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1、艾滋病检测实验室生物安全防护及职业暴露后预防 范围 适用于全国各级各类艾滋病实验室的安全防护和职业暴露预防 规范性引用文件 医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则 试行 中华人民共和国卫生部 2004年5月31日颁布 2004年6月1日起实施 实验室生物安全通用要求 GB19489 2008 2009年7月1日起实施 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 WS233 2002 中华人民共和国卫生行业标准 2002 12 03发布 2003 08 01实施 GuidelinesfortheSafeTransportofInfectiousSubstancesandDiagnosticSpe
2、cimens WHO1997 消毒技术规范 2002年版 中华人民共和国卫生部2002 11 15发布 2003 04 01起实施 HIV的生物危害 病原微生物实验室生物安全管理条例 2004 11 12 将病原微生物分为四类 其中第一类 第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物 人间传染的病原微生物名录 2006 1 11 人类免疫缺陷病毒 HIV 属第二类病原微生物 是高致病性病原微生物 HIV相关检测的生物安全级别HIV抗体检测 包括筛查和确证实验 抗原检测和相关的免疫学检测应在符合 级生物安全实验室 BSL 2 要求的艾滋病检测实验室中进行 HIV核酸提取和检测均应在符合 级生物安全实
3、验室 BSL 2 要求的艾滋病检测实验室中进行 HIV分离培养 浓缩 中和试验 细胞培养及研究工作及其它需要应用活病毒的研究工作 应在 级生物安全实验室 BSL 3 中进行 HIV病毒株应保存在符合 级生物安全实验室 BSL 3 要求的艾滋病实验室 HIV阳性样品 包括全血 血清 血桨和其他组织 液 核酸提取物应保存在符合BSL 2要求的艾滋病实验室 生物安全保证措施 一 建立安全制度实验室主任是实验室安全的第一责任人 对实验室工作和环境的安全负责 负责制定全面的实验室安全管理制度并监督落实 所有工作人员都应无条件遵守实验室安全管理制度 保护自己和他人的安全 艾滋病检测实验室应建立下列安全制度
4、 每年都应对安全制度或安全标准操作程序及其落实情况进行检查和修订 并有记录 1实验室的安全工作制度或安全标准操作程序 S SOP 2意外事故处理预案 主要是生物安全意外事故 内容包括应急处理 登记和报告 调查和处理 3信息安全及保密制度 与HIV AIDS检测相关的所有资料均应严格保密 包括送检单 检测记录 样品登记 报告单及工作人员年度检测结果等 不得对无关人员透露检测结果 二 培训和管理1实验室应进行全员安全培训并强化 普遍性防护原则 安全意识 所有的血液 未固定的组织和组织液样品 均应视为有潜在的传染性 都应以安全的方式进行操作 所有管理和检测人员都应接受省级以上艾滋病检测实验室主持的安
5、全培训 包括上岗前培训和复训 并接受管理人员的监督 2必须对新上岗人员进行安全教育和培训 使他们清楚实验室工作的潜在危险 通过考核等方式确认他们具备安全操作的能力后方可单独工作 3必须对新调入人员 外来合作 进修和学习的人员进行生物安全培训 经实验室主任批准后 方可进入实验室 4生物安全培训和监督应有客观详实的记录 5实验室主任应详细了解所有工作人员的教育和培训背景 特长 性格特点等 要根据人员特点 工作种类 所涉及的生物材料合理安排工作区域 要定期对实验室环境进行安全检查 三 个人保健和防护1遇有手部皮肤有开放性伤口及其他不适于工作的情况 应暂停工作 2皮肤的微小伤口 擦伤 皲裂等 应用防水
6、敷料严密覆盖 3应为每一名在艾滋病实验室工作的人员提供充足的防护服 一次性乳胶手套 口罩 帽子和覆盖足背的工作鞋 应将清洁的防护服和其他个人防护用品置于实验室清洁区内的专用处存放 4实验室应设置应急冲洗眼睛装置 5工作人员上岗前必须进行HIV抗体和乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒等肝炎病毒标志物检测 应接种乙肝疫苗 应每年对工作人员采血检测HIV抗体 血清应长期保留 6进实验室工作前要摘除首饰 修剪长的带刺的指甲 以免刺破手套 7严禁在实验室内进食 饮水 吸烟和化妆 8实验操作时应穿合适防护服 白大衣 隔离衣或一次性工作服 戴手套和口罩 穿实验室专用的工作鞋 如接触物的传染性大 应戴双层手套 含有H
7、IV的液体 样品或病毒培养液 有可能喷溅时 应戴防护眼镜 穿防水 如塑料 围裙 工作完毕 先脱去手套 再脱去防护服 用肥皂和流动水洗手 穿过的污染的防护服应及时放入污物袋中 消毒后方可洗涤或废弃 操作过程中 如发现防护服被污染应立即更换 如手套破损 应立即丢弃 洗手并换上新手套 不能用戴手套的手触摸暴露的皮肤 口唇 眼睛 耳朵和头发等 不要将手套清洗或消毒后再次使用 因为使用表面活性剂清洗可使手套对水的通透性增加 消毒剂可以引起手套的破损 9禁止使用口腔吸液管 必须使用移液器来操作实验的所有液体 四 安全操作1试剂及样品的管理应严格按要求妥善保存血清及其它体液样品 应按有关规定设立专门储存阳性
8、血清 质控品的血清库和 或毒种库 应上锁并指定专人管理 对存放试剂和有毒有害物质的区域应进行监控 冷藏柜 冰箱 培养箱和存放生物试剂 化学危险品 放射性物质的容器 置于工作人员视线之外的地点时应上锁 2实验室的清洁和消毒工作完毕应对工作台面消毒 推荐用0 1 0 2 的次氯酸溶液消毒 用消毒液清洗后要干燥20min以上 操作过程中如有样品 检测试剂外溅 应及时消毒 如有大量高浓度的传染性液体溅出 在清洁之前应先用1 的次氯酸钠溶液浸泡 然后戴上手套擦净 3样品的采集和处理抽取静脉血液 或以其它方式收集血液样品 时要注意安全 应使用一次性注射器 戴手套 谨慎操作 防止血液污染双手 应小心防止被针
9、头和其它利器刺伤 如用滤纸采样 应按常规将手指或耳垂局部消毒 刺破皮肤后 迅速把滤纸沾上 切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染 采血后待血样干燥后再包装送检 离心样品时要使用密闭的罐和密封头 防止离心时液体溢出或在超 高速离心时形成气溶胶 五 样品的带入 带出和操作1不得将非实验室物品带入实验室 2包装有测试样品的包裹应在实验室的安全柜内打开 不能在收发地点或仓库等地点打开 同时 打开包裹的人员应接受过处理感染源方面的训练并穿戴合适的防护服 实验室应具有处理感染源的设备并准备好可消毒的容器 3打开样品容器时要小心 防止内容物泼溅 要核对样品与送检单 检查样品管有无破损和溢漏 如发现溢漏应立即将
10、尚存留的样品移出 对样品管和盛器进行消毒 同时要按照程序报告有关负责人 4要检查样品的状况 记录有无严重溶血 微生物污染 血脂过多以及黄疸等情况 如污染过重或者认为不能接受 则应将样品用安全方式废弃 同时将情况通知送样人 5常规处理血液 体液样品可在工作台上进行 如样品有可能溅出 则应戴手套 口罩和防护眼镜 在生物安全柜中操作 6将样品转送到其他实验室时 应防止对工作人员 患者或环境造成污染 护送样品的人应清楚接收地点和接收人 实验室负责人或其指定的人员应及时确认样品已送达指定的实验室 被转入安全位置并得到妥善处理 7被污染或可能污染的材料在带出实验室前应进行消毒 用后的包裹应进行消毒 8用于
11、国际空运的样品要按照国际空运协会 IATA 的规则进行包装和标记 并提交相应的资料 六 使用利器注意事项1应尽量避免在实验室使用针头 刀片 玻璃器皿等利器 以防刺伤 如果必须使用 在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或划伤 并应对用过的物品进行消毒 2应使用安全针具采血 如蝶形真空针 自毁性针具等 以降低直接接触血液和刺伤的危险性 3应将用过的锐器直接放入耐穿 防渗漏的利器盒 用过的针头应直接放入坚固的容器内 消毒后废弃4禁止将使用后的一次性针头重新套上针头套 禁止用手直接接触使用过的针头 刀片等利器 七 污染物处理1应按照 实验室生物安全通用要求 GB19489 2004 和 消毒技术规范 20
12、02年版 处置实验室废弃物 2艾滋病实验室产生的所有废弃物 包括不再需要的样品 培养物和其它物品 均应视为感染性废弃物 应置于专用的密封防漏容器中 安全运至消毒室 经高压消毒后再进行处理或废弃 3艾滋病检测实验室常用的消毒方法3 1物理消毒方法 1 高压蒸汽消毒 121 保持15 20min 2 干燥空气烘箱消毒 干烤消毒 140 保持2 3h 3 2化学消毒方法 1 含氯消毒剂 次氯酸钠 含有效氯2000 5000mg L 2 75 乙醇 3 2 戊二醛 各种化学品对HIV灭活的作用 名称时间0 5 次氯酸钠1min 70 酒精1min 0 5 NP401min 0 08 氯化胺10min
13、40 福儿马林溶液至少4hr 5ml 10ml水 最好过夜 3 3艾滋病检测实验室物品常用的消毒方法 1 废弃物缸 5000mg L次氯酸钠 2 生物安全柜工作台面和仪器表面 75 乙醇 3 溢出物 5000mg L次氯酸钠 4 污染的台面和器具 2000mg L次氯酸钠 也以用过氧化氢或过氧乙酸 器械可用2 戊二醛消毒 八 意外事故处理发生意外事故时 应针对事故的类型立即进行紧急处理 主要包括 1皮肤针刺伤或切割伤 应立即用肥皂和大量流水冲洗 尽可能挤出损伤处的血液 用70 乙醇或其它消毒剂消毒伤口 2皮肤污染 用水和肥皂冲洗污染部位 并用适当的消毒剂浸泡 如70 乙醇或其它皮肤消毒剂 3粘
14、膜污染 用大量流水或生理盐水冲洗污染部位 4衣物污染 尽快脱掉污染的衣物 进行消毒处理 5污染物泼溅 小范围污染物泼溅 应立即进行消毒处理和清洗 发生大范围污染物泼溅事故时 应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场 查清情况 确定消毒的程序 6发生空气污染时 可采用低温蒸汽甲醛气体对空气进行消毒 但甲醛有致癌作用 不宜用于生物安全柜和实验室的常规空气消毒 7如果发生重大泼溅事故 应采取以下措施进行 1 从污染处疏散人员 但要防止污染扩散 2 控制污染扩散 锁门并禁止人员进入 3 通知实验室主管领导 安全负责人等 查清情况 确定消毒处理的程序 4 必要时可进行生物安全柜和 或实验室的低温
15、蒸汽甲醛气体消毒 使用这种方法生物安全柜和 或实验室必须密闭 人员必须离开 具体操作可按说明书执行 5 溢漏处可用经消毒剂浸泡的吸水物质覆盖 消毒剂作用10 15分钟后 移走吸水性物质 用消毒剂冲洗 用水清洗 九 意外及事故的登记 报告和检测1对重大意外和事故必须进行登记 对职业暴露事故应填写 艾滋病职业暴露人员个案登记表 附表9 内容包括 1 意外和事故发生的时间 地点及详细经过 详细记录职业暴露发生的时间 地点及经过 暴露方式 损伤的具体部位 程度 暴露物种类 培养液 血液或其它体液 和含有HIV的情况 2 事故处理方法和经过 包括专家或领导赴现场指导和处理的情况 处理方法及经过 是否采用
16、暴露后预防药物 详细记录用药情况 首次用药时间 暴露后几小时或几天 药物毒副作用情况 包括肝肾功能化验结果 用药的依从性 3 随访和检测的日期 项目和结果 2对重大意外和事故必须进行报告和检测 1 发生重大事故时 在紧急处理的同时要立即向主管领导和专家报告 同时抽血检测HIV抗体 暴露后4周 8周 12周 6个月要定期检测 2 发生小型事故时可在紧急处理后立即将事故情况和处理方法报告主管领导和专家 职业暴露后预防 职业暴露定义 职业暴露指医务人员从事诊疗 护理 检验等工作过程中意外被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人的血液 体液污染了皮肤或者粘膜 或者被含有艾滋病病毒的血液 体液污染了的针头及其他锐器刺破皮肤 有可能被艾滋病病毒感染的情况 职业暴露也包括其他行业的工作人员 如警察 公安 司法等部门的工作人员 羁押或劳教机构 戒毒所和殡葬业的工作人员 在工作过程中被艾滋病病毒感染者或艾滋病病人的血液 体液污染皮肤 粘膜或者刺破皮肤等情况 职业暴露发生后 通常应遵循四条原则 及时处理原则 报告原则 保密原则 知情同意原则 发生职业暴露以后 可以服用抗病毒药物 进行暴露后预防 艾滋病的职业暴露后
