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1、检测生物组织中的 糖类、脂肪和蛋白质,一、实验原理,某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如：,.还原糖的鉴定： 还原糖+ .脂肪的鉴定： 脂肪+ 脂肪+ .蛋白质的鉴定： 蛋白质+ 淀粉 +,斐林试剂,砖红色沉淀,苏丹,橘黄色,苏丹,红色,双缩脲试剂,紫色,碘液,蓝色,水浴加热,(一)还原糖的检测和观察 书P18,1、常用材料： 2、试剂：,苹果和梨 (含糖量较高，白色或接近白色的植物组织),斐林试剂 甲液：0.1g/mL的NaOH 乙液：0.05g/mL的CuSO4,斐林试剂与可溶性还原糖反应本质： 在水浴加热条件下，Cu（OH）2被还原糖的醛基还原成Cu2O 3
2、、方法步骤：读书P18,选材,含 量高，颜色为 的植物组织，例如苹果和梨。,糖,白色或接近白色,制浆 过滤 取液,注入2mL苹果组织样液,注入1mL刚配制好的斐林试剂,水浴加热约2min,产生砖红色沉淀,50-650C的温水,甲乙液等量混匀,振荡、混合摇匀呈现蓝色,一层纱布过滤,5.注意事项：,还原糖有 。 试剂： . （甲液：0.1g/ml 的 , 乙液：0.05g/ml .）甲乙液必须 后再加入样液中， 。 必须 。,葡萄糖 果糖 麦芽糖 乳糖 半乳糖,用水浴加热,斐林试剂,NaOH,CuSO4,等量混合均匀,现配现用,颜色变化：,浅蓝色棕色砖红色沉淀,还原糖鉴定不能用的材料 不能用番茄、
3、胡萝卜-颜色是红色或深色 不能用甘蔗、甜菜-非还原糖,2、脂肪的检测和观察：,圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。,方法一：待测组织样液+苏丹染液橘黄色,取材：,花生种子(浸泡34h），将子叶削成薄片,方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察 子叶细胞的着色情况。,取最理想的薄片 在薄片上滴苏丹染液（23min） 去浮色（用50酒精） 制成临时装片,低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒， 然后用高倍镜观察,注意事项： 切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。 酒精的作用是： 。 唯一需要显微镜观察 使用不同的染色剂染色时间不同。 颜色变化：,脂肪,橘黄色,红色,洗去浮色,(三)蛋
4、白质的鉴定 书P19,1、常用材料: 2、试剂： 3、颜色变化:,鸡蛋清、黄豆组织液、牛奶,蛋白质,紫色,双缩脲试剂,1、常用材料: 2、试剂： 4、方法步骤：读书P19,蛋白质的肽键在碱性溶液中与Cu2+作用形成紫色络合物。,3、蛋白质的检测和观察： 选材 应该选择含 丰富的豆浆或鸡 蛋清溶液。（避免材料自身的颜色对 实验变化颜色的掩盖）,蛋白质,黄豆浆滤液或蛋清稀释液,制备组织样液,呈色反应,组织样液2mL,双缩脲试剂A液1mL,双缩脲试剂B液4滴,摇匀后变成紫色,说明组织样液中存在蛋白质。,（3）注意事项： 试剂： 。 （A液：0.1g/ml的 ； B液：0.01g/ml的 ） 先加 ，
5、再加 。 B液要求量适中，否则多余 的B液将会与A液发生反应生 成Cu（OH）2显色而遮盖原有的颜色。,双缩脲试剂,A液1ml,B液4滴,NaOH,CuSO4,蛋白质的检测结果,用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免 实验后粘住试管壁，不易洗刷,斐林试剂与双缩脲试剂的比较：,A液:0.1g/mLNaOH B液:0.01g/mLCuSO4,甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4,紫色物质生成,砖红色沉淀,先加A液，再加B液，不需加热,甲液与乙液先混再用，且现配现用，需加热,蛋白质,还原性糖,4、淀粉的检测和观察： 取材：,马铃薯匀浆,检测,组织样液2mL,碘液2滴,说明组织样
6、液中存在淀粉。,注意： 常用材料：马铃薯 试剂： 。颜色变化： 。,碘液,变蓝,摇匀后变成蓝色,1.在淀粉酶溶液中加入双缩脲试剂，其结果应该是 （） A.产生气泡B.溶液呈蓝色 C.溶液呈紫色D.产生砖红色沉淀,C,2.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用,【典例4】.(2013江苏高考)在1、3、5号试管中分别加入2 mL蒸馏水,2、4、6号试管中分别加入2 mL发芽的小麦种子匀浆样液,然后在14号试管中滴加适量斐林试剂,5、6号试管中合理滴加双缩脲试剂,摇匀。预期观察到的实验现象是(),A.1、3、5、6号试管内都呈蓝色 B.3组实验中甲组和乙组的实验结果相同 C.4号试管内呈砖红色,其余试管内都呈蓝色 D.4号试管内呈砖红色,6号试管内呈紫色,D,
