《T淋巴细胞亚群CD4、CD8、CD3 细胞检测临床应用技术讲座》由会员分享，可在线阅读，更多相关《T淋巴细胞亚群CD4、CD8、CD3 细胞检测临床应用技术讲座（73页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、上海汇中细胞生物科技有限公司 - 学术部,T 淋巴细胞亚群 CD4、CD8、CD3 细胞检测,2013年3月,临床应用技术讲座,免疫功能 量化指标,.,众所周知，体育锻炼能提高免疫功能，冬虫夏草能提高免疫功能，免疫球蛋白能提高免疫功能，蜂胶、螺旋藻亦能提高免疫功能然而 免疫功能是什么？免疫功能是否有效提高？提高到多少？缺少科学客观的量化指标！,科学关注,”食管癌患者存在着细胞免疫功能抑制，了解T淋巴细胞的免疫活性状态,对研究肿瘤的生物学行为具有重要意义。“癌症2005年 第24卷07期,“冬虫夏草制剂加化疗组化疗后，可以改善化疗所致的免疫功能低下。”齐齐哈尔医学院学报2006年12月 第27卷
2、17期,” 急性运动、有氧运动和长期适量运动与人体运动免疫调节产生非常重要联系，对 T淋巴细胞及其亚群的免疫功能有重要影响“中国临床康复2003年 第7卷18期,免疫功能，我们究竟了解多少？,.,以癌症为例：正常人每天都会产生100200个原癌细胞，体内免疫系统能及时发现并消灭它们。若人体免疫机能下降，便无法有效清除癌细胞，细胞大量增殖最终形成肿瘤。,免疫功能人体抵御外来病原体侵袭、进行自我保护的一种能力。,免疫功能，人体免疫防护伞,.,如肿瘤，80%以上肿瘤的发生，是因为人体免疫功能长期低下。肿瘤在免疫功能低下的情况下，易发生转移、复发,目前通常针对天平一端，如癌细胞进行各种检测，如：癌胚抗
3、原、甲胎蛋白等肿瘤标志物、或早期癌细胞PET-CT 检测； 对天平另一端：免疫功能，多以白细胞检测为主，缺少CD3/4/8细胞计数此类精细化检测项目。, 人体大部分的疾病与免疫功能低下有关！,免疫功能，精细化检测,免疫系统简介,免疫系统,免疫器官（胸腺、骨髓、淋巴结等）,T淋巴细胞 B淋巴细胞 NK细胞 巨噬细胞、粒细胞等,CD3 CD4 CD8,T淋巴细胞（电镜图）,免疫系统，是人体抵御病原体入侵最重要的保卫防护系统，由免疫器官、免疫细胞，以及免疫分子组成。,免疫分子（抗体、细胞因子等）,免疫细胞,T淋巴细胞细胞免疫 通过效应T细胞分泌穿孔素等，摧毁侵入到寄主细胞内的病毒、胞内寄生菌或外来的
4、组织团块、癌变的细胞等。,B淋巴细胞体液免疫 通过效应B细胞分泌抗体，与抗原发生特异性结合，清除的是游离在寄主细胞外的抗原及其产生的有毒物质。,免疫细胞,细胞免疫主力军 T淋巴细胞,CD4细胞，诱导/辅助性T细胞，人体免疫系统最重要枢纽细胞，又被称作“人体免疫系统的司令官”。,CD3细胞，成熟T淋巴细胞，表示人体总T细胞水平，反映免疫功能状况。,CD4/CD8比值，临床诊断敏感指标，CD4与CD8相互制约共同作用，比值异常，可迅速判断人体免疫功能发生紊乱。,CD8细胞，抑制/细胞毒性T淋巴细胞，能直接识别并杀伤致病细胞，与CD4协作抵御外侵。,目前已发现CD系列细胞有近百种，在人体细胞免疫中起
5、重要作用 （并具有临床意义）的主要是CD3、CD4、CD8等细胞。,正常参考值： CD3：770-2860/ul CD4：414-1440/ul CD8：238-1250/ul CD4/CD8：0.7-2.87,.,汤钊猷中国工程院院士，全国重点学科肿瘤学学科带头人，著名肝癌专家，复旦大学肝癌研究所所长,“对待癌症，除针对性治疗外，一定要努力改造自己，让自己提升免疫功能，才能在抗癌战争中占有利地位和优势。”,2011年 诺贝尔生理学或医学奖授予美、法、加三位科学家在免疫系统方面的研究。,“免疫学是距离临床最近的学科，它涉及整个人体、每个细胞，在人类破解生命与疾病之谜道路上，发挥不可估量的作用。
6、”,免疫，不可或缺的诊断,.,免疫，不可或缺的诊断,曹雪涛 中国工程院院士、中国医学科学院副院长 兼医学免疫学国家重点实验室主任,免疫学的研究成果已经渗透到临床的几乎每一个角落，应用免疫学技术和方法研究疾病发病机制以寻找可以应用于诊断、治疗和预防疾病的新方法、新试剂、新药物越来越得到重视。,技术背景&项目起源,比尔梅琳达盖茨基金会成立CD4专项基金，全球征募具有简单、廉价、快速、有效特性的CD4细胞检测新方法。,仪器投资大 配套试剂贵 工作条件苛刻 操作人员要求高 ,制约,瓶颈和焦点 ： CD4细胞检测,传统CD检测方法 ： 流式细胞法，被美国垄断。,技术背景,9月相关论文发表于 Americ
7、an Biotechnology Laboratory 期刊,梦起圣地亚哥,2002年8月回国，开始该项目的研发,180多日的失败、 实验条件的限制、 实验理论饱受质疑、 资金短缺 重重问题让研发举步维艰 !,艾滋成为坚持的动力 不仅仅是为一个期待的眼神，更是为一个生命的延续。,艾滋成为动力,特异性抗体事先包被在芯片基板上，样本中表达有该特异性抗原细胞与芯片接触反应后，特异性细胞便被分离固定，再通过自动计数仪对固定细胞分析。,CD3/4/8细胞检测玻片,技术原理,室温操作保存 无需冷藏,长期保存，可随时随地复查,操作时间短 易掌握,低成本,静脉、末梢血 均可,仪器自动读数 可视化分析,优势特点
8、,2006年，“Measuring Cellular Metabolism of Immobilized Cells” 正式获得美国专利局批准（PATENT No. US 7141369 ） Solo Inventor : Cao Bo,以下三个美国专利，对该平台技术构成了一个完整知识产权保护体系。 专利一：“Measuring Cellular Metabolism of Immobilized Cells” 专利二：“Measurement of the cell activity and cell quantity” 专利三：“Methods and kits for detecting
9、 a target cell”,2010年，“Methods and kits for detecting a target cell” 正式获得美国专利局批准（PATENT No. US 7855068 ） Solo Inventor : Cao Bo,美国专利,北京协和医院、北京佑安医院、武汉大学附属人民医院,1300余例临床验证结论 ：SemiBio 细胞免疫芯片与流式细胞仪相关性为0.95以上 。,上海中山医院、上海市公共卫生中心、上海市第六人民医院,临床验证机构,临床验证,医疗器械生产企业许可证,医疗器械注册证,QMS考核报告,新药证书,上海医学科技奖,美国专利,2010中国国际工业
10、博览会 创新奖,资质认证,政府支持,2004年 上海市科委生物技术基础课题研究项目 2005年 上海市科委重大专项科技攻关项目 2006年 国家科技部创新基金 2007年 中小企业科技部创新资金 2008年 获上海医学科技奖 2009年 上海生物医药产业转化项目 2009年 上海高新技术成果转化项目 2010年 上海市科委“科技创新行动计划”生物医药领域重大专项 2010年 获中国国际工业博览会 ”创新奖“ 2011年 通过WHO世界卫生组织 - 南非国家实验室（NHLS）泛非认证 2012年 第19届美国华盛顿“世界艾滋病大会”参展并发表大会论文,该技术被作为新技术收录于WHO2007版La
11、boratory Guidelines for enumerating CD4 T Lymphocytes in the context of HIV/AIDS中，成为对艾滋病提供有效的诊断和治疗手段的技术参考。,对美国CDC实验室、南非卫生厅等相关技术人员 进行该检测方法的培训。,2011年4月，顺利完成南非国家实验室（NHLS） 泛非认证,国际应用, A biochip for specific cell separations. American Biotechnology Laboratory,September 2002,28 A biochip for CD4 cell count
12、. The 2nd International AIDS Society Conference,July 2003,Paris HIV testing technologies after two decades of evolution.Indian J Med Res 121, April 2005 Laboratory Guildelines for enumerating CD4 T Lymphocytes in the context of HIV/AIDS.WHO Jun,2007 一种CD4细胞计数方法.第二届亚洲检验技师学术大会,2005 细胞芯片法测定健康体检人群全血中CD4
13、细胞的临床应用价值.实用医学杂志, 2007,23(20) 加味玉屏风汤对提高慢性病患者CD4指标临床观察.上海中医药杂志,2007,41（10） 玉屏活血汤提高老年气虚证患者CD4+T细胞临床研究.江西中医药,2011,8(41) 老年冠心病患者免疫反应的研究.检验医学,2011,26（12） ,发表论文,CD3/4/8玻片检测与流式比较,SemiBio Assay 细胞免疫芯片,FCM 流式细胞法,目前，细胞免疫相关检测在临床科室少有开展，滞后于日趋上升的临床需求。,革命性突破,临床应用,临床应用,通过 CD3、CD4、CD8 T细胞检测,掌握疾病发病机制中，免疫参与程度，制定“免疫治疗”
14、方案,在肿瘤、感染性疾病、心肺疾病、自身免疫性疾病、各种原因导致的免疫功能低下等疾病中广泛应用。,掌握疾病治疗过程中，免疫动态变化，评估治疗风险、用药药效、及机体恢复程度,掌握亚健康人群，免疫水平及变化，筛查肿瘤等重大疾病隐患,临床应用,临床应用,肿瘤科,应用：肿瘤科,恶性肿瘤的发生、发展、转移与人体免疫功能下降密切相关。 人体的抗肿瘤免疫以细胞免疫为主，体内发挥抗肿瘤免疫作用主要由CD4和CD8细胞完成。,CD4细胞能促进效应细胞抗肿瘤作用； CD8细胞则主要起相反免疫抑制作用； 机体处于肿瘤状态，体内组织胺水平升高，激活CD8（抑制性T淋巴细胞）分泌抑制因子，抑制CD4（辅助性T细胞）和B
15、细胞增殖与分化，从而抑制机体免疫功能。,1、肿瘤患者处免疫抑制状态，T淋巴细胞降低。,2、肿瘤患者T淋巴细胞与病程相关，随病程逐渐降低。,CD3、CD4、CD4/CD8细胞数下降程度： 期 期 期 期,应用：肿瘤科,摘自：肿瘤学杂志2004年第10卷第3期,【临床案例】 42例肺癌患者，转移患者CD3、CD4及CD4/CD8比值均显著低于未转移患者及正常组。,3、肿瘤患者T淋巴细胞持续低下，转移率高、易复发。,在化疗或放疗或手术前，及时给予免疫增强同步治疗，有助于提高疗效。,组合治疗： 化疗中，同步给予免疫增强剂（如干扰素、左旋咪唑等）后，CD8下降，CD4、CD4/CD8升高，机体自身抗肿瘤
16、免疫效得到有力发挥，患者恢复良好。,4、肿瘤患者的化疗、放疗、手术治疗会导致免疫抑制。 杀伤或切除肿瘤细胞同时具有非选择性杀伤作用，会损害机体细胞免疫功能。,应用：肿瘤科,应用：肿瘤科,T 细胞 CD4、CD8、CD3 检测介入时间,1、入院基础检测（了解患者免疫功能初始状态） 2、放疗、化疗、手术前检测（评估治疗前免疫状态，预测疗效及风险） 3、放疗、化疗、手术后检测（评估治疗后免疫改善状况） 4、出院前检测（预后判断） 5、易转移、复发，每月跟踪检测（判断是否发生转移、复发）,全国现有三级医院约1300家，二级医院约6500家，其中80%以上无流式细胞仪。同时由于流式成本昂贵、操作繁琐，CD3/4/8数量及比值检测，虽然对于肿瘤治疗意义重要，但临床基本未开展。,世界新发肿瘤病人20%在中国,卫生部统计资料表明：中国年均肿瘤新发病例超220万，死亡病例超160万。其中2008年，中国肿瘤新发病例为280万，死亡病例为196万。同时，中国肿瘤治疗市场年增长率超30%。,应用：肿
