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1、1.改变n和H 这两个参数首先与柱长L有关，L增大时，n就成比例地增加，但分析时间也增加。理想的方法是在不增加柱长的条件下减小H以达到增加u的目的。可采取的措施有采用接近uopt的载气流速，采用小内径的色谱柱，如果是填充柱就采用较小的填料粒度。2.改变k 改变k是提高分离度R的最容易的方法。图5-16所示为k与R以及分析时间的关系，可见，k在一定范围内增加可有效地提高分离度，但当k大于5时R的变化就很小了，反而使保留时间迅速增加。所以，GC分析中K值最好控制在2-5之间，一般要求不超过10，否则会大大延长分析时间。 改变k的最简单的方法是改变柱温，降低柱温可明显地提高k。此外，降低载气流速也是
2、提高k的常用方法。3.改变 可以看成是一个准热力学参数，在流动相和固定相一定时，它只与柱温有关。当两个组分的接近1时，改变H和k都难以在可接受的时间内实现完全分离。此时，应在保持k值为2-10之间的前提下，设法改变。下面是按由易到难顺序排列的几个改变的方法：改变柱温；改变固定相，即更换色谱柱；利用化学作用，如通过衍生化反应改变待测物的结构4.程序升温 毛细管GC可采用程序升温技术来优化分离。因为程序升温可使待测物在适当的温度下流出，以保证每个组分有合适的k值，同时改善分离度，因此是GC分离复杂混合物的有效方法。5.进样和检测条件的优化 除了采用适当的进样技术可以在一定程度上改善分离度以外，进样
3、和检测条件的优化主要与灵敏度有关。有关内容请参阅有关内容。 综上所述，GC的分离优化就是要在保证分分离度和灵敏度的前提下，实现快速分析。分离度、灵敏度和分析速度都是色谱工作者要追求的东西，但实际操作中，常常遇到鱼和熊掌的问题。如右面的三角形所示： 正所谓有得必有失，当我们设法提高分离度的时候，往往不得不牺牲一些分析速度，而采用更复杂的样品制备过程来提高灵敏度，就会以降低分析效率为代价。这就看我们首先注重什么。实际工作中往往是首先满足分离度的要求，然后提高分析灵敏度，最后再考虑尽可能地缩短分析时间。色谱分析中的分离度公式如下：式中 分离因子； N 色谱柱（或薄层板）的理论板数； k容量因子。，N
4、和k 三个参数是完全独立的，每个参数均可被优化，分别达到最佳值，以使Rs达到最大。在优化，N和k，使欲测的痕量组分与干扰组分得到充分分离的同时，还要考虑到要使欲测的痕量组分在洗脱过程中尽量少被稀释，以便检测器能够检测出来，也就是要使欲测的痕量组分具有最大的峰高。为此，在色谱过程中要尽量减小峰的展宽，因为同样面积的峰，如峰宽加大，则峰高降低，峰高降低到某一程度，检测器就无法检测了。在色谱痕量分析中，k值不能太大，多选在0.5-1.5，以减少欲测痕量组分被稀释，这样就能得到较窄的峰；要选用理论板数高的短柱（短板），这样可以最大限度地增大峰高，而不降低分离度。但是，选用小的k 值和短柱都不利于提高分离度(Rs)），因此增大分离因子是改进色谱痕量分析准确度的最有效的方法。欲测的痕量组分的峰与干扰组分的峰严重重叠，往往只能通过改变色谱系统的选择性来消除，而不能用增加k 值和加长柱子的方法来消除。为此，在气相色谱中可以通过降低柱温，改变固定相等方法来增大分离因子（）；在液相色谱中则可以通过改变洗脱液的组成，选择合适的固定相等方法来增大分离因子（!）。对难分离的物质（趋于1时）对选择性作用的微小增加就会显著地影响峰高。如值由1.01 提高到1.025时，就可以适当减短柱长，保持分离度Rs不变，而峰高可增加2-5倍（k值不变）。
