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1、2011届高三生物实验专题复习 基础部分 学生实验 必修部分 共18个 第一类 显微镜观察类实验 7个 用显微镜观察多种多样的细胞 1 P7 观察DNA RNA在细胞中的分布 1 P26 观察线粒体和叶绿体 1 P47 观察植物细胞的质壁分离和复原 1 P61 观察细胞的有丝分裂 1 P115 观察细胞的减数分裂 2 P21 低温诱导染色体加倍 2 P88 实验1 使用高倍显微镜观察几种细胞 1 P7 镜筒 压片夹 载物台 遮光器与光圈 反光镜 镜座 镜柱 镜臂 细准焦螺旋 粗准焦螺旋 物镜 目镜 一 显微镜的结构 二 操作指导 显微镜的使用 2 取镜安放 3 对光 4 放置玻片标本 5 观察
2、 6 高倍显微镜的使用 1 显微镜的构造 1 使用顺序 先低倍后高倍 2 放大倍数 3 目镜 物镜镜头长度与放大倍数关系 4 成像特点 低倍镜 高倍镜 5 物象移动方向与装片移动方向关系 包括顺逆时针问题 6 视野光线亮度的调整与切片颜色 厚度的关系 7 污染物位置的判断 若在低倍镜下看不到细胞 可改用高倍物镜继续观察 注意 1 正确使用低倍镜 取镜 对光 安放装片 下降镜筒 调焦 下降镜筒时 必须双眼注视物镜和装片的距离 以免压坏装片和碰坏物镜 2 正确使用高倍镜 将低倍镜下看到的物像移到视野中央 转动转换器 换用高倍物镜 调整光圈和反光镜 使视野亮度适宜 调节细准焦螺旋 直至物像清晰 实验
3、二 观察DNA RNA在细胞中的分布 1 p26 实验原理 吡罗红 甲基绿 红色 绿色 主要在细胞核 线粒体 叶绿体含少量 主要在细胞质 取口腔上皮细胞制片 将载玻片烘干 水解冲洗涂片染色观察 先低倍镜再高倍镜 选择染色均匀 色泽浅的区域 方法步骤 8 的HCl 能改变细胞膜的通透性 同时使DNA与蛋白质分离 人口腔上皮细胞DNA RNA分布 洋葱鳞片叶内表皮细胞DNA RNA分布 蒸馏水 0 9 的NaCl 实验三 观察线粒体和叶绿体 1 p47 一 实验原理 1 高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中 叶绿体一般是色的 扁平的形或形 可以用高倍显微镜观察它的形态和分布 2 健那绿染液是专一
4、性的染线粒体的活细胞染料 可以使活细胞的线粒体呈现色 而细胞质几乎为无色 绿 蓝绿 球 椭球 二 方法步骤与注意事项 观察叶绿体装片 取材 叶片薄且叶绿体大 数目少 制片 载玻片中央滴一滴清水 将叶片放入 加上盖玻片 制成临时装片 临时装片随时保持有水状态 观察 先倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体 形态和分布 光强度的变化与叶绿体的位置关系 绘图 用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞 藓类小叶或黑藻叶或波菜叶稍带叶肉的下表皮 低 显微镜下的黑藻细胞 实验四 观察植物细胞的质壁分离与复原 1 P61 细胞液浓度外界溶液浓度时 细胞吸水 质壁分离复原 原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性 因
5、而收缩幅度大 造成质壁分离 1 实验原理 紫色洋葱磷片叶 液泡大且有颜色易观察 2 实验材料及试剂 0 3g ml的蔗糖溶液 观察植物的质壁分离与复原 观察植物的质壁分离与复原 实验原理 方法步骤 实验五 观察植物细胞的有丝分裂 1 p115 1 根尖 茎尖的分生区 茎形成层 愈伤组织可观察到有丝分裂 2 细胞核内的染色体容易被碱性染料着色 1 根尖培养 材料 2 装片制作 解离 漂洗 染色 制片 顺序不能交换 3 观察 低倍镜观察 高倍镜观察 4 绘图 注意事项 培养根尖 应每天换水 防止水中缺氧烂根 取材 取生长旺盛 带有分生区的根尖 长度为根尖的2 3mm 时间 上午10时至下午2时最佳
6、 解离 目的 使组织细胞分离开 杀死并固定细胞 解离液 15 盐酸 95 酒精溶液 1 1 时间 室温3 5分钟 至根尖酥软 时间短则细胞没有完全分离 长则可能使根尖烂掉 漂洗 用清水漂洗10min 目的是洗去组织中的解离液 便于染色 防止酸碱中和 压片 目的是使细胞分散开 方法 用镊子弄碎根尖 盖上盖玻片 再放上一块载玻片 压片 压片过重过猛可能将组织压碎 压烂 过轻则细胞未充分分散开而重叠 低倍镜观察 找到分生区细胞 特点 细胞呈正方形 排列紧密 高倍镜观察 找各时期细胞 可见处于间期的细胞最多 中期最少 不能看到某个细胞连续分裂的过程 因细胞在解离时已被杀死 染色 染液 0 01g mL
7、的龙胆紫或0 02g mL的醋酸洋红 时间为3 5分钟 目的是使染色体或染色质被碱性染料染成深色 便于观察 回顾 1 解离的目的是什么 如果解离时间过短会造成什么后果 2 如果漂洗不干净会有什么结果 4 在分生区能不能看到细胞正在分裂 有何特点 5 观察有丝分裂 视野中处于什么时期的细胞最多 为什么 不能 细胞排列整齐 呈正方形 如果解离时间过短 就不能使细胞之间的连接分开 造成压片失败 细胞不能均匀地在装片上铺成一层 如果漂洗不干净 沾在洋葱根尖上的盐酸与酒精就会和龙胆紫反应 造成根尖细胞染色体不能染上颜色 A 染色体未着上颜色 无法看清B 细胞重叠 看不到染色体C 染色体着上颜色 清晰可见
8、D 染色体着色很浅 模糊不清甲观察到的实验结果是乙观察到的实验结果是丙观察到的实验结果是 B D A 实验六 观察细胞的减数分裂 2 p21 一 实验目的 二 实验材料 蝗虫精巢精母细胞减数分裂固定装片等 三 实验原理 减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的细胞分裂 它包括连续两次的细胞分裂阶段 第一次分裂为染色体数目的减数分裂 第二次为染色体数目的等数分裂 两次分裂可根据染色体变化特点分为前期 中期 后期和末期 实验七 低温诱导染色体加倍 2 p88 进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞 在有丝分裂 期 染色体的 分裂 子染色体在 的作用下 分别移向两极 最终被平均分配到
9、两个子细胞中去 用低温处理植物分生组织细胞 能够抑制 形成 以至影响 被拉向两极 细胞也不能分裂成两个子细胞 于是植物细胞染色体数目发生变化 秋水仙素类似 一 实验原理 后 着丝点 纺锤体 纺锤体 染色体 二 实验过程 1 材料用具洋葱或大葱 蒜 均为二倍体 体细胞中染色体数为16 培养皿 滤纸 纱布 烧杯 镊子 剪刀 显微镜 载玻片 盖玻片 冰箱 卡诺氏液 改良苯酚品红染液 体积分数为15 的盐酸溶液 体积分数为95 的酒精溶液 2 方法步骤低温诱导 固定形态 制作装片 观察 培养洋葱根尖 待根长出约1cm左右将整个装置放入冰箱低温室内 4 诱导培养36小时 剪取诱导处理的根尖约0 5 1c
10、m 放入卡诺氏液浸泡0 5 1小时 以固定形态 然后用体积分数95 酒精冲洗2次 解离 漂洗 染色 制片 同有丝分裂 3 注意事项1 低温处理必须在培养出1cm左右不定根之后 如若生根前就送进冰箱 低温抑制新陈代谢也就抑制了根尖分生区的形成 不会发生根尖分生区的有丝分裂受低温影响的过程 2 剪取根尖时间一般在中午10点左右 此时分裂旺盛 受低温影响较大 实验效果明显 3 染色时间要严格控制 不足时染色体看不清 染色过度 染色体一团糟 无法分辨 第二类 物质的分离 提取及鉴定实验 2个 检测生物组织中还原糖 脂肪和蛋白质 1 p18 叶绿体色素的提取和分离 1 p97 实验八 检测生物组织中的糖
11、类 脂肪和蛋白质 1 p18 1 实验原理 2 实验材料还原糖 应选含糖高 颜色为白色的植物组织 如苹果 梨等脂肪 选择富含脂肪的种子 如花生 蓖麻种子 实验前一般需浸泡3 4小时 蛋白质 可选富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等 葡萄糖 果糖 麦芽糖都是还原性糖 淀粉 蔗糖 纤维素都是非还原性糖 3 实验步骤 1 可溶性还原糖的鉴定 原理 CHO Cu HO 2 COOH Cu2O砖红色 制备组织样液 检测样液 加入2ml组织样液加入1ml新配制斐林试剂 淡蓝色 水浴煮沸2min左右 观察颜色变化 淡蓝色棕色砖红色 2 脂肪检测与鉴定 染色 滴苏丹 染液2 3滴与花生子叶切片上染色2 3min后吸去染
12、液滴体积分数50 的酒精洗去浮色洗去多余酒精 再滴蒸馏水1 2滴 盖盖玻片 观察 低倍镜高倍镜 橘黄色 红色 脂肪颗粒 制作切片 生物组织中脂肪的鉴定 3 蛋白质鉴定 原理 CO NH 类似双缩脲H2NOC NH CONH2结构 与Cu2 作用形成紫色络合物 双缩脲反应 制备样液 检测与观察 取2ml样液加入双缩脲试剂A液1ml 0 1g ml的NaOH溶液 创设碱性环境 摇匀加入双缩脲试剂B液 0 01g ml的CuSO4溶液 提供Cu2 4滴 摇匀观察 紫色 实验九 叶绿体色素的提取和分离 1 p97 实验九 叶绿体中色素的提取和分离1 实验原理 1 色素提取 2 色素分离 叶绿体中的色素
13、能够溶解在有机溶剂无水乙醇 丙酮 中 用无水乙醇提取色素 叶绿体中色素在层析液 汽油 中的溶解度不同 溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快 溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢 这样 叶绿体中的色素就在扩散过程中分离开来 纸层析法 2 实验方法步骤 1 提取色素 2 制备滤纸条 3 色素分离 纸层析法 4 观察实验结果 5 整理 洗手 称取5g新鲜绿色叶片 剪碎放入研钵中 向其中加入少许碳酸钙和二氧化硅 再加 mL无水乙醇 进行迅速充分研磨 将研磨液倒入漏斗中过滤出色素液 尼龙膜 问题 在叶绿体色素的分离实验中 要使色素带清晰又整齐 应采取的措施有哪些 定性滤纸要干燥 剪去滤纸条一端两角 滤液细线
14、画细 直 齐 重复画线 盖上培养皿盖 第三类实验 探究类实验 7个 探究影响酶活性的因素 1 p83 探究酵母菌的呼吸方式 1 p91 探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用 3 p51 探究培养液中酵母菌数量的动态变化 3 p68 土壤中动物类群丰富度的研究 3 p75 探究水族箱 或鱼缸 中群落的演替 3 p112 实验十 探究影响酶活性的因素 1 p83 高效性 专一性 温度 pH 一 比较过氧化氢酶和Fe3 的催化效率 1 实验原理 新鲜肝脏中含有过氧化氢酶 和Fe3 一样 能催化过氧化氢分解成水和氧 但二者效率不一样 2 实验方法与步骤 1 取两支洁净的试管并编号1号 2号 各注入2
15、ml过氧化氢溶液 2 向1号试管内滴入2滴肝脏研磨液 向2号对照试管内滴入2滴氯化铁溶液 3 堵住试管口 轻轻地振荡两支试管 使试管内的物质混合均匀 观察并记录哪支试管产生的气泡多 4 将点燃但无火焰的卫生香分别放入1 2号试管内液面的上方 观察并记录哪支卫生香燃烧猛烈 4 注意事项 肝脏要新鲜 并要研磨 不新鲜的肝脏中 过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低 研磨液效果好 因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积 滴加氯化铁溶液和肝脏研磨液不能合用一支滴管 过氧化氢有腐蚀性 实验注意安全 实验时将点燃的卫生香插入试管处 不要插入太深 防止受潮熄灭 3 实验结果与结论 两支试管均有气泡产生 但
16、1号试管产生得快而且多 两支卫生香均燃烧 但1号试管口的更猛烈 以上的一组对比实验可以证明酶的高效性 二 探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用 1 实验原理 淀粉和蔗糖都没有还原性 淀粉酶将淀粉水解成的麦芽糖则具有还原性 蔗糖水解产生的葡萄糖和果糖都具有还原性 但淀粉酶不能将蔗糖水解 2 实验材料 质量分数为3 的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液 质量分数为2 的新鲜淀粉酶溶液 3 实验方法与步骤 1 取两支洁净的试管 编号 然后向1号管注入2ml可溶性淀粉溶液和2ml新鲜淀粉酶溶液 向2号管注入2ml蔗糖溶液和2ml新鲜淀粉酶溶液 2 轻轻振荡两支试管 使试管内的液体混合均匀 然后将试管的下半部浸到600C左右的热水中 保温5min 控制温度1 3 取出试管 各加入2ml斐林试剂 4 将两支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中 用酒精灯加热 煮沸并保持1min 控制温度2 5 观察并记录两支试管内的变化 5 注意事项 1 做好本实验的关键是蔗糖的纯度和新鲜程度 4 实验结果与分析 1号有砖红色沉淀 2号没有颜色变化 即淀粉被淀粉酶水解 而蔗糖没有被水解 酶作用有专一性 下列关于探索淀粉酶对淀粉和蔗
