高考圈题(新课标I卷)高考生物总复习题组训练15微生物的培养与利用

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1、题组15 微生物的培养与利用 (一)考法解法【命题特点分析】本部分属于每年高考常考内容,近年来多以非选择题(选做题)的形式呈现,难度系数在0.5-0.6之间;考查重点为微生物的分离纯化和培养。试题多以进行实验设计或者其他考查,考查的内容多种多样。既注重对主干知识的考查,又重点考查“双基”和实验能力。【解题方法荟萃】解决该部分试题,需要从以下几个方面着手考虑:1微生物的营养营养要素 来源 功能 碳源无机碳源 CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物 构成细胞和合成一些代谢产物有些既是碳源又是异养微生物的能源 有机碳源 糖、脂肪、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等 氮 源 无机氮源 NH3、铵盐

2、、硝酸盐、N2等 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 有机氮源 牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸 生长因子(特 殊营养物质) 维生素、氨基酸、碱基 酶和核酸的组成成分 参与代谢过程中的酶促反应 水和无机机盐 外界摄入 水不仅是优良溶剂而且可维持生物大分子的稳定;无机盐是细胞内的成分和调节物质等 2培养基种类及用途 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固剂,如琼脂 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 化学成分 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 培养基成分明确(用化学成

3、分已知的化学物质配成) 分类、鉴定 用途选择培养基 培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌时,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌时,可在培养基中加入高浓度的食盐) 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物,如可用伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽) 3微生物的分离与计数 (1)土壤中分解尿素的细菌的分离: 筛选菌株:利用选择培养基筛选。 过程:土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察。 (2)分解纤维素的微生物

4、的分离: 原理: 即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 流程:土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落。 (3)鉴定方法: 鉴定分解尿素的细菌 含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基细菌指示剂变红,则该菌能分解尿素 鉴定纤维素分解菌 (4)计数方法: 显微镜直接计数法: 利用特定细菌计数板或血球计数板,在显微镜下计数一定容积样品中的细菌数量。该方法不能区分细菌的死活。 间接计数法(活菌计数法): 常用稀释涂布平板法。稀释涂布平板法的理论依据是:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落即代表一个活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在30300的平板进行计数,每个稀释倍数涂布3个平

5、板进行计数,取平均值。 【特别提醒】消毒和灭菌的区别 条件 结果 常用方法 应用范围 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部部分微生物 煮沸消毒法 一般物品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源等 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌 接种工具 干热灭菌 玻璃器皿、金属用具等 高压蒸汽灭菌 培养基及容器的灭菌 (二)真题剖析【题干】(2011全国新课标卷理综39)有些细菌可以分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答:(1)在筛选过程中,应将土

6、壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 和 。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 。(4)通常情况下,在微生物的培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行,以免周围环境中微生物的污染。【答案】(1)原油 选择 (2)平板划线法 稀释涂布平板法 (3)强 (4)干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰【解析】(1)欲筛选出能降解原油的菌株,培养基中应只含有原油而无其它碳源,这样,不能降解原油的细菌在此培养基上不

7、能生存,这类培养基属于选择培养基。(2)分离纯化菌种时,需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,使聚集在一起的分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便纯化菌种。(3)降解原油能力越强的菌株,在菌落周围形成的分解圈越大。(4)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)、高压蒸汽灭菌(如培养基)等。无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行,以避免周围微生物的污染。【题干】(2014全国新课标I卷理综39)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖

8、苷酶可将 分解成 。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成 色氢合物,用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):注:“”表示有,“”表示无据表判断,培养基甲 (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ;培养基乙 (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 。【答案】(1)纤维二糖 葡萄糖(2)红色 透明圈(3)不能 纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基,纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基 不能 培

9、养基中没有纤维素粉【解析】(1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,如下图:(2)刚果红与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成, 出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(3)生物适应一定环境,环境对生物具有选择作用,只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌才会发挥作用。纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基。纤维素分解菌鉴别培养 基属于固体培养基,要分离和鉴别纤维素分解菌,需要以纤维素为主要碳源的培养基,培养基乙不具有选择的作用。(三)高考圈题【题干】

10、同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答问题:(1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 指示剂,细菌合成的 将尿素分解为 ,pH升高,使指示剂变为红色。(2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌,这种培养基属于 培养基。(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的 和 ,实验中需要振荡培养,原因是 。(4)如图是利用 法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(5)关于如图的操作方法和结果,叙述正确的是 。A

11、操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌。B划线操作须在火焰上进行。C在5区域中才可以提到所需菌落。D在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌。【答案】(1)酚红 脲酶 氨 (2)选择(3)尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气(4)平板划线 (5)D【圈题理由】该题涉猎知识内容为该题组下常考重难点知识。【解析】(1)要筛选能降解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源,并且加入酚红指示剂。分解尿素的细菌能产生脲酶,会将尿素分解为氨,使酚红指示剂变红。(2)培养基中加入尿素并以此为唯一氮源,起到了选择作用,只有能利用尿素的细菌才能生存下来。(3)题意中的目的菌氮源来自尿素,碳源来自葡萄糖。振荡培养主要是可以为

12、目的菌提供氧气。(4)图中有明显的划线和分区,所以是平板划线法。(5)平板划线法操作前要将接种环放在火焰外焰灼烧灭菌,故A错误。划线操作须在酒精灯旁进行,故B错误。在3-5区域中都有可能得到所需菌落,故C错误。在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌,接种前灭菌时为了防止外来杂菌,每次结束灭菌是为了杀死上次残留的细菌,故D正确。【题干】牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如右图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有

13、9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:(1)巴氏消毒的方法是 ,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是 。(2)取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是下图中的 。(3)图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为 _个。运用这种方法统计的结果往往较实际值 (填“偏大”或“偏小”),原因是 。(4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动?

14、。(5)从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加人 ,菌落具有 特征的可以认定为大肠杆菌。【答案】(1)7075煮30分钟(80煮15分钟) 牛奶的营养成分不被破坏(2)B(3)3.4106 偏小 个别菌落可能是由2个或多个菌落形成(4)稀释次数减少(5)伊红美蓝 (金属光泽的紫)黑色【圈题理由】该题涉猎知识内容为该题组下常考重难点知识。【解析】(1)采用巴氏杀菌法加工牛奶,在7075煮30分钟或80煮15分钟进行杀菌,在杀灭牛奶中有害菌群的同时牛奶的营养成分不被破坏,完好地保存了营养物质和纯正口感。(2)取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,应选择涂布器,即图中的B。(3)依题意并结合图示可推测牛奶中每毫升含细菌数为(353334)310

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