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1、 实验六血涂片的制作和血细胞的观察 普通生物学 实验目的 掌握血涂片的制作 观察红血球的形态及在不同环境下的反应 材料和用品 材料人血或鱼血主要用品显微镜酒精棉花5 NaCl0 9 NaCl盖玻片蒸馏水载玻片注射针筒针头 实验内容与方法 血涂片的制作和血细胞的观察 1 血涂片的制作用酒精棉球擦拭消毒指尖 用采血针刺破指尖 从采血针眼处挤出绿豆大小血滴 用清洁玻片面的一端轻轻接触血滴 使血滴附于玻片面上 注意勿触及皮肤 否则血在玻片上就不能成滴 以左手拿该片的两端 迅速用右手拿住另一载玻片的一端 在左手载玻片上由前向后接触血滴 使两载玻片约成45 角 轻轻移动 使血滴成一直线 然后由前向后推为一
2、均匀的薄片涂片在空气中干燥后置于染色架上 滴加瑞氏染色液 使涂片被染色液覆盖染1分钟后 再加等量的缓冲液于染色液上 浸染约5 8分钟此时涂片表面呈现一层古铜色用蒸馏水迅速冲洗 见涂片呈粉红色后 自然晾干 血涂片的制作和血细胞的观察 2 血细胞观察制作良好的血涂片厚薄适宜 血膜分布均匀 呈粉红色 选一厚薄适宜部位置显微镜下观察 先用低倍镜观察全片 了解涂片染色 细胞分布情况 再用油镜观察 1 红细胞数量最多 体积小而圆 均匀分布 呈红色的圆盘状 边缘厚 着色较深 中央薄 着色较浅 无细胞核 细胞器 胞质内充满血红蛋白 2 白细胞白细胞数量较红细胞数量少 但胞体大 细胞核明显 极易与红细胞区别开
3、嗜中性粒细胞是白细胞中较多的一种 约占白细胞总数50 70 体积比红细胞大 主要的特征是胞质中的特殊颗粒细小 分布均匀 着淡紫红色 胞核着深紫红色 一般分3 5叶 叶间以染色质丝相连 核分叶的多少与该细胞年龄有关 如核为杆状 则为嗜中性粒细胞的幼稚型 嗜酸性粒细胞比中性粒细胞略大 数量少 约占7 以下 核常分两叶 着紫蓝色 主要特点是胞质内充满粗大 圆形的颗粒 色鲜红或桔红 嗜碱性粒细胞数量很少 约占1 以下 在一般血涂片上不易找到 体积比上述2种白细胞稍小 胞质中分散着许多大小不一的深紫蓝色颗粒 胞核形状不定 圆形或分叶 也染成紫色 但染色略浅 一般都被颗粒遮盖 形状不清 淋巴细胞数量较多
4、约占20 40 可见中 小型 淋巴细胞 其中小淋巴细胞最多 略大于红细胞 核大而圆 几乎占据整个细胞 染成深蓝紫色 胞质极少 仅在核的一侧出现一线状天蓝色或淡蓝色的胞质 中淋巴细胞比红细胞大 胞质较小淋巴细胞的稍多 着色较浅 核圆形或卵圆形 位于细胞中部 也染成深蓝紫色 单核细胞数量少 约占2 8 是细胞中体积最大的一种 胞核呈肾形 马蹄形 常在细胞一侧 着色比淋巴细胞浅 血小板为形状不规则的细胞小体 其周围部分为浅蓝色 中央有细小的紫色颗粒 常聚集成群 分布于红细胞之间 高倍镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒 在油镜下才能看到颗粒周围的浅色胞质部分 实验步骤 分别在3个玻片上滴上一滴5 NaCl 0 9 NaCl和蒸馏水 以酒精棉球消毒捐血者的指尖 等酒精自然蒸发后 用采血针在消毒指尖刺一个小口 勿太用力 以免造成大伤口 将用过的采血针丢弃在指定的烧杯内 将指尖血液各滴一滴至3个玻片上 并盖上盖玻片 捐血者用棉花压住伤口直到血流停止 同时其他组员马上进行下一步骤 5 在显微镜下观察红血球的大小 形状以及在不同渗透环境下的反应 並比照附图 有没有观察到溶血現象 有没有观察到皱褶的现象 解释观察到红血球发生不同反应的原因 作业与思考 1 说明红血球细胞在不同渗透环境中的变化情况并讨论原因
