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1、医院消毒、灭菌效果测 作者： 日期：石嘴山中心医院医院消毒、灭菌效果监测规范一、 空气消毒效果监测1 采样频率：医院应对感染高风险部门每季度进行监测；洁净手术部(室)及其他洁净场所.新建与改建验收时以及更换高效过滤器后应进行监测；遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时进行监测，并进行相应致病微生物的检测。（感染高风险部门：手术部(室)、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴同室、血液透析中心(室)、烧伤病房等。）2 采样时间：采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；未采用洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医
2、疗活动前采样；怀疑与医院感染暴发有关时采样。3 采样方法：2.1洁净手术部（室）及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法进行监测，采集点数及结果判断见下表。根据GB50333-2002医院洁净手术部建筑技术规范。洁净手术部（室）的等级标准等级手术室名称空气洁净度级别最少培养皿数n（手术区+周边区）（90mm平皿，暴露30min)沉降法平均菌落数（个/30min90皿）手术区周边区手术区周边区特别洁净手术室100级1000级13 (5+8)0.20.4标准洁净手术室1000级10000级9 (3+6)0.751.5一般洁净手术室10000级100000级7 (3+4)24准洁净手术室300000级5
3、5注：我院病房手术室（麻醉科）属于级 间，级 间，级 间。2.2 未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积30m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积30m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。将普通营养琼脂平皿（90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m-1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。注意：采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10 min后采样。4 检测方法：将送检平皿置361恒温箱培养48h，计数菌落数。若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。菌落总数计算方法沉降法按平均每皿
4、的菌落数报告：CFU /（皿暴露时间）5 结果判定5.1洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应4cfu/(30min直径9cm平皿)。5.2 非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数4cfu/(15min直径9cm平皿)。5.3儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数4cfu/(5min直径9cm平皿)。二、 物体表面消毒效果监测1 采样时间：在
5、消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。2 采样方法：用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌PBS或生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板。面积被采表面100cm2，取全部表面；被采面积100cm2，取100cm2，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用洗脱液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。3 检测方法：充分震荡采样管后，取不同稀释数倍的洗脱液1.0 ml接种平皿，将冷至40 45 的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15 ml20 ml
6、，36 1 恒温箱培养48h，计数菌落数。怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。物体表面菌落总数计算方法：物体表面菌落总数(CFU/cm2)= 平均每皿菌落数洗脱液稀释倍数/采样面积(cm2)注：小型物体表面的结果计算用CFU/件表示。4 结果判定4.1 洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等：物体表面细菌菌落总数5cfu/cm2 。4.2 儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾
7、病科门诊及其病房等：物体表面细菌菌落总数10cfu/cm2 。医院环境类别范围及空气、物体表面卫生标准类别范围空气平均菌落数物体表面平均菌落数cfu/cm2cfu/皿cfu/m3洁净手术部符合GB50333要求1505其他洁净场所4（30min）a1、保护性隔离区（非洁净手术室、产房、导管室、血液病病区、烧伤病房）;2、新生儿室、重症监护病房。4（15min）5儿科病房、母婴同室、消毒供应中心的检查灭菌包装区和无菌物品存放区、血液透析中心（室）；其他普通住院病区等4（5min）10普通门（急）诊及其检查（妇产科检查室、人流室）、治疗（注射、换药等）室；输血科、感染性疾病科门诊和病区4（5min
8、）10注：1、 平板暴露时间。2、cfu/皿平板暴露法，cfu/m3空气采样器法。三、手消毒效果监测1 采样频率：每季度对重点部门工作的医务人员手进行消毒效果的监测1次；当怀疑医院感染暴发与医务人员手卫生有关时，应及时进行监测，并进行相应致病性微生物的检测。重点部门：手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、烧伤病房、感染疾病科、口腔科。2 监测方法：2.1 采样时间 在接触患者、进行诊疗活动前采样。2.2 采样方法 被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指端到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积
9、约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。2.3 检测方法 将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，平皿内加入已溶化的4548的营养琼脂15ml18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36l混箱培养48h，计数菌落数。细菌菌落总数计算方法：细菌菌落总数(cfu/ cm2)=平板上菌落数稀释倍数/采样面积(cm2)3 卫生标准3.1卫生手清毒：监测的细菌菌落总数应10cfu/2，3.2 外科手消毒：监测的细菌菌落总数应5cfu/2 。4 皮肤
10、消毒效果 监测方法同物体表面，结果判定：监测的细菌菌落总数应5cfu/2四、使用中消毒剂监测1 采样频率：使用中消毒剂应每季度进行监测，灭菌剂应每月进行监测。2 采样方法：用无菌注射器按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，加入9mL中和剂中混匀 3 检测方法：用无菌吸管吸取一定稀释比例的中和后混合液1.0 ml接种平皿，将冷至40 45 的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml20 ml，36 1 恒温箱培养72 h，计数菌落数；怀疑与医院感染爆发有关时，进行目标微生物的检测。注意：采样后4 h内检测消毒液染菌量计算方法消毒液染菌量（CFU/ml）=平均每皿菌落数10稀释倍数4 结果判定使用中灭
11、菌用消毒液：无菌生长（0CFU/ml）；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量10cfu/ml；其他使用中消毒液染菌量100cfu/ml，不得检出致病性微生物。五、清洁用品消毒效果监测1采样时间：消毒后、使用前进行采样2 采样方法：布巾、地巾等物品可用无菌的方法剪取1 cm3 cm，直接投入5 ml含相应中和剂的无菌生理盐水中，及时送检。3 检测方法：将采样管在混匀器上振荡20 s或用力振打80次，取采样液检测致病菌。4 结果判定：未检出致病菌为消毒合格。六、压力蒸汽灭菌效果监测1 采样频率：每周1次。2 监测方法：生物监测法（嗜热脂肪杆菌芽孢）3 结果判定：阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组
12、培养阴性，判定为灭菌合格。七、紫外线消毒效果监测1 监测频度：每半年监测一次，各科室负责监测，院感办负责审核。2 监测方法：紫外线强度照射指示卡监测法：开启紫外线灯5 min后，将指示卡置于紫外线灯下垂直距离1 m处，有图案一面朝上，照射1 min，紫外线照射后，观察指示卡色块的颜色，将其与标准色块比较，读出照射强度。3 结果判定：使用中紫外线灯照射强度70W/cm2为合格；30W高强度紫外线新灯的辐射强度180W/cm2为合格。八、血液透析液监测1 采样频度：每月监测1次2 采样方法：采样时将进入透析器入口的旁路拔下，让旁路出水分钟左右，然后用一次性注射器抽取标本透析液加入事先准备好的无菌试
13、管中，及时送检。3 检测方法：3.1细菌总数检测将采样管在混匀器上振荡，用无菌吸管吸取0.5ml检透析液接种于灭菌平皿，每一个样本接种个平皿，加入已熔化的 的营养琼脂mlml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置温箱培养，计算平均菌菌落数。细菌总数计算方法：细菌总数（cfu/ml）=2个平皿平均菌落数23.2致病菌检测：吸取ml待检透析液，接种于ml营养肉汤培养基中，于增菌培养。取白金耳上述增菌液，在血平皿上作划线分离，培养。观察血平板上菌落形态特征进行细菌菌种鉴定。4结果判定：透析液和透析用水细菌菌落总数200CFU/ml，并不得检出致病菌为合格。九、医疗用品监测1 采样时间：在消毒或灭菌处理后，存
14、放有效期内采样。2 监测方法：营养肉汤培养法（灭菌物品）或倾注平板法（消毒物品）3 卫生标准：3.1 高度危险性医疗器材（进入人体）应无菌。3.2 中度危险性医疗器材（接触粘膜）的菌落总数应20cfu/件（cfu/g 或cfu/100cm2），不得检出致病性微生物。3.3 低度危险性医疗器材（接触皮肤）的菌落总数应200cfu/件（cfu/g 或cfu/100cm2），不得检出致病性微生物。注：无须常规进行无菌物品监测。建议每季度对消毒供应室集中清洗消毒的物品进行抽样检查件，有疑问时增加采样频度和件数。十、内镜消毒灭菌效果监测1 监测频度：消毒后内镜每季度进行监测，灭菌后内镜每月进行监测采样方法：用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集，及时送检，2小时内检测。2 检测方法：2.1菌落计数：将送检液用旋涡器充分震荡，取0.5ml， 加入2只直径90mm无菌平皿，每个平皿分别加入已经熔化的45-48营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固
