分光光度计的性能检验.doc

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1、实验名称:分光光度计的性能检验1、 实验目的1、掌握分光光度计的重现性、波长精度检查等性能检验方法。2、熟悉分光光度计的使用方法。2、 实验原理1、 分光光度计的性能好坏,直接影响到测定结果的准确性,因此,新购仪器及使用一段时间后,均需进行检验调整。2、 利用镨钕滤光片的特征吸收峰值检验波长精度。3、 同种厚度的吸收池,由于材料及工艺等原因,往往造成透光率的不一致,从而影响测定结果,故在使用时需加以选择配对。3、 仪器与试剂1、 仪器:紫外可见分光光度计(配镨钕滤光片)。2、 试剂:高猛酸钾溶液、蒸馏水。4、 实验内容与步骤取两个干净的比色皿,将其中一个用蒸馏水润洗两到三遍,最后倒入蒸馏水(注

2、意不要超过比色皿体积的三分之二);另一个用高锰酸钾溶液润洗两到三遍,最后倒入高锰酸钾溶液(注意不要超过比色皿体积的三分之二)。然后将两个比色皿放入风光光度计中,以蒸馏水作为空白对照检测高锰酸钾的吸收波长。在电脑上输入开始波长:590.0 nm;结束波长:420.0 nm开始检测。5、 注意事项1、 仪器预热时必须打开样品室盖,因样品室盖是光闸门的开关,打开时,光闸门处于关的位置,可避免光电倍增管照光,延长光电倍增管的使用寿命。2、 大幅度改变测试波长时,需要等数分钟后,才能正常工作。(因波长大幅移动时,光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一定光响应平衡时间。)3、 每台仪器所配套的吸收池不

3、能与其他仪器上的吸收池单个调换。4、 仪器使用完毕后,用随机提供的塑料套罩住,在套子内应放数袋硅胶,以免灯室受潮。反射镜发霉或沾污会影响仪器能量。5、 吸收池每次使用完毕后,应立即用蒸馏水洗净,用吸水纸揩干,存于吸收池的盒内。6、 仪器工作1个月左右或搬动后,要重新进行波长精确性等方面的检查,以确保仪器的使用和测定的精确。6、 数据处理结论:由图表可知,高锰酸钾的最大吸收波长为525.0nm,与理论值相等,说明此仪器的波长精确性很好。7、 思考题1、 同种吸收池透光度的差异对测定有何影响?答:进入比色皿的选定光线应该是稳定的(强度稳定、波长稳定),它在比色皿中被溶液吸收一部分能量后再穿出比色皿

4、而加入光电池产生电信号得到读数,然后进行结果计算。如果有比色皿本身透光率的差异而出现的不是溶液对光线的吸收,而这个差异产生的电信号数值又算在样品溶液的电信号内,这就产生了测定的读数误差,从而导致计算结果有不应该有的误差。 2、 检查分光光度计的波长精度及重现性对测定有什么实际意义?答:波长精度和波长重复性的改变可使分光光度计的定量分析造成误差,定性分析或结构分析判断错误。因此,为确保分析结果的准确性,应在仪器安装完或使用一段时间后要进行一次检查校正。 3、 使用紫外可见分光光度计时,应注意哪些问题?答:(1)比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。首先,应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜,就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致,还可能使入射光不能全部通过样品池,导致测试比准确度不符合要求。其次,应保证每次测试时,比色皿架推拉到位。若不到位,将影响到测试值的重复性或准确度。最后,还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命. (2)干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致:(a)数显不稳、无法调“0”点或“100%”点(电路或光电管受潮)。(b)反射镜发霉或沾污,影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因,分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。 (3)仪器的工作环境。应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。

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