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1、实验室消毒、压力蒸汽灭菌与实验室废物处理,中国疾病预防控制中心 环境所消毒检测中心 张流波 01083132123 87779905 zlbxj,内容,引言 消毒方法与消毒程序的确定 消毒效果的实验室评价 压力蒸汽灭菌器 实验室医疗废物的处理,一、引言,1、欣弗事件,事件概要,部分患者在使用华源药业生产的克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液（俗称“欣弗”）后，出现胸闷、腹泻、过敏性休克等严重不良症状。 事件波及全国10多个省份，造成近百人不良反应，并导致11人死亡。 SFDA事后检测发现该注射液无菌检验不合格，热源质检测不合格。,不合格原因,经国家药监部门调查，华源药业在生产“欣弗”过程中，未按批准的工
2、艺参数灭菌，影响了灭菌效果，给公众健康和生命安全带来了严重威胁。 批准的灭菌程序：105，30min 实际的灭菌程序：101104，1min-4min,启示,105，30min是不是一个好的灭菌程序？ 应该按照批准的好的灭菌程序操作！,2、SARS的实验室感染,钟南山的说法-1,钟南山在2006年8月英国医学杂志中文版对我国实验室感染有这样的描述： 2004年3月，在病毒所工作的某研究生于3月25日出现肺炎症状，在回安徽合肥探亲时被诊断为SARS，她感染了7个人，包括其父母、在北京和合肥一起工作的同事。继她感染23天之后，在同所工作的另一人出现同样症状，随后被诊断为SARS。这两个病例由被污染
3、的同一实验室感染，但没有相互传染。此后，研究所被立即关闭，9名病人和200多名密切接触者被隔离检疫，没有再发现病例。,钟南山的说法-2,钟南山在2006年8月英国医学杂志中文版对我国的该起实验室感染有这样的评论： 1、非专业人员介入SARS研究项目； 2、使用未确定功效的方法灭活病毒； 3、P3实验室的正确操作可能有问题； 4、对发热病人没有进行监测。 “急需制定严格的科学规定，对已定政策必须执行并监测是否适宜。”,3、妇幼医院龟分枝杆菌感染事件,2006年十月出版，医院感染管理办法编写组的医院感染管理办法释义及适用指南这样描述： 1998年4至5月，某市妇儿医院发生了严重的医院感染爆发事件，
4、在该院接受手术的292例病人中，共发生术后伤口以龟分枝杆菌为主要病原体的混合感染158例，切口感染率为54.11%。,通过对手术过程各个环节的深入调查后证实，直接感染源为手术所使用的刀片和剪刀，而浸泡刀片和剪刀所使用的Lj-强化戊二醛消毒灭菌剂因配置错误、使用不当以及消毒剂本身浓度和产品说明存在的问题导致手术所用器械未达到灭菌效果。,实验室消毒的特点,是与实验室生物安全相关的大事 消毒的物品品种多、事前验证困难 影响消毒效果的因素多 消毒效果的最终确认需要较长时间 非专业人士不易明白,实验室消毒的质量管理,制定有一个好的消毒灭菌程序或方案 （plan ） 按制定的消毒灭菌程序或方案进行操作（d
5、o ） 采取正确的方法进行消毒效果评价、监测 （check） 根据评价结果改进工作 （advance）,二、消毒灭菌方案的制定,消毒方案应包括的内容,明确消毒目的（why) 确定消毒对象和目标微生物(what) 明确消毒的时机(when) 确定消毒方法与选择合适的消毒因子(how) 人员(who) 对消毒方案进行评估,1、消毒的目的,保护工作人员健康，防止实验室感染； 保证试验正常进行； 避免污染环境。,2、确定消毒对象和目标微生物,对 象：对实验过程中可能的污染物应进行消毒处理。包括各种实验物品、个人防护用品、空气、实验室的环境表面、废水、实验室废物和实验人员的身体（特别是手）等。 微生物：
6、应考虑对实验微生物有效，灭菌时应以细菌芽孢为指标，必要时以朊病毒做指标。,3、明确消毒的时机,及时性 可操作性 其他措施的替代补偿作用,4、如何确定消毒方法 选择合适的消毒因子,确保有效 对健康和环境的影响小 合法 原则上使用有许可批件的消毒产品 价格可以接受,影响消毒效果的各种因素,病原体抗力 传播方式 消毒因子 消毒对象 消毒环境 消毒时间 实施过程,病原体对常见消毒因子的抗力,芽胞 | 分枝杆菌 | 亲水病毒或小病毒 | 真菌 | 繁殖体 | 亲脂病毒或中等大小的病毒,消毒因子,物理因子： 热 射线、微波和激光 过滤、吸附与清洗 化学因子 现产现用的消毒因子 商品化的消毒剂：高、中、低消
7、消毒剂,高效消毒剂 杀灭一切微生物 中效消毒剂 杀灭分枝杆菌、真菌、 病毒及繁殖体 低效消毒剂 杀灭繁殖体和亲脂病毒,依据微生物(抗力、危害性) 选择消毒、灭菌的方法 1) 芽孢、孢子、分枝杆菌污染： 高水平消毒法 2) 经血传播病原体（乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒 、艾滋病病毒等）污染：高水平消毒法 3)真菌、亲水病毒、螺旋体、支原体、衣原体污染： 中水平消毒法 4）一般细菌和亲脂病毒污染：中/低水平消毒法 5）较多有机物的物品：增加消毒剂量 6）微生物污染严重时：增加消毒剂量,根据物品性质选择消毒方法 1）耐高温、耐湿度的物品和器材：压力蒸汽灭菌 2) 耐高温的玻璃器材、油剂类和干粉：干热灭
8、菌 3) 不耐热、不耐湿物品：环氧乙烷或低温蒸汽甲醛 气体消毒、灭菌 4) 金属器械：使用的消毒剂应选择对金属基本无腐 蚀的消毒剂。 5) 选择表面消毒方法：光滑表面可选择紫外线消毒 器近距离照射，或液体消毒剂擦拭；多孔材料表 面可采用喷雾消毒法。,过氧乙酸,广谱、高效，对金属及织物有腐蚀性，受有机物影响大，稳定性差(市场上以二元包装为主)。 适用于耐腐蚀物品、环境及皮肤等的消毒。 消毒方法：浸泡、擦拭、喷洒、喷雾、熏蒸。 浸泡、擦拭：0.05% (芽孢用1%)过氧乙酸5min。用无菌蒸馏水冲洗擦干后使用。 喷洒：一般表面用0.2%0.4%过氧乙酸喷洒作用3060min。 喷雾：2%过氧乙酸8
9、ml/m3。 熏蒸：15%过氧乙酸7ml/m3。,注意事项 1)易燃易爆：包装、储存、运输、使用。 2)不稳定：保存期、用前应测定有效含量、稀 释液临用前配制。 3)腐蚀性：消毒对象，即时用清水冲洗。 4)刺激性：谨防溅入眼内或皮肤上，溅上，即 时用冲洗，空气消毒在无人的情况 下使用。 5)有机物影响： 消毒被血液、脓液等污染的物 品时，需适当延长作用时间。,灭菌剂，具有对金属腐蚀性小，受有机物影响小等特点。适用于不耐热的医疗器械和精密仪器等消毒与灭菌。 灭菌处理：常用浸泡法，浸泡 10h 后取出，用无菌水冲洗干净，并无菌擦干后使用。 消毒：用浸泡法，有时用熏蒸法。浸泡20min45min，取
10、出后用灭菌水冲洗干净并擦干。 不宜用于空气消毒，也不宜用于普通物体表面的消毒！,戊二醛,甲醛,不理想但不可代替的熏蒸消毒剂 不理想：致癌、刺激性、作用慢 不可代替：空气消毒和全房间的消毒 消毒作用特点：消毒作用强且可靠、弥散性较好、穿透性较差。 计量：36%的甲醛40ml/m3，作用12小时,含氯消毒剂,是一大类，有漂白粉、漂白粉精、次氯酸钠、三氯磷酸钠、二氯异氰尿酸钠、三氯异氰尿酸等，可为粉剂、片剂、或液体。杀菌谱广，对细菌繁殖体、病毒、真菌孢子及细菌芽孢都有较强杀灭作用。 影响因素 （1）温度：温度低时可降低杀菌作用。 （2）酸碱度：酸性条件下的杀菌作用要比碱性条件下强。 （3）有机物：可
11、降低杀菌能力。 应注意其腐蚀和漂白作用。操作时应做好个人防护。应保存在密闭容器内，放在阴凉、干燥、通风处。,二氧化氯,ClO2，不稳定，常在临使用时生产或在二氧化氯稳定液中加入活化剂。用于饮用水消毒时，一般认为其不产生三卤化物，是一种较含氯消毒剂更安全的新型消毒剂。 杀菌能力：广谱、高效、速效，能杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、病毒、真菌、分支杆菌和芽孢等。 影响因素和注意事项 （1）消毒效果易受有机物影响。（2）pH质明显影响消毒效果，pH值高时消毒能力下降。（3）二氧化氯活化液和稀释液不稳定，应现配现用。（4）对金属有腐蚀性，对织物有漂白作用。 应用：适用于医疗器械、餐（茶）具、饮用水及环
12、境表面和空气等消毒。常用消毒方法有浸泡、擦拭、喷洒等。,新洁尔灭,化学名称为苯扎溴铵，分子式为C21H38NBr 。具有芳香味，呈淡黄色胶状，易溶于水，具有表面活性作用，振摇可产生大量泡沫，有一定的去污能力，腐蚀性小，消毒性能稳定，抑菌能力强。 杀菌能力：对化脓性病原菌有良好杀灭作用，对革兰阳性菌的杀灭作用要大于阴性细菌。 注意事项： (1) 苯扎溴铵与其他季胺盐类一样，极易被多种物体吸附，浸泡液的浓度可随消毒物品数量增多而逐渐降低，因此应该及时更换消毒液。 (2) 不得与肥皂或其它阴离子洗涤剂合用。 (3)不宜用于粪、尿、痰等的消毒。,臭氧,O3，强氧化剂，常温为爆炸性气体。水中溶解度约为3
13、%。有消毒后无残留的优点，适于用于饮用水、果蔬、餐饮具等的消毒。稳定性极差，只能现产现用。臭氧杀灭力强，并可破坏肉毒毒素。 影响因素：温度、湿度、有机物、pH、水的浑浊度等影响杀菌作用。 注意事项：室内空气中允许浓度为0.16mg/m3。对金属有腐蚀性，对橡胶有加速老化的作用，对织物和各种有色物品有漂白褪色作用。 水消毒：一般加入量 0.5 mg/L1.5mg/L，污染较重时可提高到3mg/L6mg/L，使水中臭氧浓度在0.1 mg/L0.5mg/L，维持5min10min。 空气消毒：一般用30mg/m3 的臭氧，作用15min30min。 物体表面消毒：，臭氧浓度12mg/L，作用时间15
14、min20min。,环氧乙烷 在低温下为无色液体，具有芳香醚味，沸点为10.8，嗅阈值为760 mg/m31064mg/m3，密度为1.52；易燃易爆，气体穿透力强。 气体杀菌力强，属灭菌剂。 不损害物品且穿透力很强，不宜用一般方法灭菌的物品均可用环氧乙烷消毒和灭菌。例如，电子仪器、光学仪器、医疗器械、书籍、文件、皮毛、棉、化纤、塑料制品、木制品、陶瓷及金属制品、内镜、透析器和一次性使用的诊疗用品等。 环氧乙烷灭菌是目前最主要的低温灭菌方法之一。,消 毒 剂 的 施 药 方 法,普通喷雾消毒法,用普通喷雾器（如各种农用喷雾器）喷洒消毒液进行表面消毒的处理，喷洒液体雾粒直径多在 100m 以上。
15、 1.适用范围 物体（品）表面、室内墙面和地面等。 2.使用要求 按先上后下、先左后右的顺序依次喷洒。喷洒量可依据表面的性质而定，以消毒剂溶液可均匀覆盖表面至全部湿润为度。 3.注意事项 喷洒有刺激性或腐蚀性消毒剂时，消毒人员应配戴防护口罩、眼镜，穿防护服。,气溶胶喷雾消毒法,用气溶胶喷雾器喷雾消毒液进行空气或物体表面消毒的处理方法，雾粒直径20m以下者占90%以上。由于所喷雾粒小，浮于空气中易蒸发，可兼收喷雾和熏蒸之效。 1、适用范围 室内空气和物体表面。 2、使用要求 按自上而下、由左向右顺序喷雾。喷雾量以消毒剂溶液可均匀覆盖在物品表面或消毒液的雾团充满空间为度。消毒结束后通风，去除空气中
16、残留的消毒液的雾粒及气味。 3、注意事项 同普通喷雾消毒法，应特别注意防止消毒剂气溶胶进入呼吸道，应使用可靠的喷雾器。,擦拭消毒法,用布或其它擦拭物浸以消毒剂溶液，擦拭物体表面。 1、适用范围 适用于各种器械、装备和实验台等物体表面。 2、使用要求 用干净的布或其它物品浸消毒剂溶液，依次往复擦拭拟消毒物品表面，作用至所用消毒剂要求的时间后，再用清水擦洗，去除残留消毒剂。 3、注意事项 不耐湿物品表面不可使用该方法；擦拭时应防止遗漏；污物可导致消毒剂有效浓度下降，应适时更新消毒液。,浸泡消毒法,将待消毒物品全部浸没于消毒剂溶液内。 1、适用范围 适用于耐湿器械特别是玻璃器皿、衣物等。 2、使用要求 对有管腔物品应使管腔内充满消毒剂溶液。消毒或灭菌至要求的作用时间，应及时取出消毒物品用清水或无菌水清洗，去除残留消毒剂。 3、注意事项 使用可连续浸泡消毒的消毒液时，消毒物品或器械应洗净沥干后再放入消毒液中。,熏蒸
