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1、实验诊断学,20109,血液一般检查,general examination of blood,RBC neutrophil hematocyte eosinophil （45%） WBC basophil blood monocyte platelet lymphocyte Fg plasma water （55%） serum solid element,1)血细胞计数方法(1)手工法(白细胞计数),0.38ml稀释液 充分混匀 20ul血液 充池、静止 镜下计数,Neubauer计数盘,3mm WBC WBC WBC WBC 1mm,计算：WBC/L=N/41010620,(2)自动血液
2、分析仪automated hematology analyzer,AHA,电阻抗法血细胞分析仪的原理principal of coulter hematology ststem,直方图histogram,电阻抗方法的检测原理,电脉冲信号,erythrocyte histrogam,normalcyte microcyte macrocyte 36 360 fl,干扰因素： 红细胞聚集 红细胞溶解 大、小红细胞 血小板聚集 巨大血小板 冷球蛋白 白细胞极度增高,leukocyte histogram,L M N 35 90 160 450 fl,试剂反应前后细胞形态的变化,干扰因素： 白细胞团块
3、或破坏 冷球蛋白 单克隆蛋白 有核红细胞 血小板团块 未溶解红细胞,platelet histogram,2 20 fl,干扰因素 血小板聚集 巨大血小板 白细胞碎片 红细胞碎片 冷球蛋白 小红细胞,正常参考范围：女（3.55）1012/L 男 （45.5）1012/L,2)红细胞计数临床意义,生理性变化 年龄与性别的差异 精神因素 剧烈体力运动和劳动 气压降低 妊娠中、后期,（1）红细胞和血红蛋白量减少：在临床最常见于各种原因的贫血anemia。 急性、慢性红细胞丢失过多：如各种原因的出血。 红细胞寿命缩短：如各种原因的溶血 造血原料不足 骨髓造血功能减退,病理性变化,（2）红细胞增多 原发
4、性红细胞增多：见于真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症等。 继发性红细胞增多：常见于可以引起低氧血症的疾病：心血管病、肺疾病、异常血红蛋白病。 肾上腺皮质功能亢进（库欣病），可能与皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有关、药物肾上腺素、糖皮质激素、雄激素等。 相对性红细胞增多 脱水、利尿剂,粒细胞池granulocyte pool,Mitotic pool,Maturation pool,Storage pool,Margin pool,Circulating pool,原粒 中幼粒 杆状核 早幼粒 晚幼粒 分叶核 循环池 逸出血 分裂池 成熟池 贮备池 管，进 边缘池 入组织 骨髓约10天
5、血液约 组织 Bone marrow 10h 12天,) 粒细胞计数临床意义,白细胞增高 暂时性：严寒暴热，边缘池释放 持续性：化脓性感染或晚期肿瘤，贮备池粒细胞入血；慢性粒细胞白血病，核分裂池增大、细胞周期延长、血运转时间延长。 白细胞减低 暂时性：伤寒可能与细菌内毒素抑制骨髓释放成熟粒细胞入血。 持续性：原发性和继发性再生障碍性贫血，骨髓粒细胞生成不足；系统性红斑狼疮、脾功能亢进，粒细胞破坏过多。,正常参考范围：（410）109/L,2.血红蛋白测定determining the concentration of hemoglobin,Hemoglobin Structure,方法meth
6、od 氰化高铁血红蛋白法hemiglobincyanide (HiCN)method,THE NORMAL HUMAN HEMOGLOBENS,参考范围： 成年：男性120160g /L 女性：110150g/L 新生儿：170200g/L 老年（70岁以上）： 男性：94.2122.2g/L 女性：86.5111.8g/L,临床意义：与红细胞计数相似，但对贫血程度判断的准确性优于红细胞计数。,layer after blood centrifuged,3.红细胞比容 hematocrit(packed cell volume),definition： Relative volume of b
7、lood occupied by erythrocytes. An average figure for humans is 45 per cent, i.e. A packed red cell volume of 45ml in 100ml of blood.,参考范围： 微量法：男性0.470.04 女性0.420.05 临床意义： 用于判断贫血及计算红细胞3个平均指数,Hematocrit,Centrifuging Hematocrit is % of total volume made of cells,手工法,AHA,HCT=RBCMCV,4.红细胞三个平均指数erythrocyt
8、e indices,Mean corpuscular volume MCV=Hct1031012/RBC （fL） 正常参考值：8090fL mean corpuscular hemoglobin MCH=Hb1012/RBC（Pg） 正常参考值：2732Pg mena corpuscular hemoglobin concentration MCHC=Hb/Hct 正常参考值：320360,类型 MCV(fl) MCH(pg) MCHC (%) 病因 大细胞性贫血 100 31 32-36 巨幼贫等 正常细胞性贫血 82-95 27-31 32-36 再障等 小细胞低色素性 80 27 32
9、 缺铁贫等 贫血 单纯小细胞性 80 27 32-36 慢性感染、 贫血 炎症等,贫血的形态学分类,5.红细胞体积分布宽度 red blood cell volume distribution width, RDW 由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出，反映所测标本中红细胞体积大小的异,质程度，常用变异系数（CV）表示。它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观和准确。,参考范围： 成人：11.6%14.6%,临床意义： 1)进行贫血形态学新的分类 1983年Bessman提出用MCV和RDW 作为贫血的形态学分类的新指标，如果配合红细胞直方图，则更有助于判断贫血的病情和疗效。 2)缺铁性
10、贫血（iron deficiency anemia, IDA）的筛选诊断和疗效观察 RDW增大：对缺铁性贫血诊断的灵敏度达95%以上，但特异性不强。 3)鉴别诊断 缺铁性贫血RDW一般增高，而轻型-珠蛋白生成障碍性贫血RDW一般正常。,6.红细胞沉降率 Erythrocyte sedimentation rate(ESR）,血沉过程一般分为3期： 缗钱状红细胞形成期：一般要经过数分钟至10min 快速沉降期：形成缗钱状红细胞以等速下降，约40min 细胞堆积期：又称缓慢沉积期或挤紧期，此时红细胞堆积在试管底部。,The ESR measures the distance a red blood
11、 cell falls in a vertical tube over a given period of time.,血沉影响因素： 影响离体血液红细胞沉降的理化因素较为复杂。 1)红细胞：数量、表面积、厚度、直径和血红蛋白量有关。影响红细胞缗钱状形成主要因素有： 2)血浆中各种蛋白的比例 与总蛋白浓度无关。白蛋白带负电荷，细胞相互排斥，不利于红细胞缗钱状的形成，使红细胞沉降速度减缓；而大分子蛋白，如纤维蛋白原、急性反应蛋白、免疫球蛋白和巨球蛋白等以及胆固醇、甘油三酯，能促进红细胞缗钱状的形成，加快红细胞的沉降。,参考范围：(魏氏法) 1850岁：男性010mm/h，女性020mm/h。 6
12、5岁：血沉正常上限增加510mm/h,临床意义： 优势：简单、易行，常用的、经验性的检查。 缺点：缺乏特异性。 注意： 考虑其他因素 血沉显著增高有临床意义 轻微增加常难以解释,7. 网织红细胞计数 reticulocyte(Ret）,晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，其胞质中残存非变性嗜碱性物质核糖核酸（ribomucleic acid，RNA），经煌焦油蓝（brilliant cresyl blue）等活体染色后，嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒，颗粒与颗粒连缀成线而得名。体积通常一般为79m。,ICSH分为4型:正常周围血型网织红细胞约为0.20.3，IV型约0.70.8，但骨髓红
13、系明显增生时，可出现I型和II型网织红细胞。,检测方法： 1)普通光学显微镜法 用活体染色（煌焦油蓝等染液）方法显示红细胞内网状结构 2)网织细胞计数仪法 用荧光染料（如吖啶橙、派若宁-Y、噻唑橙）使含RNA的网织红细胞着色，用流式细胞仪（flow cytometry，FCM）计数并计算出网织红细胞的百分比。 3)血液分析仪法 原理与网织细胞计数仪法相似。,相对值 0.0050.015 绝对值 (2484)109/L,血液分析仪法 最新血液分析仪，采用流式细胞法也可对Ret作分类计数，并提供与网织红细胞相关的多个参数： 红细胞绝对值（Rct） 网织红细胞百分比（Rct%） 网织红细胞平均体积（
14、mean reticulocyte volume, MCVr） 网织红细胞血红蛋白分布宽度（reticulocyte hemoglobin distribution width , HDWr） 网织红细胞血红蛋白含量（reticulocyte hemoglobin content , CHr） 网织红细胞平均血红蛋白浓度（mean reticulocyte hemoglobin concentration , MCHCr） LFR、MFR、HFR 网织红细胞成熟指数（reticulocyte maturity index， RMI）RMI=（MFR+HFR）/LFR100,1判断骨髓红细胞造血情况 （1）网织红细胞增多：表示骨髓红细胞生成旺盛。 （2）网织红细胞减少：见于再生障碍性贫血（诊断标准之一）、溶血性贫血再障危象。,2观察贫血疗效 缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血治疗过程中，如Ret增高，表明治疗有效，是贫血患者随访检查的项目之一。 3骨髓移植后监测骨髓造血恢复,网织红细胞计数的临床意义clinical significance of reticulocyte count,8、血涂片检查blood film examination标本的制备making and staining blood
