包埋法、 共价偶连法,固定化方法,实验原理:用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,用淀粉指示剂溶液测试,流出物呈红色表明水解产物糊精生成,实验设计,遇碘显蓝色,遇碘显红色,遇碘不显色,a-淀粉酶的固定化 可溶性淀粉溶液 KI-I2溶液,实验器材和步骤,收集流出液,鉴定,1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶? 可在试管中加入1ml可溶性淀粉,再加几滴淀粉酶柱流出液,保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色,则流出液中没有淀粉酶了。 2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途? 可以在高温下使淀粉快速水解,而且酶不会因高温上而失活,所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。,思考与练习,直接使用酶和固定化酶的优缺点,催化效率高 低耗能 低污染,酶既能与反应物接触,又能与产物分离,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用,对环境条件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后酶会混在产物中,难分离,在生产实践中,很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的 难以一次性固定化多种酶,