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1、实验四球菌 引起人类化脓性感染的主要细菌 又称化脓性球菌常见有 葡萄球菌属链球菌属肠球菌属奈瑟菌属 菌种 葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌链球菌属 甲型溶血型链球菌 乙型溶血性链球菌 肺炎链球菌奈瑟氏菌属 微黄奈瑟氏菌肠球菌属 葡萄球菌属 菌种 金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌 实验目的 掌握葡萄球菌属的分离培养方法与鉴定方法掌握葡萄球菌属的菌落特点菌体形态及染色性 实验内容 细菌菌落形态及色素的观察做GS染色 镜下形态的观察接种血平板 观察细菌的生长表现 色素及溶血生化反应 1 触酶试验2 血浆凝固酶试验3 甘露醇试验 实验器材 菌种 血平板 血浆 3 H2O2
2、甘露醇培养基 滤纸片 玻片 擦镜纸 吸水纸 污物缸等 细菌菌落形态及色素的观察 单个菌落为中等大小 圆形 表面光滑 边缘整齐 不透明 产脂溶性色素 金黄色葡萄球菌呈金黄色菌落 有 溶血环 葡萄球菌镜下形态的观察 革兰阳性 无芽胞无鞭毛 葡萄堆状排列 生化反应 触酶试验 原理 某些细菌能产生过氧化氢酶 将对细菌有害的H2O2分解成H2O O2方法 在洁净载玻片上 滴加3 H2O2溶液1 2d 用接种环挑取普通琼脂上的菌落 观察结果 结果 产生大量气泡者 不产生气泡者 鉴别 葡萄球菌 链球菌 血浆凝固酶试验 原理 金黄色葡萄球菌能产生血浆凝固酶 可使血浆中可溶性的纤维蛋白原变为不溶性的纤维蛋白 结
3、合型血浆凝固酶附着于细菌表面 在玻片上形成凝块 游离型的血浆凝固酶则可使试管中的血浆发生凝固 试管法37 孵育0 5h 方法 玻片法 对照区试验区 生理盐水血浆细菌细菌 结果 出现凝集现象者为阳性 鉴别 金 表 腐 甘露醇发酵试验 原理 致病性葡萄球菌多能发酵甘露醇产酸 使培养基由紫色变为黄色方法 将3种细菌分别接种于甘露醇发酵管 35 孵育18 24h 观察结果 结果判断 培养基浑浊 由紫色变为黄色 仍为紫色 鉴别 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 思考题 为什么甘露醇试验阳性是黄色 链球菌属 菌种 甲型溶血型链球菌乙型溶血型链球菌肺炎链球菌 实验目的 掌握链球菌属的分离培养与鉴定
4、方法掌握链球菌的菌落特点 菌体形态及染色性 实验器材 菌种 GS染液 血平板 菊糖发酵管 10 去氧胆酸钠溶液 optochin药敏纸片 杆菌肽药敏纸片 小鼠 1ml注射器 剪刀镊子 滤纸片 玻片 吸水纸 擦镜纸 牛皮纸 棉签等 实验内容 细菌菌落形态及溶血的观察做GS染色 镜下形态的观察生化反应试验 1 杆菌肽敏感试验2 CAMP试验3 Optochin试验4 胆汁溶菌试验5 菊糖发酵试验6 小白鼠毒力试验 细菌菌落形态及溶血的观察1 灰白色 圆形凸起 表面光滑 边缘整齐的针尖样大小菌落 菌落周围出现不同的溶血2 根据血平板上的溶血情况分 甲型 草绿色溶血环 丙型 无溶血环 乙型 透明溶血环
5、 细菌镜下形态观察 革兰阳性球菌 圆形或卵圆形 成双或呈链状排列 肺炎链球菌成双排列 细菌形似矛头 周围有空晕 此为荚膜 生化反应 1 杆菌肽敏感试验 原理 A群化脓性链球菌对杆菌肽几乎100 敏感 而其他链球菌对杆菌肽通常耐药 故此试验可对A群化脓性链球菌进行鉴别 方法 挑取被检的链球菌菌落 密集涂布于血琼脂平板上 将杆菌肽纸片贴于血琼脂平板上 35 孵育18 24h观察结果 培养不需要放CO2 结果 在杆菌肽纸片周围出现抑菌环为敏感 A群 其他群链球菌 2 CAMP试验 原理 B群溶血性链球菌能产生 CAMP 因子 该物质可促进金黄色葡萄球菌 溶血素的活性 故在血琼脂平板上两种细菌交界处溶
6、血能力增强 形成箭头状透明那个溶血区 方法 在血平板上 用金葡菌划种一条横线 再将被检菌距金葡菌接种线3mm处呈直角接种一短线 35 培18 24h观察结果 结果 如图 3 Optochin敏感试验 原理 Optochin 乙基氢化羟基奎宁 能干扰肺炎链球菌叶酸合成 抑制该菌的生长 故肺炎链球菌对Optochin敏感 而其它链球菌对其耐药 方法 挑取待检菌密集划线接种于血琼脂平板上 贴放Optochin纸片 35 孵育18 24h 观察抑菌环 结果 抑菌圈直径 14mm为敏感 肺炎链球菌 抑菌圈直径 14mm时 参照胆汁溶菌试验判断是肺炎链球菌还是甲型溶血性链球菌 4 胆汁溶菌试验原理 胆汁或
7、胆盐能活化肺炎链球菌的自溶酶 促进细菌细胞膜破损或菌体裂解而自溶 方法 平板法 在血琼脂平板上选择出待检的呈草绿色溶血的菌落 观察记录菌落特点 然后于菌落上滴1滴100g L去氧胆酸钠溶液 35 孵育15 30min观察结果 结果 菌落消失为阳性 菌落不消失为阴性 肺炎链球菌 甲型链球菌 5 菊糖发酵试验 原理 各种细菌含有分解不同糖 醇 苷 类的酶 因而对各种糖 醇 苷 类的代谢能力也各不相同 即使能分解某种糖 醇 苷 类 其代谢产物可因菌种而异 检查细菌对培养基中所含糖 醇 苷 降解后产酸或产酸产气的能力 可用以鉴定细菌种类 方法 将待检的细菌分别接种到菊糖培养基中 置35 5 CO2条件
8、下 孵育18 24h观察结果 结果 能分解糖 醇 苷 产酸的细菌 培养基中的指示剂呈酸性反应 如酚红变为黄色 不分解糖则无变化 肺炎链球菌 甲型链球菌 6 小白鼠毒力试验 原理 小白鼠对肺炎链球菌十分敏感 少量有荚膜的肺炎链球菌可使小白鼠感染致死 方法 将平板上的肺炎链球菌用无菌生理盐水洗下 取0 1ml注射于小白鼠腹腔 饲养1 2d 观察小白鼠情况 结果 若小白鼠在1 2d内死亡为阳性 解剖腹膜印片 革兰染色法镜检可见革兰阳性 有荚膜的双球菌 奈瑟氏菌属 菌种 微黄奈瑟菌 代替脑膜炎奈瑟菌 实验目的 掌握脑膜炎奈瑟菌的形态和培养特性 实验内容 1 培养特性和菌落观察 营养要求高 接种血平板或
9、巧克力平板 置35 5 CO2条件下 孵育18 24h观察结果 可见圆形突起 光滑湿润 无色透明 边缘整齐 似露滴状 直径为2 3mm 2 GS染色 形态观察 G 双球菌 肾形 成双排列 凹面相对 3 生化反应 氧化酶试验 4 淋病奈瑟菌示教片 实验器材 菌种 氧化酶试剂 滤纸片等 氧化酶试验 原理 某些细菌具有氧化酶 能将盐酸二甲基对苯二胺或 盐酸四甲基对苯二胺 氧化成紫红色 蓝色 的醌类化合物 方法 用滤纸条蘸取被检菌落少许 用滴管吸取氧化酶试剂 滴加于滤纸条菌落上 观察颜色变化 结果 阳性者立刻出现红色 蓝色 继而逐渐加深 阴性不变色 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌示教 革兰染色阴性 肾形双球菌 无芽胞无鞭毛 总结 球菌的鉴定程序 后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用 主要经营 网络软件设计 图文设计制作 发布广告等公司秉着以优质的服务对待每一位客户 做到让客户满意 致力于数据挖掘 合同简历 论文写作 PPT设计 计划书 策划案 学习课件 各类模板等方方面面 打造全网一站式需求 感谢您的观看和下载 Theusercandemonstrateonaprojectororcomputer orprintthepresentationandmakeitintoafilmtobeusedinawiderfield
