《LCMS谱图的判断及分析方法的选择.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《LCMS谱图的判断及分析方法的选择.pdf（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、LCMS 谱图的判断及分析方法的确定 LCMS 谱图的判断及分析方法的确定 一 LCMS 谱图的相关标准及 MS 棒图判断 a LCMS 合格谱图的标准 1 UV 谱图主峰的保留时间应大于 2T0 进样峰时间 并小于全部运行时间的 4 5 2 UV 谱图的吸收波长以客户指定波长为准 一般为 220nm 弱紫外样品 紫外吸 收在 220nm 是波谷 MS 信号相对较强 可用 ELSD 谱图交货或以客户要求为准 3 UV 谱图主峰吸收一般应高于 100mau 对信噪比良好的样品 可以适当降低峰 高要求到高于 50mau 当所有可见的 UV 峰都积分后仍合格的 可认为合格 4 UV 谱图中 主峰理论
2、塔板数在 10000 以上 即峰宽小于 0 5 分钟 峰对称因 子应在 0 9 1 2 即对称性较好 5 MS 谱图应保证准分子离子峰可见 其它峰是二聚峰 以及合理的碎片或加合峰 6 MS 范围 通常在 100 1000 之间 对分子量很小或很大的样品 应调整 MS 范围 保证最大值超过 2M 23 最小值小于 M 2 7 紫外积分超过 2 的杂质 如果杂质的 MS 和主峰一致 需检查结构是否有异构 体 如客户确认有异构体并同意可以合并纯度交货 方能判断合格 否则应重 新分离或用其它手段如 NMR 确定结构 8 紫外无积分或积分结果小于 1 的色谱峰 在 TIC 中峰高不得超过主峰的 1 2
3、特殊情况除外 难电离样品 Agilent LCMS TIC 中杂质绝对吸收小于 50000 b MS 棒图的判断 正离子检测 1 MS 谱图中分子离子峰的值应为 EM 1 Exact Mass 即 M H 2 常见的合理的加合离子有 M Na M K 2M H 2M Na M 2 H 3 加有缓冲溶液或溶剂的体系还可引进 M X X 溶剂或缓冲溶液中的阳离子 如 用碱性体系方法分析时常见的加合离子有 M NH4 我们的碱性体系用的 铵盐缓冲溶液 用岛津仪器分析时常可见到的加合离子还有 M Na X 4 若有小于分子离子峰的碎片离子 要根据化合物结构来判断是否是其合理的碎 片 碎片 M1所出碎片
4、峰的 MS 值应为 M1或 M1 2 出 M1还是 M1 2 由断裂机理决定 5 同位素效应 一般带 Cl 或 Br 的样品 棒图中同位素效应比较明显 见附图 6 若棒图中有不能解释的碎片或加合离子 且丰度较高 则需要进行 NMR 验证 c MS 棒图的判断 负离子检测 1 MS 谱图中分子离子峰的值应为 EM 1 Exact Mass 即 M H 2 加有缓冲溶液或溶剂的体系还可引进 M X X 溶剂或缓冲溶液中的阴离子 3 其他常见合理加合离子及碎片离子同理正离子检测 二 LCMS 分析方法的分类及其适用范围 反相色谱 a 从流动相体系划分 可分为 酸性方法和碱性方法 方法确定的原理 先根
5、据化合物的结构算出其 ClogP 的值来大致确定其适用的分 析方法 若计算出的方法不合适 再根据其谱图的具体情况进行修改 一般来说 酸性方法适用于大部分化合物 常规样品通常用 10 80AB 极性较小的 样品可以考虑用 30 90AB 或 50 100AB 极性较大的样品可以选择 0 30AB 或 0 60AB 碱性方法适用的情况为 1 极性很大 用酸性方法 0 30AB 时出峰仍太靠前 2 用酸性方法时出峰形状很宽 对称性不好 3 用酸性方法时目标物在进样峰的位置即被冲出 形成如下图所示的双峰 4 有些物质在酸性体系易成盐 不稳定 也会形成如上图所示的情况 5 负离子检测一般在碱性体系中进行 b 从质谱 MSD 的检测离子的极性划分 可分为 正离子方法和负离子方法 一般来说 正离子方法适用于大部分化合物 而羧酸 醛以及羧醛等结构的样品一 般在正离子方法中电离不好 则需换用负离子方法来进行分析 c 从大气压电离质谱 API MS 电离模式划分 可分为 气动辅助 电喷雾 API ES 大气压化学电离 APCI 大气压光致电离 APPI 一般来说 ESI 源适合于大部分有极性的 含杂原子的化合物 如果样品在 ESI 源 下电离很弱 紫外吸收相对较强 且分子量相对较小 具有一定的挥发性 是热 稳定化合物 可以选择更换 APCI 源及 APPI 源来进行分析 附图 附图
