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1、GB/T 发布国家市场监督管理总局中国国家标准化管理委员会中华人民共和国国家质量监督检验检疫局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会-实施-发布畜禽饲料有效性与安全性评价猪饲料标准回肠可消化氨基酸测定 简单T型瘘管法Feed efficacy and safety evaluation-Guidelines for the determination of standardized ileal digestible amino acids for growing pigs Simple T-cannulation （送审稿）GB/T -中华人民共和国国家标准ICS 65.120B46
2、7前 言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出（SAC/TC 76）并归口。本标准起草单位：中国农业大学、农业农村部饲料效价与安全监督检验测试中心（北京）、重庆畜牧科学院。本标准主要起草人：曾祥芳、谯仕彦、杨飞云、王钰明、李培丽、周俊言。猪饲料标准回肠可消化氨基酸测定 简单T型瘘管法1 范围本标准规定了畜禽饲料有效性与安全性评价中用回肠末端简单T型瘘管法测定猪饲料标准回肠可消化氨基酸的技术要求。本标准适用于饲料原料和饲料产品猪标准回肠可消化氨基酸的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的
3、版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6435 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定GB/T 13088 饲料中铬的测定GB/T 15399 饲料中含硫氨基酸测定方法-离子交换色谱法GB/T 15400 饲料中色氨酸测定方法-分光光度法GB/T 18246 饲料中氨基酸的测定NY/T 65 猪饲养标准NY 5027 无公害食品-畜禽饮用水水质3 术语与定义下列术语和定义适用于本文件。3.1无氮饲粮法 nitrogen-free diets method采用纯合或半纯合的无氮饲粮来测定猪的基础回肠内源氨基酸损失的方法。3.2标准回肠可消化
4、氨基酸 standardized ileal digestible amino acids饲粮氨基酸摄入量与回肠末端氨基酸排出量中扣除应用无氮饲粮法测定的基础内源氨基酸损失后的差值，称为标准可消化氨基酸。4 原理以安装有回肠末端简单T型瘘管（参见附录A）的健康生长猪为试验动物，用无氮饲粮法和指示剂法为手段的回肠末端取样法测定猪饲料标准回肠可消化氨基酸（standardized ileal digestible amino acids，SIDAA）。5 试验方法5.1 试验设计依据待测饲粮的数量确定试验方法，试验设计应为交叉设计或拉丁方设计，每个待测饲粮处理至少6个重复，每个重复至少1头猪。5.
5、2 试验动物5.2.1 从杜长大三元杂交健康猪群中选择体重1825 kg、健康去势公猪作为试验动物，小型猪体重可酌减，进行免疫、驱虫处理后备手术用。5.2.2 猪回肠末端简单T型瘘管手术的操作流程参见附录B。5.3 试验饲粮5.3.1 试验饲粮的要求和制备试验饲粮的粉料粒度应99%通过孔径为2.80 mm的编织筛，1.40 mm编织筛筛上物比例不得大于15%，筛上物中不得有整粒谷物；颗粒饲料的含粉率应低于4%，粉化率应低于10.0%。试验饲粮均匀度的变异系数应不大于5%。5.3.2 无氮饲粮的配制无氮饲粮应由玉米淀粉（N 6.253%）、蔗糖、纯纤维素、食盐、矿物质微量元素和维生素预混剂等组成
6、（参见附录C）。无氮饲粮中微量元素和维生素含量应符合NY/T 65推荐值。5.3.3 试验饲粮指示剂种类及含量试验饲粮指示剂选择三氧化二铬（Cr2O3），三氧化二铬添加量0.3%0.5%。5.4 试验期在完成供试猪回肠末端简单T型瘘管手术后，按外科手术常规护理程序护理14 d（参见附录B），待恢复健康开始正式试验。每期试验分适应期、预饲期和正试期3个阶段。5.4.1 适应期：不低于6 d。分别观察并记录每头试验猪待测饲粮或无氮饲粮的自由采食量，作为正试期饲粮饲喂量的决策依据。5.4.2 预饲期：不低于5 d。按适应期观察到的自由采食量的85%90%的量定量饲喂。5.4.3 正试期：不低于2 d
7、。准确定量饲喂，每日08:0020:00连续收集每头猪的回肠末端食糜。5.5 饲养管理5.5.1 供试猪饲养于个体代谢笼中，将每日的总采食量均分为3次饲喂，时间为08:00、14:00和18:00，自由饮水，水质应符合NY 5027的相关规定。5.5.2 猪舍温度2025 ，相对湿度80%，光照3050 lx，风速0.41.0 m/s。5.5.3 供试猪的免疫程序应符合国家相关规定。5.6 试验样品的采集与制备5.6.1 正试期每日连续收集12 h食糜，每次收集后立即放入-20 冷冻保存。5.6.2 食糜常温解冻，各头猪每期食糜经充分混合后，取样，并在冷冻干燥机中冻干，置室温下回潮24 h，称
8、重、记录、粉碎备用。5.6.3 取样编号、密封保存，测定样品干物质、氨基酸和指示剂含量等。5.7 试验样品分析按照GB/T 6435测定样品中水分并计算其干物质含量；按照GB/T 13088测定样品中铬的含量；按照GB/T 15399测定样品中含硫氨基酸含量；按照GB/T 15400测定样品中色氨酸含量；按照GB/T 18246测定样品中除含硫氨基酸和色氨酸之外的其他氨基酸含量。6 结果计算与统计分析6.1 试验饲粮标准回肠可消化氨基酸的计算如下。6.1.1表观回肠氨基酸消化率 apparent ileal amino acid digestibility表观回肠氨基酸消化率按式（1）计算。A
9、ID = 1-(AA1/AA2) (IM2/IM1) 100 （1）式中：AID饲粮表观回肠氨基酸消化率，%。AA1干物质基础回肠食糜中氨基酸含量，单位为克每千克（g/kg）。AA2干物质基础待测饲粮中氨基酸含量，单位为克每千克（g/kg）。IM1干物质基础回肠食糜中指示剂含量，单位为克每千克（g/kg）。IM2干物质基础待测饲粮中指示剂含量，单位为克每千克（g/kg）。6.1.2基础回肠内源氨基酸损失 basal ileal endogenous amino acid losses基础回肠内源氨基酸损失按式（2）计算。BIAA = AA3 (IM4/IM3) （2）式中：BIAA基础回肠内源
10、氨基酸损失，单位为克每千克（g/kg）。AA3无氮饲粮饲喂条件下干物质基础回肠食糜中氨基酸含量，单位为克每千克（g/kg）。IM3无氮饲粮饲喂条件下干物质基础回肠食糜中指示剂含量，单位为克每千克（g/kg）。IM4干物质基础无氮饲粮中指示剂含量，单位为克每千克（g/kg）。6.1.3标准回肠氨基酸消化率 standardized ileal amino acid digestibility标准回肠氨基酸消化率按式（3）计算。SID = AID + (BIAA/AA2) 100 （3）式中：SID饲粮标准回肠氨基酸消化率，%。6.1.4标准回肠可消化氨基酸standardized ileal d
11、igestible amino acidSIDAA（干物质基础） = AA2 SID （4）SIDAA（风干物质基础） = AA4 SID （5）式中：SIDAA饲粮标准回肠可消化氨基酸，单位为克每千克（g/kg）。AA4风干物质基础待测饲粮中氨基酸含量，单位为克每千克（g/kg）。6.2 以每个试验猪为单位，计算待测饲粮标准回肠可消化氨基酸的平均值和相应的标准差。6.3 分析结果有效位数为小数点后两位。6.4 各重复间的回肠标准可消化氨基酸测定值相对偏差不得大于5%。6.5 试验结束后，根据试验目的和试验设计，采用相应的方法对试验数据进行统计分析。7 试验报告7.1 试验报告中应包括题目、摘
12、要、试验目的、材料与方法、结果与分析、试验结论等内容。7.2 试验报告应针对试验目的和要求给出具体的试验结果，在可能的情况下给出明确结论。7.3 试验报告应对试验方法等可能影响试验结果的情况做简要说明。附 录 A（资料性附录）简单T型瘘管简单T型瘘管由4部分组成，示意图见图A.1：A：T型本体。长度为6.58 cm，内径（横截面内圆的直径，即贯通孔的孔径）为1.41.6 cm，外径（横截面外圆的直径）为1.92.1 cm，外螺纹的螺距为0.2 cm，螺纹长度为56 cm。槽型部的长度（即槽体的长度）为6.57.5 cm，内径（此处是槽型部横截面为半圆形的情形，内径即指内半圆形的直径）为1.41
13、.6 cm，外径（此处是槽型部横截面为半圆形的情形，外径即指外半圆形的直径）为1.92.1 cm。B：管塞。管塞的管体外径（横截面外圆的直径）为1.41.5 cm，内径（横截面内圆的直径）为1.1 cm，长度为6.58 cm，密封端厚度为0.20.3 cm；抵挡环的外径（横截面外圆的直径）为2 cm，内径（横截面内圆的直径）为1.1 cm。C：管盖。外径（横截面外圆的直径）为2.52.7 cm，内径（横截面内圆的直径）为1.92.1 cm，内螺纹的螺距为0.2 cm，螺纹长度为1.82.0 cm。D：外挡圈。厚度为0.30.4 cm，中心孔的直径为1.92.1 cm，外圆直径为67 cm，内螺纹的螺距为0.2 cm，螺纹长度为0.40.6 cm。图A.1 简单T型瘘管示意图专利号：ZL 2015 2 0207381.0附 录 B（资料性附录）猪回肠末端简单T型瘘管手术A.1 术前准备试验猪手术前禁食2436 h，停止饮水2 h，以排空肠内容物并降低腹压。A.2 麻醉与保定采用盐酸氯胺酮或舒泰（内含镇静剂替来他明和肌松剂唑拉西泮）等麻醉剂按照产品使用说明进行全身麻醉；待猪麻醉后，左侧躺卧保定于手术台上，腹部剃毛，按常规外科手术消毒。A.3 瘘管安装a）手术部位在腹中线上方约20 cm，自最后一根肋骨缘约34 cm处，做一长58 cm左右的纵向切口，腹外斜肌、腹内斜肌、
