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1、,环境条件对微生物的影响,环境条件对微生物的影响,目的要求 实验材料 试验程序 思考题,目的要求,了解物理因素，化学因素及生物因素抑制或杀死微生物的作用及其试验方法。,实验材料,菌种：枯草杆菌（Bacillus subtilis)斜面；灵杆菌（Bacterium prodigiosum)菌液；黑曲霉（Aspergillus niger)；细黄链霉素“5406”（Streptomyces microflavus(5406)。金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)斜面。 培养基：牛肉膏蛋白胨斜面培养基。 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（10ml）。 马铃薯蔗糖培养基（10mL） 淀粉
2、琼脂培养基（10mL）。 其它：无菌培养皿、无菌三角玻棒、无菌五角星黑纸、无菌水（5mL），0.6cm无菌圆形滤纸，镊子。 供试药剂：2.5碘酒，75酒精，0.1HgCl2 ,5%石炭酸。,实验程序,温度对微生物的影响 紫外线对微生物的影响 化学药剂对微生物的影响 抗生素对微生物的影响,实验程序 （温度对微生物的影响）,在微生物的生长范围内有最高、最适、最低生长温度，一旦超过最低和最高生长温度，微生物均不能生长，或处于休眠状态，甚至死亡。 每组取牛肉膏蛋白胨细菌斜面培养基6支，在无菌操作下，用枯草杆菌斜面菌种进行斜面接种。各取2支标记280C、600C、40C(冰箱）分别放入相应温度下培养，4
3、8h后观察记录并做实验报告。,实验程序 （紫外线对微生物的影响）,紫外线对微生物有明显的致死作用，波长260nm紫外线具有最高的杀菌效应。剂量高、时间长、距离短时就易杀死它们。 光复活现象：经紫外线照射后受损害的细胞，如立即暴露在可见光下，则有一部分仍可恢复正常活力。 实验方法：将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作制成平板1付，用无菌移液管吸取0.1mL灵杆菌菌液涂布于平板上（用无菌三角玻棒）。在无菌室中，将无菌五角星黑纸放置于平板，在距离紫外灯的30cm处照射20min，去黑纸加皿盖（如图）。于28300C温箱中倒置培养48h后记录结果。,实验程序 （紫外线对微生物的影响）,实验程序 (化学药
4、剂对微生物的影响）,一些化学药剂对微生物生长有抑制或杀死作用，因此在实验室中及生产上常利用某些化学药剂进行灭菌或消毒。 1. 每组取无菌培养皿两付，在皿底注明处理方法及菌种名称。 2.取枯草杆菌和金黄色葡萄球菌0.2mL放入相应的培养皿中. 将已熔化冷却至500C左右的细菌培养基分别倒入上述培养皿中，混匀后凝固成平板。 用镊子将分别滴有两滴0.1%HgCl2，2.5%碘酒，75%酒精，5%石炭酸的小圆形滤纸片，放于每一平板上，盖上皿盖，于28300C的温箱中培养48h后记录结果。 如果有抑制作用，则滤纸片四周出现无菌生长的抑菌圈，圈的大小可表示消毒剂抑菌的强弱（见图-2）。,实验程序 (化学药
5、剂对微生物的影响）,实验程序 (抗生素对微生物的影响）,抗生素的定义:某些微生物，特别是放线菌，在生命活动过程中产生了一些对其本身无害而能抑制或杀死另外一些微生物的特异性的代谢产物，这些特异性的代谢产物称为抗生素。产生抗生素的微生物称为抗生菌。 抗生素在极低浓度下即能抑制或杀死某些微生物。在抗生菌的筛选中，常以其对某些微生物产生的拮抗作用所形成的抑菌圈大小来衡量抗生菌作用的强弱和抗生素的有效浓度,实验程序 (抗生素对微生物的影响）,试验方法： 1. 将枯草杆菌斜面和黑曲霉斜面各用4mL无菌水，以无菌操作法制成菌悬液备用。 2. 取两付无菌平皿，皿底贴上标签，注明组别及处理，各自用无菌吸管取上述菌悬液各1mL，分别加入相应底培养皿内。 3. 取已融化并保持在500C左右的细菌和真菌培养基各1管，倒入相应的培养皿中，轻轻摇匀，制成含菌平板。 4. 用无菌打孔器在长有“5406”放线菌的培养皿中，无菌操作垂直钻取连有培养基的菌块。用灭菌镊子将“5406”菌块移至平板上，每个平板放四块。 5. 培养皿正放在28300C温箱中培养23d观察菌块周围的透明圈（抑菌圈）大小。并写实验报告。,思 考 题,高温和低温对微生物生长各有何影响？为什么？ 紫外线照射时，为什么要除掉皿盖？ 简述HgCl2、碘酒、酒精、石炭酸的抑菌机制。,实 验 二 十,结 束,
