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1、1 一 止血 凝血和纤溶机制二 血管壁检测三 血小板检测四 凝血因子检测五 抗凝物质检测六 纤溶活性检测七 检测项目的选择和应用 2 平衡 止凝血抗凝血 纤溶 失平衡 止凝血抗凝血 纤溶 血栓出血 一 止血 凝血和纤溶机制 血管壁止血机制血小板凝血机制抗凝机制纤溶机制 一 血管壁的止血作用 血管的收缩 释放血管紧张素及5 羟色胺血小板的激活 内皮下胶原暴露 释放血管性血友病因子 vWF 形成血小板血栓凝血系统的活化 启动内 外源凝血系统局部血粘度的增高 二 血小板止血 血小板粘附 血小板粘附于血管破损处 vW因子 vonwillebrandfactor vWF 介导血小板与暴露的血管内皮细胞下
2、胶原粘附血小板聚集 血小板与血小板 形成血小板栓子释放反应 释放ADP ATP 5 羟色胺等 加速聚集促凝血活性 加速凝血酶原的活性和凝血酶的形成血块收缩 血清析出 血栓更为牢固 三 凝血机制 内源性凝血途径外源性凝血途径凝血共同途径 7 8 参与因子筛选试验外源 Ca2 PT 血浆凝血酶原时间 内源 Ca2 APTT 活化的部分凝血活酶时间 共同 Ca2 TT 凝血酶时间 10 四 抗凝血机制 1 体液抗凝作用 主要为抗凝血酶 占总抗凝作用的50 67 可灭活凝血酶 因子 a a a a等 2 细胞抗凝作用 单核 吞噬系统与肝细胞吞噬清除凝血物质 凝血酶原激活物 免疫复合物等 11 五 纤维
3、蛋白溶解 纤溶 系统的作用 血液凝固 纤溶酶原激活物从血管内皮 肾小球释放入血 抗血小板聚集 抗凝血 纤维蛋白降解介产物 纤维蛋白原 纤溶酶 纤溶酶原 12 二 血管壁检测1 毛细血管抵抗力试验 原理 给毛细血管以负荷 检查一定范围内新出现的出血点数目来估计血管壁完整性及其脆性 参考值 5cm直径圆内 男性 5个 女性及儿童 10个 临床意义 血管壁结构和 或功能缺陷 如遗传性出血性毛细血管扩张症 过敏性紫癜 VC或VP缺乏等 血小板的量和 或质异常 原发性和继发性血小板减少或增多症 先天性和获得性血小板功能缺陷症 血管性血友病 vWD 等 13 二 血管壁检测2 出血时间测定 BT 原理 皮
4、肤刺破后 血液自然流出到停止时间 参考值 测定器法 6 9 2 1min 9min异常 临床意义 血小板明显减少 如原发性或继发性血小板减少性紫癜 血小板功能异常 如血小板无力症和巨大血小板综合征 严重缺乏某些凝血因子 如vWD DIC 血管异常 如遗传性出血性毛细血管扩张症 药物干扰 如服用乙酰水杨酸 双嘧达莫 潘生丁 等 14 二 血管壁检测 3 血管性血友病因子抗原 vonWillebrandfactorantigen vWF Ag 测定原理 免疫火箭电泳法 含vWF抗体的琼脂凝胶板 受检血浆电泳 抗原 抗体反应形成的火箭样沉淀线参考值 94 1 32 50 临床意义 减低 vWD 是诊
5、断vWD及其分型的指标之一 增高 血栓性疾病 如心肌梗塞 心绞痛 脑血管病变 糖尿病 妊高征 肾小球疾病 大手术后等 15 三 血小板检测1 血小板计数 采用镜下目视法或自动化血细胞分析仪 参考值 100 300 109 L临床意义减少 PC生成障碍 再障 放射性损伤 急性白血病 巨幼细胞贫血 骨髓纤维化晚期等 PC破坏或消耗 血小板减少性紫癜 SLE 淋巴瘤 上呼吸道感染 风疹 DIC 血小板减少症 新生儿 输血后 先天性 PC分布异常 脾肿大 血液被稀释等 增多 原发性增多 骨髓增生性疾病 反应性增多 急性感染 急性溶血 某些癌症患者 16 三 血小板检测2 血小板平均容积和分布宽度测定
6、MPV PDW可用血细胞分析仪检测 原理 MPV PDW表明血液中血小板大小的离散度 参考值 MPV7 11flPDW15 17 临床意义 MPV a Plt破坏增加而代偿功能良好 b 造血功能抑制解除后MPV 是造血功能恢复的主要表现 MPV a 骨髓造血功能不良 血小板生成 白血病患者半数MPV b MPV随血小板数而持续 是骨髓造血功能衰竭的指标之一 PDW 表明均一性高 反之血小板大小悬殊 17 三 血小板检测3 血小板相关免疫球蛋白 PAIg 测定 原理 ELISA参考值 PAIgG0 78 8ng 107PLTPAIgA0 2 0ng 107PLTPAIgM0 7 0ng 107P
7、LT临床意义90 特发性血小板减少性紫癜PAIgG增高 SLE等也为阳性 激素治疗的ITPPAIgG降低 复发时升高 免疫性血小板减少性紫癜 恶性淋巴瘤 慢活肝 慢淋 MM Evan综合征等也增高 18 三 血小板检测4 血小板粘附试验 PAdT 原理 受检血液以一定速度通过含一定量玻璃珠的玻璃柱 供血小板吸附 充分接触一定时间后 检测吸附前后血小板数的差 计算黏附率 参考值 62 5 8 61 临床意义 黏附率增高 血栓前状态和血栓性疾病 黏附率减低 血管性血友病 血小板无力症 尿毒症 骨髓增生异常综合征 急性白血病和SLE等 19 三 血小板检测5 血小板聚集试验 PAgT 原理 血小板聚
8、集是指血小板之间互相黏附 也是血小板的一种重要的止血功能 参考值 各实验室制定临床意义 增高 血小板粘附 聚集功能增强 血小板被激活及其释放反应亢进 见于血栓前状态和血栓性疾病 如心肌梗塞 糖尿病 脑血管病变 深静脉血栓形成 肺梗塞 口服避孕药 晚期妊娠 高脂血症 抗原 抗体复合物反应 人工心脏和瓣膜移植术等 减低 血小板无力症 尿毒症 肝硬化 骨髓增生性疾病 特发性血小板减少性紫癜 急性白血病 服用抗血小板药物 低 无 纤维蛋白原血症等 20 三 血小板检测6 血块收缩试验 CRT 参考值 血块收缩率48 64 临床意义减低 特发性血小板减少性紫癜 血小板增多症 血小板无力症 红细胞增多症
9、低 无 纤维蛋白原血症 多发性骨髓瘤 原发性巨球蛋白血症等 增高 先天性和获得性因子 缺乏症等 21 四 凝血因子检测 1 2个传统试验 1 凝血时间测定 离体血液接触玻璃试管后凝固的时间 6 12min 反映内源性凝血途径 2 凝血酶原时间测定 给待检血浆中加入Ca 和兔脑粉 组织因子 组织凝血活酶 后 观察血浆的凝固时间 11 13s 反映外源性凝血途径 22 四 凝血因子检测2 活化部分凝血活酶时间 APTT 原理 在37 下 用接触因子活化剂激活 内源性凝血途径启动 以脑磷脂 部分凝血活酶 代替血小板3因子 PF3提供磷脂表面 有利于凝血因子相互作用 在Ca 的参与下 观察凝血所用的时
10、间 由于磷脂仅是凝血活酶的一部分 所以称部分凝血活酶试验 本试验是反映内源性凝血途径各因子凝血状况的筛选试验 23 四 凝血因子检测2 活化部分凝血活酶时间 APTT 参考值 32 43秒 较对照延长10秒以上为异常 临床意义延长 因子 明显减少 如A B型血友病 因子 缺乏症 凝血酶原重度减少 如严重的肝损伤等 纤维蛋白原严重减少 如纤维蛋白原缺乏症 严重肝损伤等 应用肝素 口服抗凝药时 纤溶亢进使纤维蛋白原降解增加时 循环抗凝物质增加 如类肝素物质增多等 缩短 高凝状态 24 四 凝血因子检测3 血浆凝血酶原时间 PT 原理 在被检血清中加入兔脑粉 因子 即组织因子 和Ca 后 观察血浆凝
11、固所需的时间 反映外源性凝血途径 参考值PT11 13秒超过正常对照值3秒以上为异常 临床意义PT延长 先天性凝血因子I V 缺乏 后天性凝血因子缺乏 如严重肝病 维生素K缺乏 纤溶亢进 DIC 口服抗凝剂 异常凝血酶原增加等 PT缩短 血液高凝状态如DIC早期 心肌梗塞 脑血栓形成 深静脉血栓形成 多发性骨髓瘤等 25 四 凝血因子检测4 血浆纤维蛋白原测定 原理 在受检血浆中加人一定量凝血酶 后者使血浆中的纤维蛋白原 fibrinogen Fg 转变为纤维蛋白 通过比浊原理计算Fg的含量 参考值 2 4g L临床意义 增高 糖尿病 急性心肌梗塞 急性感染 结缔组织病 急性肾炎 灼伤 多发性
12、骨髓瘤 休克 大手术后 妊高征 急性感染 恶性肿瘤等以及血栓前状态 减低 DIC 原发性纤溶症 重症肝炎和肝硬化等 26 五 抗凝物质检测1 血浆抗凝血酶 活性 AT A 原理 抗凝血酶 是血液抗凝系统的重要成分之一 可以对抗凝血酶和多种凝血因子的活性 生理作用是防止凝血过度 血栓形成 本试验有助于了解抗凝系统的机能状态 参考值 108 5 5 3 临床意义 增高 见于血友病 白血病和再障等的急性出血期以及口服抗凝药物治疗过程中 减低 见于先天性和获得性AT 缺乏症 后者见于血栓前状态 血栓性疾病 DIC和肝脏疾病等 27 五 抗凝物质检测2 血浆蛋白C抗原 PC Ag 检测 原理 蛋白C系统
13、是人体的重要抗凝系统之一 主要由血浆蛋白C PC PS 活化蛋白C抑制物 APCI 和血栓调节素 TM 组成 PC是该系统的重要组成之一 是体内重要的抗凝因子 占全血抗凝活力的20 30 在体外只要达到0 2 g mL即可引起明显的抗凝效应 PC具有抗凝血 促进纤维蛋白溶解的作用 它的变化直接影响凝血 抗凝血机制的平衡 参考值 102 5 20 1 临床意义 减低 先天性或获得性PC缺乏症 后者见于DIC 肝病 手术后 口服抗凝剂 急性呼吸窘迫综合征 28 五 抗凝物质检测3 血浆肝素定量测定 肝素主要由肥大细胞 嗜碱粒细胞合成 主要作用是增强抗凝血酶 的活性 参考值 正常未使用肝素 0IU
14、ml 临床意义 使用肝素抗凝时 血浆肝素浓度以0 2 0 5IU ml为宜 治疗有效而临床又很少发生出血 29 六 纤溶活性检测1 血浆纤维蛋白 原 降解产物 FDP 原理 纤维蛋白原和纤维蛋白受到纤溶酶作用后 形成多种肽链碎片 统称纤维蛋白 原 降解产物 FDP 参考值 胶乳凝集法 5mg L临床意义 增高是体内纤溶亢进的标志 但不能鉴别原发与继发 包括原发性纤溶症 DIC 恶性肿瘤 急性早幼粒细胞白血病 肺梗塞 深静脉血栓 肾脏疾病 肝脏疾病 器官移植的排斥反应 溶栓治疗等 30 六 纤溶活性检测2 血浆D 二聚体 D dimer DD 原理 在继发纤溶时 纤维蛋白 不是纤维蛋白原 被纤溶
15、酶水解 产生D 二聚体等 D 二聚体是继发性纤溶的标志 参考值 胶乳凝集法为阴性 ELISA 200 g L临床意义 继发性纤溶症 如DIC 为阳性或增高 原发性纤溶症为阴性或不升高 两者鉴别的重要指标 31 六 纤溶活性检测3 血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验 plasmaprotamineparacoagulationtest 3P试验 原理 凝血与纤维蛋白降解过程中形成的可溶性纤维蛋白单体复合物 SFMC 不被凝血酶所凝固 但其中的纤维蛋白单体 SFM 却能被硫酸鱼精蛋白沉析出来 形成纤维蛋白样的副凝块 这种不需凝血酶的 凝结 现象叫副凝现象 阳性反映血液内有微量凝血酶 进而生成SFM 又是血
16、管内纤维蛋白溶解的标志 结果正常人阴性临床意义 阳性 DIC的早 中期 阴性 正常人 晚期DIC和原发性纤溶症 也有假阴性 32 33 七 检测项目的选择和应用 自学 1 筛选试验的选择和应用一期止血缺陷 血管壁和血小板异常的出血 BT和PC都正常 过敏 单纯性和其他血管性紫癜等 BT PC 原发性或继发性血小板减少性紫癜 BT PC 原发性或继发性血小板增多症 BT PC正常 血小板无力症 贮藏池病以及低 无 纤维蛋白原血症 血管性血友病 vWD 等 34 七 检测项目的选择和应用 二期止血缺陷 凝血因子缺乏和抗凝物增多的出血 APTT和PT正常 遗传性和获得性因子 缺乏症 获得性因子 缺乏症常由严重肝病 肝脏肿瘤 恶性淋巴瘤 白血病 因子 抗体 AIHA和恶性贫血等 APTT PT正常 血友病A 血友病B 因子 缺乏症 血循环中有凝血因子 如因子 抗体存在 DIC时可见因子 因子 和 减低 肝脏疾病时可见因子 和Xll减少 APTT正常 PT 遗传性和获得性因子 缺乏症 APTT和PT 遗传性和获得性因子X 凝血酶原和纤维蛋白原缺乏症 用肝素治疗时 APTT也相应延长 应用口服抗凝
