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1、高效液相色谱法测定汽水中的苯甲酸,一、实验目的,1.熟悉高效液相色谱操作条件的选 择，以达到化合物的良好分离效果 2.掌握高效液相色谱测定汽水中苯甲酸的方法,二、实验原理,苯甲酸是一种常用的防腐剂，被广泛应用于饮料及日常调味品中。我国食品卫生标准规定饮料如汽水中苯甲酸的最大使用量为0.2 g/kg。本实验利用高效液相色谱法测定汽水中苯甲酸的含量，以检测其饮用安全性。,三、仪器及试剂,高效液相色谱仪带紫外检测器 甲醇，（1+1）氨水， 0.02mol/L乙酸铵溶液， 1mg/ml 苯甲酸标准储备液， 0.1mg/ml 苯甲酸标准使用液,3.标准曲线的绘制 分别吸取苯甲酸标准使用液（0.1mg/m
2、l) 2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于10ml具塞比色管中，用超纯水定容至刻度，混匀。过滤后分别取10ul进样，测定不同浓度标准溶液的峰面积。以苯甲酸标准溶液的浓度为横坐标，相应峰面积为纵坐标绘制标准曲线。,4.样品的处理与测定 取汽水样品约10g于小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用（1+1）氨水调pH至约7，加超纯水定容至25ml，离心后，取10ul 进样分析。,苯甲酸浓度(mg/ml) 峰面积（微伏秒） 保留时间(min) 0.02 638128 6.005 0.04 1294282 6.015 0.06 1948733 6.015 0.08 2612316 6.012 0.10 3227299 6.010,五、结果记录及讨论,1.数据记录及处理 根据汽水中苯甲酸的峰面积从标准曲线上查的其浓度，据下列公式计算： x=CV/m x-样品中苯甲酸的含量，g/kg C-从标准曲线上查得的样品浓度,mg/ml m-样品质量，g V-样品稀释总体积，ml,2.讨论 思考题 1.为什么高效液相色谱流动相在使用前必须经过脱气处理？ 2.改变流动相的配比，苯甲酸的保留时间是否发生变化？若发生变化将如何变？,谢谢观赏,WPS Office,Make Presentation much more fun,WPS官方微博 kingsoftwps,
