白血病的实验室诊断PPT课件

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1、.,1,白血病的实验室诊断,安徽省立医院 丁邦胜,.,2,患者有不明原因的持续或反复发热，贫血，恶液质，有出血倾向，肝、脾、淋巴结肿大，骨骼疼痛或胸骨有压痛，不明原因的消瘦，体力逐渐下降等症状就诊时，医生要高度警惕。考虑是否为血液病？,.,3,血常规的检测是必不可少的,.,4,血常规中会发现原始或幼稚细胞，或某一种细胞明显增多或减少,.,5,.,6,.,7,.,8,当高度怀疑是白血病，骨髓穿刺是首要进行的，骨髓细胞学检测是诊断白血病及疗效观察、判断预后有着重要作用。,.,9,白血病是起源与造血系统的恶性肿瘤性疾病，其特征是造血组织中某一系列或几系列血细胞无控制地增生、并侵润其他组织，骨髓及外周

2、血中以原始及早期幼稚细胞为主，临床常见贫血、发热和肝、脾、淋巴结肿大等表现，其起病急，发展快，未经治疗一般病程6个月之内。 病因：1、电离辐射 2、化学因素 3、病毒 4、遗传因素,.,10,按白血病细胞成熟障碍的情况，以及病情发展快慢将白血病划分为急性白血病和慢性白血病,.,11,急性白血病的分型由过去的单一的FAB形态学分型方法发展为:形态学（Morphological)、免疫学(Immunological)、细胞遗传学(Cytogenetics)、分子生物学（Molecular biology)的MICM分型方法,.,12,白血病细胞形态特点,细胞大小不均及形态异常 胞核异常，核形不规则

3、，可见扭曲、折叠 核仁异常，核仁有的大而明显，有的不清 变性的征象：Auers小体、蓝细胞。,.,13,骨髓检查是诊断白血病的主要方法 骨髓中原始粒细胞或原始（单、淋）+幼稚（单、淋）细胞20%方可诊断为急性白血病 急性白血病分为急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病。 常用的细胞化学染色：POX、NSE、NSE-NaF、CE、NAP、ACP、PAS等,.,14,急性白血病形态学特点：,血象：贫血，白细胞大部分明显最高，少数减少，可见原始、幼稚细胞，血小板明显减少。 骨髓象：常增生明显活跃或极度活跃，原始、幼稚细胞明显增多，常常伴有形态学异常，红系、巨核系受抑制。,.,15,根据细胞化学染色

4、将急性白血病分型,POX,3%,3%,ANLL,ALL,NSE，NSE-NaF,M3 M1、M2 M6 M4 M5 L1 L2 L3,不抑制 抑制,早幼粒 原始 原始+幼稚,红系50%,细胞体积大小、胞浆空泡,小细胞 大小细胞 大细胞胞浆有空泡,NSE，NSE-NaF,抑制 不抑制,.,16,细胞免疫分型的临床应用 1 有助于识别不同系列的细胞 识别髓系细胞的抗体有CD13、CD14、CD15、CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、CD166等。识别淋巴细胞系列的抗体有：CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD19、CD20、CD52、CD7

5、7等。识别巨核细胞和血小板的抗体有CD41、CD42、CD61、等。识别红细胞系列的抗体常用血型糖蛋白A或B，CD71。,.,17,识别不同的淋巴系统 识别成熟T淋巴细胞的抗体有CD2、CD3、CD4、CD7、CD8等。识别成熟B淋巴细胞的抗体有CD19、CD20、CD22等。识别NK细胞的抗体有CD16、CD56等。,.,18,用于识别不同分化阶段的细胞 CD34+、CD90+、Lin-被认为使造血干细胞的主要标志; CD34+、CD33+为造血干细胞向髓系定向的标志; CD34+、TDT+、CD10+、CD7+为T淋巴细胞系祖细胞标志； CD34+、CD19+为B淋巴细胞系祖细胞标志。,.

6、,19,.,20,.,21,急性粒细胞白血病（M1、M2） M1：急性粒细胞白血病未成熟型，骨髓中原粒细胞90% （非红系），早幼粒很少，中幼粒以下阶段不见或罕见。 M2：急性粒细胞白血病部分成熟型，分为两个亚型：M2a：骨髓中原粒细胞3090% （非红系），早幼粒以下阶段10%，单核细胞20%；M2b：异常中性中幼粒30%。 细胞化学染色：POX3%，NSE：阴性弱阳性，NSE-NaF：不抑制，NAP：减低，CE：阳性，PAS：阴性,.,22,M1、M2a,.,23,POX,.,24,NSE,.,25,NSE-NaF,.,26,M1免疫表型： HLADR,MPO, CD34,CD33,CD1

7、3阳性，CD11,CD15阴性有t(9;22)形成BCR/ABL融合基因,.,27,M2免疫表型： HLADR,MPO, CD33,CD13阳性，有t(6; 9)形成DEK-CAN融合基因,.,28,M2b,.,29,免疫表型： HLA-DR,MPO, CD57,CD33,CD13阳性，其中CD33,CD13阳性率减低，更成熟的抗原CD15和CD11b阳性率增高有t(8;21)（q22;q22)或AML1基因重排,.,30,M3：急性颗粒增多的早幼粒细胞白血病 分为两个亚型： M3a（粗颗粒型），M3b（细颗粒型） 细胞化学染色：POX：100%强阳性，NSE：阳性，NSE-NaF：不抑制，N

8、AP：减低，CE：阳性,.,31,M3a,.,32,M3b,.,33,M3 POX,.,34,M3 NSE,.,35,M3 NSE-NaF,.,36,免疫表型： CD33,CD13阳性，CD34、HLA-DR阴性 遗传学：t（15；17）及PNL/RARa融合基因,.,37,M4：急性粒-单细胞白血病。分为4个亚型 M4a：原始和早幼粒细胞为主，原、幼单和单核细胞20%（非红系） M4b：原、幼单核细胞为主，原始和早幼粒细胞 20%（非红系） M4c：原始细胞即具有粒细胞系又具有单核细胞系形态特征30% （非红系） M4eo：除上述特点外，还有粗大而圆的嗜酸颗粒及嗜碱颗粒细胞占530% （非红

9、系） 细胞化学染色：POX3%，NSE：阳性，NSE-NaF：抑制，CE：部分阳性，,.,38,M4,.,39,M4 NSE 单为主,.,40,NSE-NaF,.,41,NSE 粒为主,.,42,NSE-NaF,.,43,M4eo,.,44,免疫表型：CD13,CD14,CD15.CD33.HLA-DR阳性 遗传学：M4Eo有16号染色体异常，inv(16)(p13;q22)或t(16;16)(p13;q22),.,45,M5：急性单核细胞白血病，分为两个亚型 M5a：未分化型：骨髓中原单80% （非红系） M5b：部分分化型：骨髓中原始和幼稚单核细胞30%，原单细胞80% （非红系） 细胞化

10、学染色：POX3%（弱阳性），NSE：阳性，NSE-NaF：抑制，NAP：正常或增高，CE：阴性,.,46,M5b,.,47,M5 POX,.,48,M5 NSE,.,49,M5 NaF,.,50,免疫表型： CD11,CD13,CD14,CD15,CD33,HLA-DR,CD36,CD64和溶菌酶阳性，CD34阴性 遗传学：常有t/del(11)(q23),多见于M5a, t(9;11)易位致MLL-AF9融合基因及t(11;19)易位致MLL-ENL融合基因多见,.,51,M6：急性红白血病。骨髓中红细胞系50%，且形态学异常，原粒（或原单+幼单）30%（非红系）；若血片中原粒或原单5%，

11、骨髓中原粒（或原单+幼单）20%（非红系） M6前期为红血病期，为单一红系统恶性增生，且形态异常，原红30% 细胞化学染色：POX3%，NSE：阴性弱阳性，NSE-NaF：不抑制，PAS：幼红细胞阳性,.,52,M6,.,53,红血病,.,54,M6 PAS,.,55,免疫表型：原始红细胞的血型糖蛋白A,CD71阳性，同时表达髓系抗原： CD13, CD33, CD117,MPO等， CD34阴性或阳性 遗传学：有5q-/-5,7q-/-7,-3,+8等非特异染色体异常,.,56,M7：急性巨核细胞白血病：骨髓中原始巨核细胞20%。 细胞化学染色：POX阴性，NSE：阴性， CE：阴性，PAS

12、：阳性,.,57,.,58,.,59,.,60,免疫表型： CD41和、或CD61阳性 遗传学：有inv(3)或del(3);+8,+21等异常,.,61,急性髓细胞白血病微分化型（M0),细胞形态无明显特征，细胞化学染色绝大部分为阴性。 免疫表现：表达一种或几种髓细胞抗原：CD13,CD33,CD117。不表达T、B系列抗原，表达细胞较早期抗原：CD34,TDT,HLA-DR等。而成熟阶段如CD11b,CD15,CD14等不表达。,.,62,急性淋巴细胞白血病根据细胞形态大小分为L1、L2、L3 细胞化学染色：POX3%，NSE：阴性弱阳性，NSE-NaF：不抑制，PAS：阳性，NAP：明显

13、增高。,.,63,L1：原始和幼稚淋巴细胞以小细胞为主，直径12um，核圆形，偶有折叠、凹陷，染色质粗，结构较一致，核仁小且不清楚，胞浆少。,.,64,L1,.,65,L1,.,66,L2：原始和幼稚淋巴细胞以大细胞为主，直径12um，核形不规则，有折叠、凹陷，染色质较疏松，结构较不一致，核仁清楚，胞浆量较多。,.,67,L2,.,68,L3：原始和幼稚淋巴细胞大小较一致，以大细胞为主，直径12um，核形较规则，染色质呈均匀点状，核仁清楚，胞浆较多，深蓝色，空泡明显。,.,69,L3,.,70,L3,.,71,ALL POX,.,72,ALL PAS,.,73,免疫表型：,.,74,遗传学：

14、70-90有克隆性核型异常，其中66为特异性染色体重排。 可见假二倍体，超二倍体，亚二倍体等 可见非特异性结构重排：6q-,t/del(9p),t/del(12p) 可见特异性结构重排：t(8;14),t(11;14),t(9;22),t(4;11),t(1;19)等,.,75,慢性白血病形态学特点：,血象：红细胞和血红蛋白早期正常，后随着病情发展逐渐下降；血小板早期正常或最高，晚期下降。白细胞显著增高，以后期细胞为主。 骨髓象：常增生极度活跃，某系细胞个阶段明显增生，常常伴有形态学异常，红系、巨核系早期正常，晚期受抑制。,.,76,慢性粒细胞白细胞,以各期粒细胞明显增生为主，嗜酸、嗜碱细胞明

15、显增多。,.,77,免疫学表现： 表达：CD13,CD33,CD15阳性。CD14,CD34,CD16,HLA-DR也可为阳性 遗传学：90-95有t(9;22)(q34;q11)易位， Ph染色体，可检出bcr/abl融合基因,.,78,慢性淋巴白血病形态学特点：,血象：白细胞显著增高，以成熟样淋巴细胞为主，有时可见少数原始、幼稚淋巴细胞。 骨髓象：常增生明显到极度活跃，以成熟样淋巴细胞增生为主，40%，粒、红系、巨核系早期正常，晚期受抑制。,.,79,免疫学表现： B-CLL呈或单克隆轻链型，主要表达：CD5,CD19,CD20.SmIg,FCM7等，不表达CD10和CD22. T-CLL主要表达CD2,CD3,CD8或CD4等，CD5阴性。 遗传学：B-CLL:+12检出率，还有t(11;14)(q13;q32),t(14;19)(q32;q13),13q14缺失。 T-CLL:有inv(14)(q11;q32),.,80,.,81,.,82,WHO急性白血病分型方法,.,83,.,84,.,85,.,86,谢谢！,/10/29,.,87,