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1、第二章 克隆技术 第三节 动物的克隆1将小鼠细胞和人体细胞融合成杂交细胞后，各自的表面蛋白质平均分配到膜表面(如下图)，该实验说明了细胞膜 ()A由蛋白质分子和磷脂分子组成B具有一定的流动性C具有选择透过性D具有保护细胞内部的作用2在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是()A使动物组织分散为单个细胞进行培养B去掉细胞壁成为原生质体C去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合 D促进蛋白质水解为多肽3下图是克隆羊“多莉”的培育过程模式图，则获得克隆羊“多莉”的生殖方式和图中的“多莉”羊发育成熟时所分泌的性激素依次是()A无性生殖、雄性激素 B无性生殖、雌性激素C有性生殖、雄性激素 D有性生殖、雌性
2、激素4进行动物细胞培养时，最好选用的培养材料是()A衰老退化的动物组织细胞B成熟动物个体的体细胞C动物的受精卵细胞D健康动物、胚胎或幼龄动物个体的体细胞5如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能来源于()A乳腺细胞 B卵细胞C胃腺细胞 D囊胚时期的胚胎细胞6单克隆抗体是指()A单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体B单个B淋巴细胞增殖产生的抗体C单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体D单个抗体通过克隆化，产生大量抗体7用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()A都需用CO2培养箱B都须用液体培养基C都要在无菌条件下进行D都可体现细胞的全能性8科学家用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，
3、得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，所用的B淋巴细胞是来自 ()A骨髓的B淋巴细胞B脾脏的能产生抗体的B淋巴细胞C胸腺的B淋巴细胞D脾脏经过筛选的，能产生单一抗体的B淋巴细胞9右图为某同学根据杂交瘤细胞技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。根据图回答：(1)该方案能否达到预期的效果？_，其原因是_。(2)图为_过程，常用_作为诱导剂。该细胞继承了_，因此不仅能分泌_，还有_本领。(3)在制备破伤风杆菌抗体的过程中，进行了两次筛选，其目的不同，第一次筛选是获得_，第二次筛选是获得_。(4)破伤风杆菌的抗体最终可从_和_中提取。(5)该方案的目的是_。10生物学家研究发现，癌细胞
4、的无限增殖受某调控基因的控制，该调控基因能激发所有动物细胞大量增殖，为探究该调控基因是存在于细胞质还是细胞核上，科研人员做了如下实验设计：根据以上思路，请继续完成下列实验设计方案：A实验方案：(方法提示：癌细胞能传代培养，细胞形态发生明显改变。如何观察细胞形态不做实验设计要求)用胰蛋白酶分别处理宫颈癌细胞和小鼠肝脏使之分散成单个细胞。分别使单个癌细胞和单个肝脏细胞核质分离。_。取2只培养瓶编号甲、乙，各加入等量的培养液。_。_。B预期实验结果和结论_。_。_。11人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产
5、和抗体制备的流程之一如下图：请回答：(1)过程代表的是_。(2)过程构建A基因表达载体时，必须使用_和_两种工具酶。(3)过程采用的实验技术是_，获得的X是_。(4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行_比较；或用图中的_进行特异性结合检测。1B解析：细胞膜上的蛋白质等是运动的，使细胞膜具有一定的流动性。2A解析：在动物细胞培养前，先用胰蛋白酶使细胞相互分散开，以增加与培养液的接触面积，便于培养。3B解析：“多莉”是利用体细胞核移植技术培育而来的，其培育过程中无减数分裂产生配子，再经配子融合成
6、合子，合子发育成个体的过程，所以是无性生殖。4D解析：细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。5B解析：将动物的一个体细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。卵细胞是减数分裂形成的，细胞核染色体数减半。6C解析：单克隆抗体是利用B淋巴细胞能产生抗体和髓瘤细胞能无限增殖的能力特点，制备出抗体。骨髓瘤细胞自身不能产生抗体
7、，故A项错误。而一个细胞产生的抗体是非常有限的，不能应用于生产和实践，所以单个B淋巴细胞也不能产生大量的抗体，B项错误。抗体本身很难克隆。而单个杂交瘤细胞通过无性繁殖能产生大量的相同的杂交瘤细胞，产生的抗体专一、特异性强。7C解析：用动、植物成体的体细胞进行离体培养都必须在无菌条件下进行。用植物成体的体细胞进行离体培养获得新个体体现的是细胞的全能性，而动物体细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物。8D解析：单克隆抗体制备中使用的B淋巴细胞应该是能产生抗体的。只有经过脾脏的被抗原刺激过的B细胞才能产生抗体。9答案：(1)不能没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的效应B细胞(2)细胞融合和筛
8、选灭活的病毒双亲细胞的遗传物质特异性抗体大量繁殖(3)杂交瘤细胞产生特定抗体的杂交瘤细胞(4)细胞培养液小鼠腹腔(5)制备单克隆抗体解析：B淋巴细胞具有以下特点：在体外不能无限繁；只有受到抗原刺激后，才能形成效应B细胞，产生相应抗体；与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞后既可无限增殖，又能产生大量所需抗体。所以单克隆抗体制备过程首先需要注射与生产单克隆抗体发生特异性免疫反应的抗原，否则鼠体内不会发生特异性免疫反应，产生合成所需抗体的效应B细胞。获得效应B细胞后，因为效应B细胞不能大量增殖，虽能产生抗体，但数量有限，因此，需要与骨髓瘤细胞融合，融合必须在诱导剂的诱导下才能发生，常用的是灭活的病毒。两细胞
9、融合是自由的，有三种类型：B淋巴细胞B淋巴细胞，骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞，B淋巴细胞骨髓瘤细胞，我们需要的是杂种细胞，它结合了双亲的遗传物质，具备大量增殖和产生抗体的能力，所以需要培养筛选。然后通过扩大培养后就可转移到体外培养液中或小鼠腹腔中生产大量的单克隆抗体了。10答案：A.取癌细胞核和肝细胞质形成重组细胞甲，取癌细胞质和肝细胞核形成重组细胞乙分别取等量重组细胞甲和乙，依次加入甲、乙两只培养瓶中，进行细胞培养分别观察甲、乙培养瓶中的细胞形态B若甲瓶中的细胞(或重组甲细胞分裂产生的细胞)形态发生明显变化，则调控基因存在于细胞核中若乙瓶中的细胞(或重组乙细胞分裂产生的细胞)形态发生明显变化，则调控
10、基因存在于细胞质中若甲、乙两瓶中的细胞(或重组甲、乙细胞分裂产生的细胞)形态均发生明显变化，则调控基因可能同时存在于细胞核和细胞质中解析：涉及基因工程、细胞工程及实验设计等方面的综合，也考查了细胞核与细胞质间的关系。癌细胞能够无限增殖，是受调控基因控制的，但调控基因是位于细胞核内还是细胞质内的DNA分子上，可以设计对比实验，以及题干中的实验提示(癌细胞能传代培养，细胞形态发生改变)，通过观察重组细胞的形态变化来确定调控基因的位置。这是一个探究性实验，对实验结果要进行预测。11答案：(1)逆(反)转录(2)限制性核酸内切酶(限制性内切酶、限制酶)DNA连接酶(注：两空顺序可颠倒)(3)细胞融合杂交瘤细胞(4)A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的单克隆抗体解析：(1)过程是由RNA得到DNA的过程，是逆转录过程。(2)基因表达载体的构建必须使用同一种限制性内切酶对载体和目的基因进行切割，得到相同的末端，用DNA连接酶进行连接酶得到基因表达载体。(3)过程为动物细胞融合过程，可获得杂交瘤细胞。(4)A蛋白是病毒的主要抗原，基因工程得到A蛋白可制备疫苗。对疑似患者体内分离的病毒，可比较核酸序列或抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测；对该病毒进行确定。6
