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1、脂代谢及脂代谢紊乱检验,第一节 概述,血脂：,TG PL FC CE FFA,TC,血浆脂蛋白：,血脂 + 载脂蛋白,CM、VLDL、LDL、HDL,CM、Lp、前Lp、Lp,ApoA ApoB ApoC ApoD ApoE,分 类,载体 、运输 联系 、配体 激活,功能,合成部位,肝 小肠,受 体,LDL受体 残粒受体 清道夫受体,乳 糜 微 粒,CM,TG（外源）,ApoB48,转运外源性 TG,功能：转运TG 合成部位：小肠,VLDL,LDL,ApoB100,功能：转运TG、TC 识别LDL受体 合成部位：肝、小肠,TG （内源性）,TC,HDL,高密度脂蛋白,TC ApoA,逆向转运
2、胆固醇到肝,功能：HDL的主 要结构蛋白LCAT的激活剂 合成部位：肝、小肠,脂蛋白受体,糖蛋白 调节细胞外脂蛋白的水平,LDL受体 残粒受体 清道夫受体,运送 及 清除,LDL受体：识别ApoB100（ApoE ）对维持细胞和全身胆固醇平衡起重要作用,识别ApoE，清除血液循环中CM残粒和-VLDL残粒,巨噬细胞表面,介导修饰LDL从血液循环中清除,HDL代谢：胆固醇逆转运(RCT),VLDL-IDL-LDL代谢：由肝合成 VLDL, 释放入血后转变为IDL和LDL, 并被肝或其它器官代谢的过程,CM代谢：饮食摄入的胆固醇和TG 在小肠中合成CM及其代谢过程,外源性代谢,内源性代谢,LP代谢
3、,高脂血症: TC 或/和 TG,高脂蛋白血症 : CM、VLDL、LDL、HDL,高 脂 血 症 的 分 类,临 床 表 型,是 否 继 发 其 他,基 因 分 型 法,Fredrickson,血清(血浆)外观：在4冰箱放置16-24h 后的血清外观(2) 血脂浓度：血清TG、TC含量(3) 各种血浆脂蛋白升高程度,依据,型高脂蛋白血症 a型高脂蛋白血症 b型高脂蛋白血症 型高脂蛋白血症 型高脂蛋白血症 型高脂蛋白血症, 4静置过夜， 表面奶油状，下层澄清 血清TG， 血清TC正常或轻度 血清脂蛋白电泳，CM,型高脂蛋白血症,家族性高乳糜微粒血症 脂蛋白酶缺乏症,生 化 特 征,基因突变 L
4、PL CM,a高脂蛋白血症,高-脂蛋白血症 高胆固醇血症,生 化 特 征,4冷置试验 血浆外观澄清 血清TC 尤其LDL TG正常 血清脂蛋白电泳 -LP,LDLR缺乏或异常,b型高脂蛋白血症,生 化 特 征,4冷置试验 血清外观澄清或微混 血清TC，TG VLDL和LDL均 血清脂蛋白电泳 -LP，pre-LP,多基因突变 LPL LCAT,型高脂蛋白血症,宽-脂蛋白血症,4冷置试验，血清外观混浊 可见一模糊奶油样薄膜。 血清TC ，TG 。 血清脂蛋白电泳， -LP，pre-LP 融合形成宽区带。,生 化 特 征,ApoE异常 VLDL转化和清除缺陷,型高脂蛋白血症,4冷置试验，血清外观可
5、以是 澄清也可呈混浊。 血清TG ，TC正常或稍， VLDL 血清脂蛋白电泳，pre-LP,内源性高三脂酰甘油血症,生 化 特 征,临床表现，多见于中青年，较常见,型高脂蛋白血症,混合性高三酰甘油血症,4冷置试验，血清上层为奶油状， 下层混浊。 血浆中TG ，TC ，VLDL 。 血清脂蛋白电泳，CM ，pre-LP。,内源性和外源性TG清除功能缺陷,生 化 特 征,动脉粥样硬化(AS)是指动脉内膜因脂质、血液成分的沉积、平滑肌细胞及胶原纤维增生，并伴有不同程度坏死及钙化等一类慢性进行性的病理改变。,最终导致血管壁呈增厚、狭窄，使某些脏器 (尤其是心、脑)供血不足而损伤，甚至危及生命。,AS主
6、要的危险因素,高脂血症 （高脂蛋白血症） 高血压 吸烟,性别 遗传因素 内分泌因素,引起动脉粥样硬化的脂蛋白,CM 颗粒大，一般不致AS, 但易诱发胰腺炎,LDL 相对较小, 是首要的致AS性脂蛋白,VLDL 升高已被确认为CHD的危险因子。,IDL 具有致AS作用,LP（a) As的独立危险因子。,动脉粥样硬化,第二节 血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定,常规测定项目：,TC、TG、 HDL-C、LDL-C,分析前的准备：,受试者的准备 标本采集 合格的试剂 校准物的选用 检测方法选择,是否空腹 采血体位 血液浓缩 抗凝剂 标本处理 存储条件,一、血清（浆）静置试验,空腹血清,清 澈,混 浊 TG,
7、均匀混浊,奶油层,TC正常,TC增高,下层混浊,下层清澈,一、血清（浆）静置试验,二、血清（浆）总胆固醇测定, COD-PAP法,胆固醇酯 + H2O 胆固醇 游离脂肪酸 胆固醇 O2 4-胆甾烯酮H2O2 2H2O24-AAP酚 醌亚胺（红色化合物）4H2O,方法学评价,简便,快速,无腐蚀性,高，好，宽,Ch水解不全，CHE活性受影响，易受干扰,常规方法,三、血清（浆）三酰甘油测定,检测方法,同位素稀释-质谱法,化学法,酶法（GPO-PAP）,磷酸甘油氧化酶法 乳酸脱氢酶法 甘油氧化酶法,化 学 法,1.抽提 2.皂化 3.氧化 4.显色,变色酸显色法,乙酰丙酮显色法,1、磷酸甘油氧化酶法
8、GPO-PAP,三酰甘油 + H2O 甘油 3-脂肪酸 甘油 ATP 3-磷酸甘油ADP 3-磷酸甘油O2+2H2O 磷酸二羟丙酮+2H2O2 H2O24-AAP4-氯酚 苯醌亚胺2H2O+HCL,第一步反应,第二步反应,本法酶试剂比较稳定，灵敏度高，线性范围较宽两步法为检验分会推荐方法,2乳酸脱氢酶法,【原理】,三酰甘油 + H2O 甘油 3-脂肪酸 甘油 ATP 3-磷酸甘油ADP ADP磷酸烯醇式丙酮酸 丙酮酸+ATP 丙酮酸+NADH NAD+乳酸,3甘油氧化酶法,第一步： FG + O2 甘油醛+ H2O2 H2O2 + EMAE 无色物质 消除游离甘油的影响，3-5min后进行第二
9、步反应： TG + 3H2O 甘油 + 3RCOOH 甘油 + O2 甘油醛+ H2O2 H2O2 +4-AAP+ EMAE 有色物质 EMAE作用与酚相似，是还原剂，但灵敏度比酚高。,甘油氧化酶,POD,POD,LPL,甘油氧化酶,血清甘油三酯一般随年龄增加而升高， 体重超过标准者往往偏高。 合适范围：1.70mmol/L(150mg/dl)， 升高：1.70mmol/L (150mg/dl)。,升高：（1）原发性高TG血症，包括家族性高TG血症与家族性高脂 （蛋白）血症等。（2）继发性高TG见于糖尿病 糖原贮积症、甲状腺功能减退、肾病综合征、妊娠、口服避孕药等 降低:甲亢、肾上腺皮质功能减
10、退和肝功能严重损伤。,【参考区间】,【临床意义】,四、血清（浆）脂蛋白测定,高密度脂蛋白胆固醇测定,参考方法:,超速离心分离HDL，然后用化学法（ALKB法）或酶法测定其 胆固醇含量，此法需特殊设备，而且不易常握。,沉淀剂：肝素-锰、硫酸葡聚糖-镁、聚乙二醇、磷钨酸-镁,常规方法:,HDL直接测定法,抗体包裹法、酶修饰法、选择性抑制法,HDL-C合适范围：1.04mmol/L (40mg/dl), 0.91mmol/L (35mg/dl)为减低。,流行病学与临床研究证明，HDL-C与冠心病发病呈负相关， HDL-C低于0.9 mmol/L 是冠心病危险因素。HDL-C大于1.55mmol/L
11、被认为是冠心病的“负”危险因素。 HDL-C下降还多见于脑血管病、 糖尿病、肝炎、肝硬化病人。高TG血症往往伴以低HDL-C，肥胖者 的HDL-C也多偏低。吸烟可使HDL-C下降，适量饮酒、长期体力劳 动和运动会使HDL-C升高。,【参考值】,【临床意义】,低密度脂蛋白测定,1Friedewald公式法 LDL-CTCHDL-CTG/2.2（以mmol/L为单位时） （血清中存在CM、TG4.56时不适用）,2聚乙烯硫酸盐沉淀法 本法并非对LDL-C作直接测定，而是用聚乙烯硫酸（PVS）选择性沉淀血清中LDL，再以血清TC减去上清液（含HDL与VLDL）胆固醇即得LDL-C值。,3直接测定法:
12、,目前各类方法测定的LDL-C值都包括 IDL和LP(a)的chol在内,3.12mmol/L, 升高：3.64mmol/L,【参考值】,【临床意义】,LDL-C增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素。由于TC水平同时也受HDL-C水平的影响，所以最好以LDL-C代替TC作为冠心病危险因素指标。,脂蛋白()测定,Lp()测定有两类方法,一是以免疫化学原理测定其所含Apo()，结果以 Lp()质量表示，也有以Lp()颗粒数mmol/L表示的。 另一类方法测定其所含的胆固醇，结果以 Lp()-C表示。目前大都用免疫学方法测定。,正常人群的Lp(a)水平呈明显的正偏态分布， 大多在200mg/
13、L以下，平均数在120180 mg/L， 中位数约100mg/L。Lp(a)水平高于医学决 定水平（300mg/L），冠心病危险性明显增高。,【参考值】,【临床意义】,血清Lp(a)水平是动脉粥样硬化性疾病的独立危险因素, 与动脉粥样硬化成正相关。,（1）Apo测定的临床意义作为s和心脑血管病的有价值的危险 予估指标。目前主要检测项目是 ApoA、ApoB100、Apo（a） （2）载脂蛋白异常症的发现和诊断 如：ApoA缺乏症（angier症） ApoC缺乏症,血清载脂蛋白测定,免疫化学法：,单向免疫扩散（RID） 电免疫分析（如火箭电泳法） 放射免疫分析（RIA） 酶联免疫吸附分析（ELI
14、SA）等,早期,目前：目前比较适合于临床实验室的是免疫浊度法，包括免疫散射比浊法（INA）和免疫透射比浊法（ITA）。,【参考值】,Apo AI：1.001.50g/L； Apo B：0.801.00g/L。,【临床意义】,ApoAI是HDL的主要结构蛋白， ApoB是LDL的主要结构蛋白，因此，ApoAI和ApoB可直接反映HDL和LDL的含量。在某些病理情况下，ApoAI与HDL和ApoB与LDL并非成正相关，因此，同时测定载脂蛋白及脂蛋白HDL和LDL对病理发生状态的分析很有帮助。冠心病、肾病综合征和糖尿病等都有ApoAI下降和ApoB升高。临床上常将ApoAI和ApoB比值作为冠心病的危险指标。,2020/7/8,52,.,
