《乙肝、HIV、梅毒检测技术2016.9.13课件PPT》由会员分享,可在线阅读,更多相关《乙肝、HIV、梅毒检测技术2016.9.13课件PPT(94页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、乙肝 HIV 梅毒实验室检验技术 甘肃省妇幼保健院临床检验中心 赵翠生 综合产前检查服务 检测 孕产妇参加产前检查服务 检测前信息 HBV检测 梅毒检测 HIV检测 全血细胞计数和其它检测 取血样 2 梅毒的实验室检测 3 梅毒 病原体为梅毒螺旋体 属于密螺旋体属 苍白密螺旋体苍白亚种 Treponemapallidumsubspeciespallidum 苍白亚种梅毒苍白螺旋体地方亚种地方性梅毒极细亚种雅司病密螺旋体属品他螺旋体品他病 梅毒血清学试验基本实验室设备 5 筛查时间 6 梅毒的实验室检测方法 显微镜检测法 诊断技术 1 暗视野显微镜检查 2 镀银染色检查血清学检测法 筛查技术 非
2、梅毒螺旋体抗原血清试验 检测非特异性抗体 抗心磷脂抗体 即非特异性抗体 反应素梅毒螺旋体抗原血清试验 检测特异性梅毒螺旋体抗体 梅毒早期诊断的依据之一是病原学检测 即在组织或分泌物中检测到苍白螺旋体 暗视野显微镜镀银染色镜检 梅毒检测技术 8 非梅毒螺旋体抗原血清学试验RPR 快速血浆反应素环状卡片试验 TRUST 甲苯胺红不加热血清试验 VDRL 性病研究实验室试验 梅毒螺旋体抗原血清学试验TPPA 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 ELISA 酶联免疫吸附试验 POCT 胶体金技术 快速检测 一站式检测 梅毒检测技术 9 围产期梅毒检测方法特点 用于诊断产检 临产及分娩的孕产妇是否感染梅毒梅毒血清学
3、检测 筛查试验应具有的特点具有较高的灵敏度和特异度操作简单 容易获得 便宜尽可能在 当日 获得结果 10 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 梅毒螺旋体感染可产生非特异性抗体 非梅毒螺旋体抗体 非梅毒螺旋体抗体又称之为反应素 是抗心磷脂等抗原的抗体随菌体和宿主细胞的类脂质抗原量升高除梅毒外 其他医学情况会造成非梅毒螺旋体抗原血清学试验假阳性结果 包括结核 疟疾 妊娠和风湿关节炎 狼疮及硬皮病等自体免疫性疾病 11 非梅毒螺旋体抗原血清学试验的特点 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 快速 简便 便宜敏感性和特异性较高硬下疳后1 2周变为阳性可用于筛查样本评估对治疗的反应鉴别复燃还是再次感染 12 确保非梅毒螺
4、旋体抗原血清学试验质量的关键点 按照标准操作程序 SOPs 进行操作推荐使用评价特性较好的试剂 按照统一的标准报告结果开展实验室质控 QC 和参加室间能力验证 PT 由中国疾病预防控制中心性病中心国家参比实验室提供 13 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 抗体滴度通常与疾病活动度有关治疗后 可能几个月 非梅毒螺旋体抗原血清学试验通常转变为不反应如果用同一种实验 相同试验滴度4倍变化 如从1 16下降到1 4或从1 8上升到1 32 为临床显著变化有些病人 抗体滴度可始终处于较低水平 有时可持续终生 血清固定 注意 病人血清学监测应在同一个实验室使用同一种检测方法 RPR TRUST 进行连续多次检测
5、 RPR和TRUST方法均有效 但检测的滴度结果不能直接进行比较 14 治疗后非梅毒螺旋体抗原血清学试验抗体滴度变化的临床意义 一期梅毒和二期梅毒 成功治疗 抗体滴度应3个月后下降2倍6个月后下降4倍一期梅毒 1年后抗体滴度转阴二期梅毒 2年后抗体滴度转阴晚期梅毒 治疗后抗体滴度缓慢下降50 的病人2年后抗体滴度仍为阳性 15 梅毒螺旋体抗原血清学试验 梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒螺旋体抗原特异性抗体可用于确认非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果 排除其假阳性阳性结果可持续存在 即使治疗后仍可为阳性 梅毒螺旋体抗原血清学试验与疾病的活动度无关 不能用于鉴别现症感染还是既往感染 也不能用于判
6、断疗效 一期梅毒治疗病人中 15 25 可在2 3年后转为血清学阴性 16 妊娠期梅毒检测 所有孕产妇应进行梅毒筛查检测 孕期尽早 如果可能 在孕早期时 以及如果在分娩前 临产时没有筛查检测结果 在分娩时检测筛查检测可应用以下任何一类方法 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 滴度 或梅毒螺旋体抗原血清学试验所有筛查检测结果阳性的孕产妇都应用另一类检测方法进行复检确认是否为现症梅毒所有产妇及所生婴儿出院前 产妇梅毒检测结果都应记录在病历中 以确保需要时给予治疗 17 孕产妇梅毒检测流程 阴性反应 阳性反应 阴性反应 阳性反应 HIV感染病人的梅毒血清学试验 一些HIV感染病人 其梅毒血清学试验结果不典型
7、 包括滴度超常高或超常低滴度不断变动如果临床表现提示早期梅毒 而血清学试验结果与此不一致 考虑病灶活检或暗视野显微镜检查 注意 对于大多数HIV感染病人而言 梅毒血清学试验是诊断梅毒感染 随访观察疗效准确 可靠的检测方法 19 梅毒血清学检测结果的解释 包括结核 疟疾 风湿性关节炎或妊娠 20 暴露婴儿的梅毒检测 21 梅毒暴露婴儿先天梅毒检测 母体非梅毒螺旋体和梅毒螺旋体IgG抗体可通过胎盘 所以应谨慎地对婴儿梅毒血清学试验结果进行解释婴儿需要接受预防性治疗还是规范的抗梅毒治疗应根据 母亲确诊梅毒感染母亲治疗情况婴儿梅毒感染的临床表现 实验室或放射线检查结果母亲及婴儿非梅毒螺旋体抗原血清学试
8、验滴度水平的比较 尽可能在同一个实验室使用相同的试验方法 22 先天梅毒的诊断 先天梅毒的诊断标准 梅毒暴露婴儿具有以下条件之一 任何先天梅毒临床表现暗视野显微镜检梅毒螺旋体阳性 梅毒螺旋体IgM抗体阳性 RPR TRUST检测阳性 滴度比母亲分娩前最近一次滴度高4倍及以上RPR TRUST监测随访中 任何一次滴度不下降或反而上升满18月龄后 TPPA检测阳性 IgM抗体反映近期感染 可帮助鉴别婴儿先天梅毒 但我国尚不能广泛开展 23 梅毒暴露婴儿的评估 梅毒暴露婴儿 婴儿RPR检测婴儿RPR检测不能使用脐带血 因其易被母体血液污染 从而出现假阳性结果检查先天梅毒临床表现 非免疫性水肿 黄疸
9、肝脾大 鼻炎 皮疹 末端肢体假性麻痹对可疑病灶或体液进行暗视野显微镜检查 24 先天梅毒检测流程 25 梅毒检测小结 早期梅毒诊断可根据在组织或分泌物样本中通过显微检测到苍白螺旋体而诊断应用梅毒血清学试验进行梅毒筛查非梅毒螺旋体抗原血清学试验检测梅毒感染过程中产生的非特异抗体 滴度通常与疾病的活动度有关 因此可用于监测对治疗的反应梅毒螺旋体抗原血清学试验检测对抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体 可用于确认临床诊断或非梅毒螺旋体抗原血清学试验的阳性结果 可反映任何阶段的梅毒暴露先天梅毒的诊断复杂 应根据 母亲梅毒感染状态母亲梅毒治疗情况婴儿梅毒感染的临床表现 实验室或X线检查结果母亲 婴儿非梅毒螺旋体
10、抗原血清学试验滴度水平的比较随访 26 HIV和HBV的实验室检测 HIV和HBV筛查检测 筛查检测用于诊断产检 临产及分娩的孕产妇是否感染HIV和HBVHIV抗体检测乙肝表面抗原 HBsAg 检测筛查检测应具有较高的灵敏度和特异度操作简单 容易获得 便宜尽可能在 当日 获得结果 28 何时使用何种检测 29 HIV试验和检测 30 HIV检测 抗体检测 一个人感染了HIV病毒后 体内将产生特异性抗体对抗HIV病毒 HIV抗体通常在感染后4 6周出现 但也有时也会在感染后3个月才出现从感染HIV病毒到出现特异的HIV抗体的一段时期称为 窗口期 标准的HIV诊断检测是识别HIV抗体 注意 与其他
11、大多数疾病不同 HIV抗体没有保护性作用 31 HIV抗体检测类型 32 HIV检测 病毒核酸检测 这些检测检测HIV感染者血液或血浆中的病毒必须由经过专门培训的实验室人员操作实验室需有资质 并配备专门设备昂贵 不是针对所有人进行的常规检测方法PCR 多聚酶连反应法 检测HIVDNA定性检测血液中是否含有病毒 用于诊断18月龄内婴儿是否感染HIVHIVRNA定量检测病毒载量 用于监测对抗病毒治疗的反应 33 HIV筛查检测结果的含义 HIV筛查检测结果 阴性 受检者没有感染HIV或者受检者已经感染了HIV 但处于窗口期 3个月后再次进行检测HIV筛查检测结果 阳性 病人可能已经感染HIV 但应
12、再次重复检测 另一种方法复检或确诊检测 34 HIV确认试验结果的含义 如果筛查检测结果阳性 两次重复检测中1次或2次检测结果为阳性 需要进行确认试验免疫印迹法 WB 确认试验结果 阳性 病人确认感染HIV阴性 受检者没有感染HIV不确定 结果为 不确定 受检者必须在4周后再次采血 重复前述所有步骤进行检测 35 中国预防艾滋病 梅毒和乙肝母婴传播HIV检测流程 在产前检查服务中开展整合的检测咨询所采用的HIV检测流程 36 产时HIV抗体检测流程 中国预防艾滋病 梅毒和乙肝母婴传播HIV检测流程 37 儿童HIV检测 38 HIV暴露婴儿和儿童的HIV抗体检测 不是所有HIV感染母亲所生儿童
13、都会感染HIV 但是如果对12 18个月以内的婴儿进行HIV抗体检测 所有HIV感染母亲所生婴儿都有可能是HIV检测结果阳性 即使婴儿并没有感染HIV由于母体自身抗体可通过胎盘进入胎儿体内 母体传入的抗体可在婴儿体内持续18个月 所以12 18月龄以内的婴儿不能应用抗体检测方法进行诊断 39 婴儿感染早期诊断 EID HIV病毒检测 DNA PCR HIV病毒检测 DNA PCR 检测细胞内的HIV病毒 能够检测低至1 10拷贝前病毒DNA 以及可在HIV暴露婴儿出生后6周内诊断HIV感染用于HIV暴露婴儿HIV感染早期诊断 EID 40 应用DNA PCR方法进行婴儿感染早期诊断 EID 1
14、 如果可以开展HIVDNA PCR检测 应用干血斑 DBS 在婴儿6周龄时进行PCR检测如果PCR检测结果阳性尽快再次采血再次进行DNA PCR检测如果第二次PCR检测结果阳性 婴儿确定感染HIV如果PCR检测结果阴性婴儿出生后3个月再次进行PCR检测 41 应用DNA PCR方法进行婴儿感染早期诊断 EID 2 出生后3个月再次进行HIVDNA PCR检测如果PCR检测结果阳性尽快再次采血再次进行DNA PCR检测如果第二次PCR检测结果阳性 婴儿确定感染HIV如果PCR检测结果阴性 婴儿视为未感染HIV考虑在婴儿满12月龄时进行HIV抗体检测 如有必要 在18月龄时再次进行检测 检测结果阴
15、性的婴儿接受母乳喂养 必须在停止母乳喂养后6周再次进行PCR检测 以确保婴儿没有在母乳喂养期间感染HIV 42 婴儿HIV感染早期诊断流程 43 HIV暴露婴儿 儿童的HIV抗体检测 所有HIV感染母亲所生儿童 在出生后6周或3个月未接受早期感染检测者 应进行HIV抗体检测 检测时间 满12月龄和满18月龄 必要时 见HIV抗体检测流程 出生后3个月 接受早期感染检测者 检测结果为阴性的儿童也应接受HIV抗体检测 满18月龄HIV抗体检测阳性 可确认儿童HIV感染 44 HIV暴露儿童HIV抗体检测流程 45 HIV感染的实验室监测 46 HIV感染的实验室监测 实验室监测主要用于 决定开始抗
16、病毒治疗还是预防性应用抗病毒药物是否有抗病毒治疗指征 效果监测抗病毒治疗有效吗 毒性监测抗病毒药物是否引起了其他问题 47 CD4 T淋巴细胞是HIV病毒攻击的靶细胞CD4 T淋巴细胞检测用于 决定开始抗病毒治疗还是预防性应用抗病毒药物为判断抗病毒治疗成功或失败提供定量依据对调整抗病毒治疗方案提供指导孕期每3个月及产后4 6周应进行CD4 T淋巴细胞检测急性感染时可适当推迟检测 因为在急性感染期 CD4 T淋巴细胞通常会下降 CD4 T淋巴细胞检测 48 病毒载量测量血浆中的病毒数量病毒载量检测可用于 是抗病毒治疗失败早期 最可靠的标记物监测对抗病毒治疗的反应诊断HIV感染后和孕晚期各进行一次病毒载量检测 病毒载量 RNA PCR 检测 49 HIV感染孕产妇常规实验室监测 1 50 HIV感染孕产妇常规实验室监测 2 51 HBV感染的检测 52 妊娠期HBV感染筛查 所有孕产妇均应在孕期尽早接受HBsAg检测筛查是否感染HBV如果分娩前尚未有检测结果 应在分娩前尽快进行检测如果HBsAg检测阳性 有条件可考虑进行其他HBV标记物检测 注意 暴露婴儿的处置不受母亲其他HBV标记物检测