《Waters LC-MS培训讲义》由会员分享，可在线阅读，更多相关《Waters LC-MS培训讲义（70页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、Quattro LC Micro 液质联用培训讲义 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 内容 仪器质量校正仪器质量校正 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 定量实验定量实验 维护及故障排除维护及故障排除 常用备件号常用备件号 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 1 注射泵注入校正溶液 以碘化钠铯 异丙醇 水 1 1 NaI 2ug L CsI 50ng L 溶液为例 流速5ul min 在质谱调机页面 MS Tune 监看四个扫描质量 172 9 622 6 1072 2 1971
2、6 确认讯号良好及注射针内样品量充足 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 ESI 参数设置 参数设置确保校正样品最大质谱信号响应 Capillary kV 3 5 Cone V 30 Extractor V 3 RF lens V 0 3 Source Temp100 Desolvation Temp200 Gas Flow Desolvation350 Gas Flow Cone50 2005 Waters Corpora
3、tion Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 2 在质量分析器页面 Analyzer 设定以下的数值 括 号内的数值即为设定值 LM Resolution 1 15 0 HM Resolution 1 15 0 Ion Energy 1 0 5 Entrance 50 Collision 2 Exit 50 LM Resolution 2 15 0 HM Resolution 2 15 0 Ion Energy 2 0 5 此为第一段和第二段扫描模式参数 这是因为在进行质量 校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式 静 态扫描 动态扫描 扫描速率补偿 的缘故 2005
4、 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 3 在质谱调机页面 MS Tune 选择校正仪器以开启 的质量校正页面 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 4 开启质量校正页面后 质量校正前请先确定目前仪器处 于未校正的状态 所有六种校正都为未校正 No Calibration 若不然则开启一个未校正 Uncal cal 的 档案 2005 Waters Corporation
5、 Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 5 从下拉式选单选择适当的参考档案 如以碘化钠铯 从 下拉式选单选择适当的参考档案 如以碘化钠铯校正质 量范围两千以内可选择 Naics2 确认后按开始键 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 6 按开始键后会跳出自动校正选单 请勾选所有种类 Type 处理程序部分选择讯号采集和校正 Acquire Calibrate 可勾选打 印报告 Print Report 勾选完成后点压采集参数 Acquisition Parameters 注意 在设定采集参数前请不要按 OK键
6、2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 static calibration静态精确校正 使四极杆质量分析器准 确地 停 在指定的质荷比上 如 Tuning SIR MRM scanning calibration 扫描校正 能确保所采集到的质谱 峰进行准确质量测量 如在全扫描方式 scan speed compensation扫描速度补偿 当仪器进行 快速扫描时 对系统进行 延时 补偿校正 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 7 设定采集参数 选择适当的校正质量
7、范 围 校正大范围的全质 量从22校正到2000 其 余的参数可以使用预设 参数default即可 设定 完后按OK键 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 8 按OK键后会跳出步骤6的自动校正选单 此时 按此页面OK键就会开始进行质量校正 9 当所有的校正都完成后 将校正的结果储存起 来 从质量校正页面的档案 File 选取另存新 档 Save As 输入所欲储存之文件名称后按 OK即可 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 2005 Waters Corpor
8、ation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 10 输入所欲储存之文件名称后按存盘即可 确认所 有的扫描模式都已经被校正 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 仪器质量校正仪器质量校正 11 根据实验要求 分别按上述步骤实验LM HM 15 LM HM 14 LM HM 13三条校正曲线 用途 根据实验需求分别调用不同分辨率的校正曲线 用途 根据实验需求分别调用不同分辨率的校正曲线 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 实验要点 通过调谐仪器各项参数 不同
9、化合物ESI APCI的响应 毛细管电压 锥 孔电压 RF lens 离子能量 去溶剂化气温度 去溶剂化气流量 反吹气流量等参 数 找出目标化合物最佳响应参数 发挥最佳仪器检测灵敏度 1 全扫描 full scan MS1 MS2 Collision Cell MS1 MS2 Collision Cell Scanning m z M RF onlyScanning m z M RF only 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 样品 利血平标样 调谐最佳实验锥孔cone voltage CV 毛细管电压 RF l
10、ens 离子能量等参数 进行全扫描获最大分子离子峰609 样品 利血平1ppm 乙腈 水 1 1配置 ESI scan 609 CV 45 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 2 子离子扫描 daughter scan MS1 MS2 Collision Cell MS1 MS2 Collision Cell Static m z 609 1 ScanningStatic m z 609 1 Scan
11、ning Argon gasArgon gas PrecursorPrecursor ProductsProducts 利血平标样 根据全扫描获得最佳实验锥孔CV 毛细管电压 RF lens 离子能量等参数 调谐碰撞能量collision energy CE 碰撞压力 进行 子离子扫描实验准备 Daughter scan 609 195 448 397 174 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 碰撞压力 3 10 3mbar 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验
12、调谐仪器定性实验 调谐仪器 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 3 多反应监控MRM MS1MS2 Collision Cell MS1MS2 Collision Cell Static m z 609 1 Static m z 195 1Static m z 195 1 Argon gasArgon gasArgon gasArgon gas PrecursorsPrecursors ProductProduct 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性
13、实验 调谐仪器 样品1 利血平标样1ppm 根据全扫描获得最佳实验锥孔 CV 调谐特定碎片最佳实验碰撞能量 CE 进行 多反应监控MRM实验准备 ESI MRM 609 195 CV 45 CE 55 样品2 对羟基苯甲酸甲酯 对羟基苯甲酸乙酯 对羟基苯甲 酸丁酯1ppm实验 调谐最佳实验锥孔电压 CV 碰撞 能量 CE ESI 对羟基苯甲酸甲酯MRM 151 136 92 CV 30 CE 15 CE 20 对羟基苯甲酸丙酯MRM 179 136 92 CV 30 CE 15 CE 20 对羟基苯甲酸丁酯MRM 193 136 92 CV 30 CE 18 CE 25 2005 Waters
14、 Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 4 母离子扫描 MS1 MS2 Collision Cell ScanningStatic m z 92 Argon gasArgon gas Precursor Precursor Products Products 样品 对羟基苯甲酸甲酯 对羟基苯甲酸丙酯 对羟基苯甲酸丁酯实验 与氨基酸混合液 调谐最佳实验锥孔电压 CV 碰撞能量 CE 对羟基苯甲酸甲 酯 对羟基苯甲酸乙酯 对羟基苯甲酸丁酯三种化合物有共同碎片92 可进行母离子扫描将其与氨基酸区别开 2005 Waters Corporation
15、 Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 5 中性丢失扫描neutral loss MS1MS2 Collision Cell MS1MS2 Collision Cell Scanning m z M Scanning m z M 46Da Scanning m z M Scanning m z M 46Da Argon gasArgon gasArgon gasArgon gas PrecursorPrecursor ProductsProducts
16、 样品 混合氨基酸实验 中性丢失46 甲酸 中性丢失63 甲酸 NH3 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 常见17种混合氨基酸m zM H 天门冬氨酸 Asp或D 134 丝氨酸 Ser或S 106 谷氨酸 Glu或E 148 甘氨酸 Gly或G 76 组氨酸 His或H 156 精氨酸 Arg或R 175 苏氨酸 Thr或T 120 丙氨酸 Ala或A 90 脯氨酸 Pro或P 116 半胱氨酸 Cys或C 121 酪氨酸 Tyr或Y 182 缬氨酸 Val或V 118 蛋氨酸 Met或M 150 赖氨酸 Lys或K 147 异亮氨酸 Ile或I 132 亮氨酸 Leu或L 132 苯丙氨酸 Phe或F 166 备注 碱性氨基酸 易中性丢失63 甲酸 NH3 带苯环氨基酸 仲氨酸 易中性丢失46 甲酸 2005 Waters Corporation Waters 四极杆质谱培训 定性实验 调谐仪器定性实验 调谐仪器 6 混合扫描 样品 对羟基苯甲酸甲酯 对羟基苯甲酸丙酯 对羟 基苯甲酸丁酯与氨基酸混合液
