《医学免疫学实验课件知识讲解》由会员分享,可在线阅读,更多相关《医学免疫学实验课件知识讲解(11页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、医学免疫学实验,第3次 免疫标记技术细胞免疫体外检测,录像(免疫标记技术) ELISA(操作,间接法检测抗-HBs) E-花环试验、淋巴细胞转化试验、大、小吞噬细胞(示教),Immunofluorescence, IF,酶联免疫吸附试验Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISA),用酶标记抗原(或抗体)检测抗体(或抗原)。 检测敏感度:ng/ml 固相载体: 聚苯乙烯微量反应板 标记酶 辣根过氧化物酶(HRP) 碱性磷酸酶(AP) 酶标仪读OD值,间接ELISA法检测血清抗-HBs,步骤 加血清及对照 第1孔,阴性对照,加阴性对照血清1滴 第2孔,阳性对
2、照,加阳性对照血清1滴 第3孔,待检血清,加待检血清50l 第4孔,空白对照 加酶结合物 每孔加入酶结合物1滴(空白孔不加),混匀,封板,37C 30min 洗板 弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置5 sec,甩干,重复3次。 显色 每孔加显色液A、B各1滴,混匀,封板,37 C 15min 观察结果,免疫细胞功能检测,E花环形成试验 淋巴细胞转化试验 大、小吞噬细胞,T cell,CD2(SRBC receptor),E花环形成试验,淋巴细胞转化试验,T细胞,PHA,淋巴母细胞 (体积增大,形态不整齐,核大,松散,有核仁,胞浆变宽,出现空泡),计算淋巴细胞转化率 正常:6080,大、小吞噬细胞 大吞噬细胞巨噬细胞 小吞噬细胞中性粒细胞,