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1、大豆抗营养因子,马 永 喜 中国农业大学农业部饲料工业中心 2004.10 成都,研究队伍,专业架构 动物营养 饲料分析 微生物学 发酵工程 生物技术 免 疫 学,试验猪舍,动物营养代谢室,科研大楼与中试车间,主要研究领域 猪营养与饲料,研究方向: 大豆抗营养因子 分子营养学 营养与免疫 营养代谢与需要量 饲料营养价值评定 饲料添加剂 营养与畜产品品质,大豆抗营养因子 热稳定性:抗原蛋白(球蛋白和-聚球蛋白) 大豆寡糖 热不稳定性:胰蛋白酶抑制因子 糜蛋白酶抑制因子 凝集素,用酶联免疫法检测大豆饼、粕中抗胰蛋白酶因子浓度(39170557 ),仔猪利用膨化全脂大豆机理的研究 (39470523
2、 ),大豆寡糖对仔猪抗营养作用机理的研究 (39770549 ),大豆凝集素受体结构及其类似物作用机理研究 (30070561 ),2002年国家自然科学基金研究成果专著出版基金(30224001) 2003年大豆抗营养因子,2004年 大豆中主要抗原蛋白的免疫 生物学特性及其致敏机理的研究(30430520 ),大豆抗原蛋白与仔猪断奶综合征,大 豆 抗 原 蛋 白,生产性能,免疫机能,肠道形态,增重,采食量,淋巴细胞转化,血清抗体IgG,绒毛高度,隐窝深度,大豆抗原蛋白与生长性能,大豆抗原蛋白使仔猪在断奶后第一周生长速度明显下降(P0.05),大豆抗原蛋白与上皮淋巴细胞转化,仔猪断奶后5wk
3、的上皮淋巴细胞转化率高于断奶后1wk,说明断奶抑制仔猪免疫机能,大豆抗原蛋白与血清特异抗体IgG,大豆抗原蛋白使血浆特异IgG滴度升高,表明大豆蛋白大分子穿过肠道黏膜屏障,大豆抗原蛋白与绒毛形态,左上 (4周龄豆粕组) 左下 (8周龄豆粕组) 右上 (4周龄奶粉组) 右下 (8周龄奶粉组),大豆抗原蛋白与绒毛高度,大豆抗原蛋白降低了断奶后一周仔猪的肠道绒毛高度,对断奶后5周仔猪没有影响,大豆抗原蛋白与隐窝深度,大豆抗原蛋白使仔猪在断奶后1周和5周的隐窝深度增加,大豆抗原蛋白,血清特异Ig G滴度升高,肠道绒毛萎缩,表 面粗糙,隐窝增生,迟发性过敏反应,生长性能下降,J. Anim. Sci.,
4、 68: 1790-1799; 69: 3299-3307; 69 : 4062-4069,肠上皮,循环系统,膨化全脂大豆与生产性能,膨化全脂大豆显著改善仔猪的生产性能(P0.05),大豆抗原蛋白造成肠道损伤是断奶后腹泻的原发性因素,Qiao等, 2003, AJAS, 16(1): 63-69.,膨化全脂大豆与仔猪肠道形态,膨化全脂大豆显著改善肠道吸收状况(P0.05),m,膨化全脂大豆与肠道细胞周转,膨化全脂大豆减少肠黏膜细胞周转速度,节约肠道维持能量需要 AJAS., 11(2): 201-207; 16(1): 63-69,膨化全脂大豆改善肠道形态,降低细胞周转速度和肠道的维持能量需要
5、,综合表现为提高仔猪的生长性能。,大豆寡糖抗营养作用机理,大豆寡糖与生长性能 大豆寡糖与仔猪断奶后腹泻 大豆寡糖的降解率 大豆寡糖抗营养作用机理,大豆寡糖与生长性能,2%大豆寡糖降低了仔猪断奶后3周内的生长性能,大豆寡糖与仔猪断奶后腹泻,大豆蛋白和较高水平的大豆寡糖均可导致仔猪腹泻,大豆蛋白是主要原因,大豆寡糖的降解率,大豆寡糖在仔猪肠道的降解程度与日粮寡糖含量有关,随含量增加,降解程度降低,大豆寡糖与肠道微生物菌群,高水平大豆寡糖抑制了肠道中有益菌的生长 AJAS., 14(11): 1598-1604 Arch. Anim. Nutr., 57(1): 1-10,大豆寡糖与食糜通过速度,2
6、%水苏糖组的食糜流出高峰较早(15h),表明食糜的通过速度较快,大豆寡糖 养分消化率,大豆寡糖使仔猪日粮 DM、OM、CF 消化率降低,小 结,大豆寡糖的抗营养作用与日粮大豆寡糖水平有关 大豆蛋白和大豆寡糖都是引起仔猪腹泻的因素,大豆蛋白是主要原因 大豆寡糖在小肠中可部分降解,全消化道的降解率与日粮水平有关 大豆寡糖抗营养作用机理为:抑制有益微生物的生长,加快食糜的通过速度,降低日粮养分消化率,分离出可生产-半乳糖苷酶的扬奇青霉,对葡萄糖具有抗性的-半乳糖苷酶高产菌株,扬奇青霉发酵生产-半乳糖苷酶与工艺,-射线和亚硝基胍诱变,固体发酵生产-半乳糖苷酶工艺参数和粗酶液制备工艺,添加-半乳糖苷酶对
7、仔猪生产性能、养分消化率 和微生物区系的影响,筛选出高产-半乳糖苷酶的扬奇青霉(0.32 U/ml发酵液或29.12 U/g 干基) 确定了固体发酵生产-半乳糖苷酶的工艺参数 添加该酶可提高仔猪的养分消化率,且对微生物区系有利 申请微生物菌株保藏和国家技术发明专利一项,Arch. Anim. Nutr., 56(5): 327-337,大豆凝集素的检测、纯化和对大鼠抗营养机理的研究,建立大豆凝集素的间接抑制ELISA,优化大豆凝集素的纯化制备方案,不同水平大豆凝集素对大鼠氮代谢的影响,不同水平大豆凝集素对大鼠生长、 器官增生和血液胰岛素和CCK水平的影响,抵抗降解,结合于上皮细胞,影响内分泌细
8、胞的功能和胃肠道激素的变化,内吞进入细胞,诱发上皮细胞代谢变化和粘膜增生,进入循环系统,调控内分泌系统,诱导胰腺的增生,大豆凝集素的抗营养作用机理,Arch. Anim. Nutr., 57(4): 267-277 57(5): 369-380,免疫原性,致敏作用,影响因素 (热、离子强度 pH值和消化酶),抗原蛋白及其亚基 的定量测定,单克隆抗体制备,肠道细胞,机体组织,仔猪 发育阶段,为降低抗原蛋白免疫原性,减轻或消除其对人和动物的危害提供理论基础,大豆抗原蛋白免疫生物学特性及致敏机理研究,关键问题,Glycinin碱性多肽、-Conglycinin的亚基特异性单克隆抗体的制备技术 Glycinin、-Conglycinin及其分解产物在消化道、血液、免疫器官等部位分布的时空规律,它们分解代谢和免疫原性的动态变化规律 Glycinin、-Conglycinin及其分解产物进出消化道黏膜上皮细胞的过程和机理,Thank You !,