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1、实验诊断学,20109,血液一般检查,general examination of blood,RBC neutrophil hematocyte eosinophil (45%) WBC basophil blood monocyte platelet lymphocyte Fg plasma water (55%) serum solid element,1)血细胞计数方法(1)手工法(白细胞计数),0.38ml稀释液 充分混匀 20ul血液 充池、静止 镜下计数,Neubauer计数盘,3mm WBC WBC WBC WBC 1mm,计算:WBC/L=N/41010620,(2)自动血液
2、分析仪automated hematology analyzer,AHA,电阻抗法血细胞分析仪的原理principal of coulter hematology ststem,直方图histogram,电阻抗方法的检测原理,电脉冲信号,erythrocyte histrogam,normalcyte microcyte macrocyte 36 360 fl,干扰因素: 红细胞聚集 红细胞溶解 大、小红细胞 血小板聚集 巨大血小板 冷球蛋白 白细胞极度增高,leukocyte histogram,L M N 35 90 160 450 fl,试剂反应前后细胞形态的变化,干扰因素: 白细胞团块
3、或破坏 冷球蛋白 单克隆蛋白 有核红细胞 血小板团块 未溶解红细胞,platelet histogram,2 20 fl,干扰因素 血小板聚集 巨大血小板 白细胞碎片 红细胞碎片 冷球蛋白 小红细胞,正常参考范围:女(3.55)1012/L 男 (45.5)1012/L,2)红细胞计数临床意义,生理性变化 年龄与性别的差异 精神因素 剧烈体力运动和劳动 气压降低 妊娠中、后期,(1)红细胞和血红蛋白量减少:在临床最常见于各种原因的贫血anemia。 急性、慢性红细胞丢失过多:如各种原因的出血。 红细胞寿命缩短:如各种原因的溶血 造血原料不足 骨髓造血功能减退,病理性变化,(2)红细胞增多 原发
4、性红细胞增多:见于真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症等。 继发性红细胞增多:常见于可以引起低氧血症的疾病:心血管病、肺疾病、异常血红蛋白病。 肾上腺皮质功能亢进(库欣病),可能与皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有关、药物肾上腺素、糖皮质激素、雄激素等。 相对性红细胞增多 脱水、利尿剂,粒细胞池granulocyte pool,Mitotic pool,Maturation pool,Storage pool,Margin pool,Circulating pool,原粒 中幼粒 杆状核 早幼粒 晚幼粒 分叶核 循环池 逸出血 分裂池 成熟池 贮备池 管,进 边缘池 入组织 骨髓约10天
5、血液约 组织 Bone marrow 10h 12天,) 粒细胞计数临床意义,白细胞增高 暂时性:严寒暴热,边缘池释放 持续性:化脓性感染或晚期肿瘤,贮备池粒细胞入血;慢性粒细胞白血病,核分裂池增大、细胞周期延长、血运转时间延长。 白细胞减低 暂时性:伤寒可能与细菌内毒素抑制骨髓释放成熟粒细胞入血。 持续性:原发性和继发性再生障碍性贫血,骨髓粒细胞生成不足;系统性红斑狼疮、脾功能亢进,粒细胞破坏过多。,正常参考范围:(410)109/L,2.血红蛋白测定determining the concentration of hemoglobin,Hemoglobin Structure,方法meth
6、od 氰化高铁血红蛋白法hemiglobincyanide (HiCN)method,THE NORMAL HUMAN HEMOGLOBENS,参考范围: 成年:男性120160g /L 女性:110150g/L 新生儿:170200g/L 老年(70岁以上): 男性:94.2122.2g/L 女性:86.5111.8g/L,临床意义:与红细胞计数相似,但对贫血程度判断的准确性优于红细胞计数。,layer after blood centrifuged,3.红细胞比容 hematocrit(packed cell volume),definition: Relative volume of b
7、lood occupied by erythrocytes. An average figure for humans is 45 per cent, i.e. A packed red cell volume of 45ml in 100ml of blood.,参考范围: 微量法:男性0.470.04 女性0.420.05 临床意义: 用于判断贫血及计算红细胞3个平均指数,Hematocrit,Centrifuging Hematocrit is % of total volume made of cells,手工法,AHA,HCT=RBCMCV,4.红细胞三个平均指数erythrocyt
8、e indices,Mean corpuscular volume MCV=Hct1031012/RBC (fL) 正常参考值:8090fL mean corpuscular hemoglobin MCH=Hb1012/RBC(Pg) 正常参考值:2732Pg mena corpuscular hemoglobin concentration MCHC=Hb/Hct 正常参考值:320360,类型 MCV(fl) MCH(pg) MCHC (%) 病因 大细胞性贫血 100 31 32-36 巨幼贫等 正常细胞性贫血 82-95 27-31 32-36 再障等 小细胞低色素性 80 27 32
9、 缺铁贫等 贫血 单纯小细胞性 80 27 32-36 慢性感染、 贫血 炎症等,贫血的形态学分类,5.红细胞体积分布宽度 red blood cell volume distribution width, RDW 由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出,反映所测标本中红细胞体积大小的异,质程度,常用变异系数(CV)表示。它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观和准确。,参考范围: 成人:11.6%14.6%,临床意义: 1)进行贫血形态学新的分类 1983年Bessman提出用MCV和RDW 作为贫血的形态学分类的新指标,如果配合红细胞直方图,则更有助于判断贫血的病情和疗效。 2)缺铁性
10、贫血(iron deficiency anemia, IDA)的筛选诊断和疗效观察 RDW增大:对缺铁性贫血诊断的灵敏度达95%以上,但特异性不强。 3)鉴别诊断 缺铁性贫血RDW一般增高,而轻型-珠蛋白生成障碍性贫血RDW一般正常。,6.红细胞沉降率 Erythrocyte sedimentation rate(ESR),血沉过程一般分为3期: 缗钱状红细胞形成期:一般要经过数分钟至10min 快速沉降期:形成缗钱状红细胞以等速下降,约40min 细胞堆积期:又称缓慢沉积期或挤紧期,此时红细胞堆积在试管底部。,The ESR measures the distance a red blood
11、 cell falls in a vertical tube over a given period of time.,血沉影响因素: 影响离体血液红细胞沉降的理化因素较为复杂。 1)红细胞:数量、表面积、厚度、直径和血红蛋白量有关。影响红细胞缗钱状形成主要因素有: 2)血浆中各种蛋白的比例 与总蛋白浓度无关。白蛋白带负电荷,细胞相互排斥,不利于红细胞缗钱状的形成,使红细胞沉降速度减缓;而大分子蛋白,如纤维蛋白原、急性反应蛋白、免疫球蛋白和巨球蛋白等以及胆固醇、甘油三酯,能促进红细胞缗钱状的形成,加快红细胞的沉降。,参考范围:(魏氏法) 1850岁:男性010mm/h,女性020mm/h。 6
12、5岁:血沉正常上限增加510mm/h,临床意义: 优势:简单、易行,常用的、经验性的检查。 缺点:缺乏特异性。 注意: 考虑其他因素 血沉显著增高有临床意义 轻微增加常难以解释,7. 网织红细胞计数 reticulocyte(Ret),晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,其胞质中残存非变性嗜碱性物质核糖核酸(ribomucleic acid,RNA),经煌焦油蓝(brilliant cresyl blue)等活体染色后,嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒,颗粒与颗粒连缀成线而得名。体积通常一般为79m。,ICSH分为4型:正常周围血型网织红细胞约为0.20.3,IV型约0.70.8,但骨髓红
13、系明显增生时,可出现I型和II型网织红细胞。,检测方法: 1)普通光学显微镜法 用活体染色(煌焦油蓝等染液)方法显示红细胞内网状结构 2)网织细胞计数仪法 用荧光染料(如吖啶橙、派若宁-Y、噻唑橙)使含RNA的网织红细胞着色,用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)计数并计算出网织红细胞的百分比。 3)血液分析仪法 原理与网织细胞计数仪法相似。,相对值 0.0050.015 绝对值 (2484)109/L,血液分析仪法 最新血液分析仪,采用流式细胞法也可对Ret作分类计数,并提供与网织红细胞相关的多个参数: 红细胞绝对值(Rct) 网织红细胞百分比(Rct%) 网织红细胞平均体积(
14、mean reticulocyte volume, MCVr) 网织红细胞血红蛋白分布宽度(reticulocyte hemoglobin distribution width , HDWr) 网织红细胞血红蛋白含量(reticulocyte hemoglobin content , CHr) 网织红细胞平均血红蛋白浓度(mean reticulocyte hemoglobin concentration , MCHCr) LFR、MFR、HFR 网织红细胞成熟指数(reticulocyte maturity index, RMI)RMI=(MFR+HFR)/LFR100,1判断骨髓红细胞造血情况 (1)网织红细胞增多:表示骨髓红细胞生成旺盛。 (2)网织红细胞减少:见于再生障碍性贫血(诊断标准之一)、溶血性贫血再障危象。,2观察贫血疗效 缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血治疗过程中,如Ret增高,表明治疗有效,是贫血患者随访检查的项目之一。 3骨髓移植后监测骨髓造血恢复,网织红细胞计数的临床意义clinical significance of reticulocyte count,8、血涂片检查blood film examination标本的制备making and staining blood