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1、变酸？,巴斯德,法国，微生物学家,失败的原因：发酵物中混入了杂菌,课题1 微生物的实验室培养,了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。,一.课题目标,无菌技术的操作。,二.课题重难点,1.何为培养基？,3.各种培养基的具体配方不同，但其基本成分都相同，都包括哪些营养成分？,自主学习:,2.按照物理形态、化学成分、用途分，培养基的种类有哪些？,基础知识,(一)培养基,人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。,(一)培养基,1.概念：,2.类型及应用：,液体培养基 固体培养基,据物理性质分,天然培养基 合成培养基,据化学成分分,选择培养基 鉴别培养
2、基,据用途分,2.类型及应用：,(一)培养基,常用于工业生产,用于微生物的分离、鉴定、计数,加琼脂,常用于工业生产,常用于分类、鉴定,培养、分离出特定微生物,鉴别不同种类的微生物,在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。,根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成。,液体培养基：,表面生长,均匀混浊生长,沉淀生长,练习,下列有关培养基的叙述正确的是（ ） A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B.培养基只有两类：固体培养基和液体培养基 C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉
3、眼可见的单个细菌,A,要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ） A.固体培养基 B.液体培养基 C.加入青霉素的培养基 D.加入高浓度食盐的培养基,A,练习,碳源,氮源,无机盐,水,(一)培养基,3.营养要素,还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。,如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、碱基),牛肉膏蛋白胨培养基配方,牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000ml。,配方中的各成分为微生物提供了哪些营养？,(一)培养基,3.营养要素：,碳源、氮源、 磷酸盐和维生素,氮源和维生素,无
4、机盐,H、O,对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源。即有些化合物作为营养要素成分时并非单一方面的作用。 并非所有微生物都需添加特殊营养物质,碳源、氮源、生长因子的比较,凡能提供所需碳元素的物质,凡能提供所需氮元素的物质,生长必不可少的微量有机物,构成细胞物质和一些代谢产物，有些还是异养生物的主要能源物质,合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物,酶、核酸等的组成成分,分离酵母菌、霉菌等真菌,分离金黄色葡萄球菌,分离固氮菌,分离自养型微生物,下列叙述错误的是（ ） A.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 B.培养霉菌时需将培养基中的pH调至碱性 C.培养细菌时需将pH调至中性或微碱性
5、 D.培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件,B,练习,1、何为无菌技术？无菌技术包括哪些方面？ 2、消毒和灭菌的区别？ 3、常用的消毒方法有哪些？ 4、常用的灭菌方法有哪些？,自主学习：,(二)无菌技术,1.获得纯净培养物的关键：,防止外来杂菌的入侵,2.无菌技术包括：,对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒； 用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌； 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行； 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触。,(二)无菌技术,P15思考题,练习,下列操作与无菌技术无关的是（ ） A.接种前用肥皂洗双手，再用酒精
6、擦拭双手 B.接种前用火焰烧灼接种针 C.培养基在50 左右时搁置斜面 D.在酒精灯火焰旁边完成,C,消毒 使用较为温和的物理或化学方法，杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。,3.消毒与灭菌,灭菌,使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。,理化因素的作用强度,消灭微生物的数量,芽孢和孢子能否被消灭,(1)定义,1、煮沸消毒法: 100煮沸5-6min，日常生活中广泛应用 2、巴氏消毒法： 70-75 煮30min或80煮15min，牛奶、啤酒等不宜进行高温消毒的 3、化学药剂消毒法: 75%酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等 4、紫外线消毒法： 用于接种室空气
7、消毒 ,(2)消毒的方法：,3.消毒与灭菌,1、灼烧灭菌： 用于微生物接种工具，如：接种环、接种针或其他金属用具等，及接种过程中试管口或锥形瓶口的灭菌,(3)灭菌的方法：,3.消毒与灭菌,2、干热灭菌： 160-170 下加热1-2h。 用于玻璃器皿、金属用具等能耐高温、需保持干燥的物品。 3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 下维持 15-30min. 广泛用于培养基及多种器材、物品。,(3)灭菌的方法：,3.消毒与灭菌,P16 请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的
8、双手,答：（1）（2）需要灭菌；（3）需要消毒。,旁栏思考,练习,细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（ ） A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针 C.培养基、手、接种针 D.培养基、手、高压锅,C,变形题,培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（ ） 化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线消毒 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法 A. B. C. D. ,A,练习,外科手术器械和罐头食品的处理，要以能够杀死什么为标准（ ） A.球菌 B.杆菌 C.弧菌 D.芽孢,D,练习,微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是（ ） A.细菌的大小、形状、颜色 B.菌落的大小、形状、颜色 C.有无鞭毛 D.培养基的不同,B,关于微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ） A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量,D,练习,规律：对异养微生物来说，含C、H、O、N的 化合物既是微生物的碳源，又是氮源； 有机碳源能提供能量，无机碳源不能提供能量； 无机物也可提供碳源、氮源和能源。,
