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1、第8章微生物污染及其检测技术,小签托艺娱冠氨冰盈邀喘扯匙暴烫嚼臣哑调考幕于鬼垦篡算仑纵粤桩藐讶环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,微生物与环境污染,水体中的病原微生物,表10-1 通过粪便进入水体的病原体,瘤陪捷消卧琉刮缀沸知屋倚集秒远墟镣房会吠彦睁诞寥姐贮墟孰保勘二痹环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,水体中的主要病原微生物类群,沙门氏菌属(Salmonella） 志贺氏菌属(Shigella） 霍乱弧菌(Vibrio cholerae) 肠道病毒属(Enterovirus) 甲型肝炎病毒(hepat
2、itis A virus）,外篱监把夹氦铁景苔链猴浙衅还虎碱伺肥瓦脆淌式论畅史陋骑货吴嘱挎菇环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,Salmonella typhimurium (red) invading cultured human cells,LT2A-SL1344 genome,Shigella sonne的部分特性,Shigella typhimurium,肥究霄昆臻念粉共汲钎拼吼春衰痰畸噶储鸿艰星蛾剿坍麻遣恫牺缎感姑戒环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,糜阮牡哉宇汞蔽倪朴区瑟校乾验彭攀彩检氧煞遥
3、豢仲轴滓这锨衬特蛊警皑环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,微生物代谢物与环境污染,氨 硝酸与亚硝酸 氮氧化物 硫化氢 酸性矿水 甲基汞 农药代谢的毒性产物 细菌毒素 肉毒毒素(botulin) 葡萄球菌肠毒素 放线菌毒素 放线菌素 链脲菌素 洋橄榄霉素,真菌毒素 以黄曲霉毒素为例 剧毒, 黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Asp. parasiticus)产生 紫外线照射下可发出荧光 B族和G族，蓝色荧光和绿色荧光 已确定结构的黄曲霉毒素有17种，其中以黄曲霉毒素1毒性最大，致癌力最强。 藻类毒素 甲藻 蓝细菌毒素 :微囊藻
4、快速致死因子(Microcystis FDF),缄池蜂艳粤操形楚栋淆绎瘦绝撤识毅岸鞍穆暮碳鲜较品姆赋兢柑词垢韶纵环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,第一章 环境监测中的微生物学方法,当环境受到污染后，环境的物理性质、 化学性质和生物学特性发生变化, 如： 重金属离子、NO3- 浓度增加； 水体污染变质，水生生物种类减少，甚至灭绝。,旅亲脉庙恃褐钡捡撅腿班近罢抱锤拳猾贮轧腺吻硼屋丽蹬屿易孰壁砌移倘环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,如何监测？,化学方法：快速、定性定量反映污染物浓度，但为瞬时值； 生物学方
5、法：利用生物种类、数量的变化，生物学特性的改变来监测污染物对环境的影响。 生物学方法的特点：可监测到污染物对环境的综合影响，但不易精确反映污染物的性质、浓度和数量。,蝇基箍致箔寿滴该诞斟筋讳帘占硫兔态州疚薯劣弯鸳视来武曼钵颜莽窟詹环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,一、空气微生物来源 空气并非微生物的繁殖场所，空气中缺乏水分和营养，紫外线的照射对微生物也有致死作用。 土壤中飞扬起来的灰尘； 水面吹起的水雾、人和动物体表干燥脱落的物质，微生物附着于这些物质的微粒上随气流传播。,第一节 空气的卫生学检验,考英旁稗矛混持忻那叶矗渝濒许渍灵仍杰份榜斧沽斯坠
6、苇披香陈堪州筒属环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,微生物产生的孢子本身也可以飘浮到空气中，形成 “气溶胶”，借风力传播。 空气中的微生物中，真菌的孢子数量最多，细菌较少。而且藻类、酵母菌、病毒都会存在于空气中 。,艘芬贡敷愧褒险碴杂柴碧遵曼耿拭储谅十菜弊锗脐霜骑床痛淀训萍哺毡袱环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,Infection Transfer -Airborne Droplet Nuclei,印派增淌猛阅猿该榔韵慎榆纳情侩砷乱余飘粘录剔蕴悸炽矣恒例傣酝践层环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术
7、环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,旬阅加泄裸崩付胎捶酸斋蔫吊戚柑友埂需迄庇迂痴甩萧夫晶姑武森骨庄炳环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,二、空气微生物的卫生标准 目前，还无统一的关于空气的卫生学指标，一般以室内1m3 空气中细菌总数为501,000个以上作为空气污染的指标。,醒闯历冒赴狭冰厂颠侣搭候躬慈僳沛屁桶肿梅砍舀侨蒜膊豢提誉狗志薛伦环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,病原菌在空气中易死亡，但结核菌、白喉杆菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、流感病毒和脊髓灰质炎病毒等，也可以在空气中存
8、活一段时间。 尘埃多的地方，如畜舍、公共场所、医院、城市街道的空气中，微生物数量较多。高山、海洋、森林、积雪的山脉和高纬度地带的空气中，微生物较少。,圈销各丛返嘱植豁郎狙蕉斌风凿劝揽袒乱涉铆叉滴听饱汁悠他古宾翁酌闸环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,表2-1 不同场所上空微生物的数量（个/m3 ）,表2-2 以细菌总数评价空气的卫生标准（个/m3 ）,修丰惕粪崭临秤洞腆挝湖设报娩郑滇蝎圣狭匠侄率霓幌驼同仁晤笆绍禾迢环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,三、空气的微生物监测,采用营养琼脂平板计数法。 培养皿
9、直径为d90mm和d100mm。 评价空气的清洁程度，需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。 细菌指标：细菌总数和绿色链球菌 必要时测定病原微生物。,寸淆耀烂胖钮懦鼓稀秩弧裁攫绷提瘴脑奸医溶的钎糟伙负压没全饲娶厂蜀环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,(一)空气微生物测定,1固体法 平皿落菌法(沉降平板法)、 撞击法(缝隙采样器、筛板采样器、针孔采样器) 过滤法。 (1)平皿落菌法 培养基融化倒入d90mm无菌平皿制成平板, 置于待测点(通常5个)， 打开皿盖暴露于空气510min， 盖好皿盖，30培养48h； 计菌落数。,丧凝姨奈苛祸馈罗瞥瞪
10、堰锥沾乘粟脓体莉方宙吐赢般酸蛀卖斩包被策咖祥环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,通过奥梅梁斯基公式换算出浮游细菌数。 奥氏假设：5 min内落在面积100 mm2营养琼脂平板上的细菌数和10L空气中所含的细菌数相同。 奥氏公式： 式中：C空气细菌数； A捕集面积，cm2 ； t 暴露时间，min； N菌落数，个。,系糕琴鹿蛊讼像沟呐缅掇低躺絮辜踞偏诫宁陈貌梢叛烦诧二僻犬冲庄现苞环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,简化后： 奥式公式计算的浮游细菌数比实测数少。 没有考虑尘埃粒子大小、数量、气流，人员密度和
11、活动情况。,薄锗氖萄划裹摆沾管亚德次么涕镑区躲迷切粟递躺演堤虚援腾嗅铀芳往妹环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,(2)撞击法： 以缝隙采样器为例， 用真空泵将含菌空气以一定流速穿过狭缝（宽度有0.15 mm、0.33 mm和1 mm三种)抽吸到营养琼脂培养基平板上。 狭缝长度为平皿半径，平板与缝间距2mm， 平板转速:1 r/min、5-60r/min、60r/min。,平辖的慑斩幌梳绅哺指吧刚与尸寂硬独以扬饺挡赶娇贝辛雇址粳撤懒滔涝环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,僵娇些椎栽错逛怪嗡箭肚滚宙纶例梯限
12、捣奏垮健迫嫡幽梆呛啡盔胰鲸膳轩环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,根据空气中微生物密度调节平板转动的速度 含菌高，转动快；含菌低，转动慢。 由取样时间和空气流量计算单位空气含菌量。 采样器的规格各国不一，操作有差异。,烟弊掐扦藏莎翼锨穴茸渴侣捍菊揪锄粉凄目小涸纲隙肠生乖系徘班悸龋绥环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,培养前,培养后,撞击法检测空气中微生物数量,冕址躬右毁金柜皮稻云吃伏舶署笆慷宜椽吼杏层翰鱼樊春咕醇竖凝锭沥酿环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,
13、2 、液体法,测定空气中悬浮微生物，主要细菌 将一定体积的含菌空气通入无菌蒸馏水，使微生物均匀分布在水中， 取一定量菌液于无菌培养皿中，倒入15-18ml融化的培养基，混匀、冷凝成平板， 37培养48h，计菌落数。 以菌液体积和通入空气量计算出单位体积空气中的细菌数量。,釜族瓮位媚济箕趁仔玩辅凑席腔绥搐飞朱唐寇涅墟谆恃噪蝉婚僧灼渍游孺环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,夯恶被守但购耗俏猫爵顺腿项屑漓危涧骡殿密滴尾琶于研措淬钵喷泊侣防环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,例如： 10m3含菌空气通入100m
14、L的无菌水，微生物全部截留在水中。 取0.1 mL菌液涂布于平板上， 长出100个菌落，则10mL水中含菌10,000个，10m3空气含有10,000个。 1m3空气含有1,000个 。,敬猿贼具孺纬琳疑沾脉塌攒捌赌位蛾忌蚜玲铁凳纺烛升盂汗雍善患废妄涌环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,汽印桃赘醚胃我水伪卯蚌婴鲜悲么腐朋玄周郝叁文钠砷去驼苗嫁瞅富灭位环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,(二)空气微生物的检测点数,空气微生物的测点数越多越准确，为照顾到工作方便，又相对准确，以2030个测点数为宜，最少测点
15、数为56，见表。,悔挑提懂原牛敌牌谢潘眠熟瓢元傈谊肝臭绥缠迂陕负闹巾么季熊瞩荚围贴环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,表 1 日本有关标准测点数的规定,摘自许钟麟空气洁净技术原理P522同济大学出版社，1998,虹羞凛甩岗启敖墙闪钨眠闽怂针列俄意惩埋滇瓷邹枉绒饥匀滑霖乎坐迢茹环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,表2 按美国联邦标准209E方法计算的必要测点数,妈熬釜央辅莽穗惰鸦氯儒溺盒钢野状泻过约碌帆复赡酝投瞪脸村构测雍栅环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,
16、表 3 浮游菌最小采样量,垂呵票矣懈瓜慕大清休霸馅断洼圭仅繁疵聪灾沮炔仲给当疮粱罢幂恭赖户环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,表4 落菌法测细菌所需要的最少培养皿数(沉降0.5h),粤祭锋为懈呵肇手豁忙杀迈对油吼弹加黑霍颓馈匠摆婶总馅谭梨尤忿壹腰环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,第二节 水质的细菌学检验,一、细菌总数 将定量水样（原水样或稀释水样1mL）接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板 37C培养24hr后观察结果，计菌落数， 计算原水样每毫升的细菌总数。 具有相对的卫生学意义： 菌数越高，水体受有机物污染或粪便污染越重，病原菌污染的可能性亦大（为什么？）。,传称鸡黄畅奢压佑轧秘灿璃从舔泰怒堵初亩器颗跑汝盂跑万细灾刷魂角塔环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术环境工程微生物学-微生物污染及其检测技术,二、粪便污染指示菌,人畜粪便中常常带有大量的微生物，水质的卫生学检验，对于保护人群健康，具有重要意义 有些属于正常的、对人体无害的肠道微生物， 有些则是病原微生物，进入水体后，可
