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1、第九部分 同工酶与气体酶学,第一节 同工酶的基础知识 第二节 同工酶的应用 第三节 固氮酶的作用 第四节 甲烷加氧酶的作用 第五节 氧化CO的酶,第一节 同工酶的基础知识,一概念:指同一种酶的多种分子形式。这些不 同的分子形式具有相同或相似的底物,催化 相同的反应,二分类,单基因决定的同工酶 多基因决定的同工酶 复等位基因基因决定的同工酶 修饰同工酶,三同工酶的结构基础,同工酶的一级结构的差异 构象变化造成同工酶的差异,四同工酶的常用分离和测定方法,(一) 方法 1 电泳 2 层析 3 热稳定性 4 动力学 5 免疫法,(二) 方法使用注意点,1严格控制可能影响实验的条件,重复实验。 2尽量消
2、除由环境造成的差异。 3增大实验的样本数量及样本随机性,使之具有代表性。 4实验条件标准化,减少人为操作造成的误差 5基本酶谱与分析方法的标准化。 6选择尽可能多的酶进行分析。,第一节结束,点击返回,第二节同工酶的应用,一 植物系统学研究中的应用 (一)原理:同工酶在不同的物种、同一物种的不同时期、同一时期的不同器官、同一器官的不同组织中都具有特异性,既是生理指标,又是可靠的遗传物质表达产物。,(二)应用领域,1 同工酶在栽培粮食作物(水稻、玉米、小麦、荞麦)起源和演化中的作用 2同工酶在中药材起源和演化中的作用 3同工酶在果树起源和演化中的作用 4同工酶技术在十字花科作物育种上的应,第二节结
3、束,点击返回,第三节固氮酶的作用,一固氮酶的研究历史,二固氮酶的研究热点,生物固氮研究正在分子和原子水平上开展,二固氮酶的研究热点,1固氮基因表达的氨阻遏和氧敏感机制 2共生结瘤固氮中植物与微生物相互关系的基因表达和调控 3根瘤菌结瘤因子的结构和生物合成 4根瘤菌及其宿主植物的基因组学转录组学和蛋白质组学 5固氮酶的结构和功能及其化学模拟,三固氮酶的酶学简介,1种类:一种是钼铁蛋白,另一种是铁蛋白 2催化的反应,钼蛋白和铁蛋白比较,3固氮酶的结构,4 固氮酶的应用,(1) 农业中:固氮肥料的研究,(2) 生物制氢技术中的应用,光合生物产氢 能够产氢的光合生物包括光合细菌和藻类。 光合细菌属于原
4、核生物,催化光合细菌产氢的酶主要是固氮酶。,第三节结束,点击返回,第四节甲烷加氧酶的作用,一概念 甲烷单加氧酶是甲烷利用细菌(methanotrophic bacteria)代谢过程中的重要酶系,在细菌细胞内直接利用分子氧作为底物催化甲烷氧化成甲醇。,二酶的性质,1甲烷利用细菌的分类和表现形态 可根据所利用碳源和能源不同将甲烷利用细菌分成: 专性甲烷利用细菌 兼性甲烷利用细菌 拟甲烷利用细菌,2酶的组成,组分A为245KD左右的羟基化酶; 组分B为15KD左右的调节蛋白; 组分C为分子量为40KD左右的还原酶,3活性中心,羟基化酶是一个由三种亚基组成的二聚体蛋白 什么是MMOB?,第四节结束,点击返回,第五节 氧化CO的酶,一羧基养细菌的CO脱氢酶 二硫酸盐还原细菌的CO脱氢酶 三光养厌氧菌的CO脱氢酶 四甲烷养细菌的甲烷单加氧酶,