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1、专题 2,微生物的培养与应用,课题 1 微生物的实验室培养 培养基,1概念,营养物质,人们按照微生物对_的不同需求，配制出供其 生长繁殖的营养基质。,2营养构成,碳源,特殊营养物质,(1)一般都含有水、_、氮源、无机盐。 (2)还要满足微生物生长对 pH、_以及 O2 的要求。 3分类 (1)液体培养基：配制成的液体状态的基质。 (2)固体培养基：配制成的固体状态的基质，在液体培养基 中加入凝固剂，如琼脂，制成琼脂固体培养基。,无菌技术,1消毒,温和,巴氏,(1)特点：使用较为_的物理或化学方法，仅杀死物 体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。 (2)常用方法：煮沸消毒法、_消毒法、化
2、学药剂消 毒法。,2灭菌,强烈,灼烧,(1)特点：使用_的理化因素杀死物体内外所有的微 生物。 (2)常用方法：_灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。,微生物培养的基本技术,1配制培养基,称量混合溶化调 pH分装包扎 2灭菌,加水加培养基密封排冷气维持压力,取出倒平板(或搁置斜面),3接种,稀释涂布平板,(1)接种过程：洗净双手点燃酒精灯接种贴标签。,(2)接种工具：包括_、涂布器。,接种环,(3)接种方法：平板划线法、_法。 (4)注意事项：整个操作过程要在_旁完成。,4培养,酒精灯火焰,接种后的培养皿放入恒温箱内培养。,菌种保藏,1临时保藏,固体斜面,4 ,(1)操作： 采用_培养基，菌落长成后
3、，放入_冰 箱中保藏，以后每 36 个月，转移一次新的培养基。 (2)缺点： 保存时间不长，菌种易被污染或产生变异。,2长期保存法,甘油管藏,采用_法，放入20 的冷冻箱中保存。,微生物的营养要素,1微生物的营养物质及功能,2.不同微生物对营养物质的需求,培养基的种类,续表：,关于微生物培养实验的注意事项,1配制培养基时，按照每个培养基消耗 1520 ml 的量,来估算总用量。,2灭菌后，培养基冷却到 55 后应及时进行倒平板操作。 如果不能及时操作，需要将培养基放到 55 左右的电热箱中保 温，以防止琼脂凝固。,3平板划线操作时每次灼烧的目的如下表：,4.实验后，所有用过的培养基、培养液等都
4、需要统一进行,高压蒸汽灭菌后再丢弃，否则将会造成环境污染。,微生物所需的营养要素,),【例 1】下列关于微生物营养的说法，正确的是( A同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B凡是碳源都能提供能量 C除水以外的无机物仅提供无机盐 D无机氮源也能提供能量,【名师点拨】：不同的微生物，所需营养物质有较大差别， 要针对微生物的具体情况分析。对于 A、B 选项，它的表达是 不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同 时是氮源，如 NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖； 有的碳源同时是氮源和能源，如蛋白胨。对于 C 选项，除水以 外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳可作为自养型 微
5、生物的碳源；NaHCO3 可作为自养型微生物的碳源和无机盐； 而 NaCl 则只能提供无机盐。对于 D 选项，无机氮源提供能量 的情况还是存在的，如 NH3 可为硝化细菌提供能量和氮源。,【答案】：D,【配对练习 1】下列有关碳源的叙述不正确的是(,),A碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物 B某些碳源可以作为微生物的主要能源物质 C蛋白质一定不能做碳源 D不同种类的微生物的碳源可能不同 解析：蛋白质也能做碳源。 答案：C,培养基的种类,【例 2】下列有关培养基的叙述正确的是(,),A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C固体培养基中加
6、入少量水即可制成液体培养基 D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的 单个细菌,【名师点拨】：培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基 质。培养基根据物理形态分为液体培养基、半固体培养基和固 体培养基；根据实验目的不同，可以分为普通培养基和选择培 养基，因此按照不同的分类标准，种类也不同。固体培养基是 因为加入了凝固剂琼脂造成的，不是因为水的多少。微生物在 固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个菌落，单个细 菌用肉眼看不到。,【答案】：A,【配对练习 2】关于配制培养基的叙述中，正确的是(,),A制作固体培养基必须加入琼脂 B加入青霉素可得到放线菌 C培养自生固氮菌不需氮源 D发酵工
7、程一般用半固体培养基 解析：固体培养基需加入凝固剂，琼脂是常用的，但不是 唯一的；青霉素可抑制细菌和放线菌的生长；发酵工程一般用 液体培养基；自生固氮菌能够将空气中的氮还原成氨，故培养 基配制时不需加氮源。 答案：C,微生物培养的要点,),【例 3】下列操作与灭菌无关的是( A接种前用火焰灼烧接种环 B接种前用酒精擦拭双手 C接种在酒精灯火焰旁完成 D将平板倒置，放入培养箱中培养,【名师点拨】：无菌操作是微生物培养的必要前提，学生必 须树立“无菌概念”。前三项都是无菌操作的规范要求，第四 项将平板倒置(为了防止皿盖上的冷凝水落入培养基中，造成污 染)，放入培养箱中培养与灭菌无关。,【答案】：D,【配对练习 3】判断以下部位不含有微生物的是(,),D,A洗干净的脸上 B洗完澡后的皮肤 C刷完牙后的口腔 D灼烧之后的接种环,
