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1、神经解剖学杂志 zoas 年第 i卷第2期 139 狗内脏大神经起始神经元的研究 H R P及C T 一 H RP法研究 杨振 铎刘建赵明刘永年张培建 青海医学院 关键词 中间外侧核主部中间外侧核侧索部脊髓中介核中介核旁室管膜部内脏大神 经 HRP及CT 一 HRP 狗 本文在n例幼狗左侧内脏 大神经近侧端涂CT一HR P 自江纯HR P或二省混 合的H R P 观察该 神经中交感节前神经元在脊髓中的部位 分布节段和细胞形态 特征 共发现8 11 0个标记细胞 分 市范围在同侧胸 1一腰1脊髓 节段 胸 4一1 2 节段出现频率最高 当标记细胞 总数的92 53 士 29 其中胸8一1 0节段
2、占总数的46 3 8 土 5 5 标记细胞出现牲脊髓的四个区域 中间外侧核主部 ILp 中间外侧核索部 工 L f 中介核 IC 和中介核旁室管膜部 ICpe 在 ILp发现的 标记细胞占总标记细胞的8 了 92 IL f占总数的5 7 IC占总数的4 2 9 ICP e占总数的1 4 ILp和IL f两部的标记细胞分布节段较广 12一14个节段 IC和ICp e两 部较窄 7 一11个节 段 本文还讨沦了实验方法和狗内脏大神经中交感节前神经 元在脊髓内的分布特征 有关交感节前神经元的 问题 早已被人们所重视 并用逆行溃变法进行了一些 研究 本世纪七十年代初 K riste n s so n
3、和 L aVa il等 6 将H RP施于神经的末梢 经 轴浆逆行运送到胞体 开创了逆行轴突传递法 然后 国内 外一 些 学者用该法对交感节前 神经 元的形态 位置和分布节段等问题进行了探讨 6 内脏大神经是支配腹 腔 器 官的重要神经 用HR P法以狗为实验对象研究该神经 的起始神经元尚属少 见 本文用HR P 法和C T 一 H RP法 观察了狗内脏大神经 的交感节前纤维 起始神经元的所在位置 形 态 数 量和分布节段等问题 材料和方法 本文用幼年狗 1 9一2 gkg 11只 雄性 6只 雌性5只 在3 戊巴比妥钠 l ml kg 腹腔麻醉下 经 左侧腹直肌外缘纵行切口 在左肾上腺上方暴
4、露左侧内脏大神经 在 脆下和该神经分出肾上腺支之前的部位 用无损伤缝合针穿一引线 并在其稍下处切断该神 经干 将近侧断端引入塑料套管 内径 1 一 2mm 长 5mm 用生理盐水擦洗后 4 例 涂抹上海东风厂生产的 CT 一 HRP 10 20 林1 4 例涂以单纯H R P 0 5 2 smg RZ 3 0 3 例涂以CT 一 HRP和H RP的混合物 1一4 小时后 每3 0分钟涂一次 清除 酶液取掉套管 存活 3 天 经心脏灌流 先灌生理盐水50Om l 随之灌入含 2 多聚甲醛和 0 5 戊二醛的0 IM磷酸缓冲液1 6 0 oml PH7 4 最后灌入含1 0 蔗糖的磷缓 液50 0
5、m l 固定液在5 0 一6 0 分钟内灌完 取脊髓和脊神经节 放入含1 0 蔗糖的磷酸缓冲液中 置 4 冰箱中过夜 将颈 一腰 脊髓节段作水平冰冻连续切片 厚4 8 微米 隔 1取1 按O 一 D法 舀 吕成绿色反应 中性红复染 主要在明视野显微镜下进行观察 140 结果 脊髓内被 HRP或C T 一H R P所标记的细胞 其胞体及突起内充满了数量不等的从浅 绿直到深绿色均匀 的 反应颗粒 核和核仁清楚可见 有的反应颗粒连成一片 致使整个细胞呈 现深绿色 核及核仁被其复盖 本文以被标记的细胞轮廓完整 反应物清楚可 见为准进行计数 一 脊健各节段标记细胞的分布 1 1例狗脊髓T 一 L 节段共
6、发现标记细胞8 11 0 个 各例多少不等 其中最多者为 1 288个 最少者为30 7个 分布范围广泛者布于 1 3 个节段 少者仅 占8个节段 为了便于观察 现将 总计n例脊髓各节段内标记细胞数量的百分比用图 1表示 刁l w ee e 1 1 厂 l l w e l l 门 1 i J r l le s l 一 一 口 一 一7 一 厂l e e l 万 r 一气O 一一之 j 嘴改 坟1 06462 标 记 胞细 明J 6 lJ哟 J 习川v 1 习引叫 标记 细 胞 纬 T1 2 之4 6了巴 下o r 2la 与 了 r12r3 L 脊髓节段 图1 标记的内脏大神经起始神经元在脊
7、髓各节段的分布频率 脊髓节段 图21 2号狗标记的内脏大神经起始神经元在 脊髓各节段的分布频率 肠 神 韶 匀洲 叫叫叫叫哟叫叫匀别别 升 标 细记 胞 伟协1 41 2泊 8642 标 记细胞 毛 2a45 7 一01 z 3 毛 2 3 4 67 e 02犷fz 了3 与 脊髓节段 图 3 8 号狗标记的内脏大神经起始神经 元在脊髓各节段的分布频率 青髓节段 图 4 5号狗标记的内脏大神经起始神经元在 脊位各节段的分布频率 141 咚 从图 1 可见 标记细胞出现 于胸 一腰 的各节段中 但大多数集中在胸 4一 这 9 个节 段内 占总标记细胞数的92 53 士 0 2 9 其中 胸 工
8、三个 节段占总数的4 6 3 8 士0 5弓 现以三例的材料为例 进行分析 标记细胞出现最多者1288个 1 2号狗 中等者川4个 8 号狗 最少者30 7个 25号狗 其标记细胞出现节段和频率见 图 2 3 4 从图2一4可 见 标记细胞的数量和范围虽有所不同 但均较集中出现于胸 一 节段 其频 率最高者则出 现在胸 节段 在全部1 1例中 最高频率出现于胸 节 段者 4 例 5 9 11 25号狗 出现于胸 节段者 4 例 8 13 1 4 15号狗 出现 于胸 节段 者 3 例 1 1 0 1 2号狗 同时也可看到 各例从最高频率节段向两侧 标记细胞数量逐渐下降 因此 有理由认为内脏大神
9、经 交感节前纤维神经元 起始于胸 一腰 节段 在胸 一 2 节段较 为集 中 胸 三个节段 是该神经起始神经元数量最多的节段 二 标记神经元在脊髓 内的位置和形态 关于交感节前神经元的细胞构筑学的研究早已有文献报导 8 3 艺6 了 一 般将 节前 神经元的分布区域划分为 4 一 5组 Petr as 等对其分布区域给予 比较准确的命 名 本文 中 被标记 的神经元 均在此范围内 一 中间外侧核主部 nue le us 主 n te r m ed主o l a ter alisp ars p rin eipa lis ILp 位 于侧角内 被标记的神经元主要为小型 2 O微米以下 和中等型 2o
10、一3 5 微米 的细胞 其形 态为多角形 近圆形和三角形 以琉散或集聚的形式主要存在于该核的外侧份 在该核的中 央和内侧份也可看到 本文在一张切片上最多发现过1 0个被标记 的细胞 图 5 二 中间外侧核索部 nue l e u s inte rmedio l a ter alisp ar s fu n ie u l aris IL f 位 于侧角和侧索外缘之间 为长梭形和三角形细胞 其两端较长 突起横向伸展 长梭形的标 记细胞及其横向伸展的突起全部位于侧索中者很少 图 6 而三角形胞体紧靠侧角边缘 其一突起向外伸入侧索者则较前者多见 三 中介核 n ue l e u s inte r ea
11、l a tu s IC 位于中间外侧核主部和脊髓 喊 1 央管之I I j J 多为横 向伸展的中小型梭形细胞 本文在一张切片上最多看到 3个横向间断排列 的被标记的 神经元 图 7 四 中介核旁室管膜部 nu e l eu s inte r e latus p ars p a r cpc n dym a lis ICp c 位 于中央管的背侧和背外侧 向外可与断续的中介核细胞相邻 胞 在一张切片上最多发现 4 个被标记的神经元 三 脊髓四个核团中标记细胞的节段性分布 为 卜 小型横位排列 的梭形趣 为了探讨各核团中标记细胞的数量及在节段分布上 的关系 本文特制成下表 表 1 从表1可见 1
12、1例脊髓中 ILp出现标记细胞7 130个 占标记 细 胞总数的8 7 92 士 0 36 分布在从胸 一腰 节段 IL f出现4 70个 占总数的5 8 0 士 2 6 分布在胸 一 节 段 IC出现389个 占总数的4 8 0 士0 2 4 分布在胸 3 节段 ICp e 发现12 1个 占总数 的1 49 士0 1 3 分布在胸 7 节段 从数量上ILp的7 13 0个逐渐减少到ICp e 的 12 1 个 在分布范围上从1 4个节段逐渐减至 7 个节段 此外 ILp和ILf的标记细胞主要分布在胸 节段 ILp在胸 7 一 节段数量 较多 在 此 5 个节段 中出现率占该核总数的65 4
13、 3 ILf占该核总数的7 3 6 2 IC和ICP c的标记细 胞主要分布在胸卜 节段 其中胸 一 节段数量较多 在此 5段内 IC占该核标记 细 胞总 数的8 8 43 ICp e 占该核总数的98 39 142 表 1 被标记的内脏 大神经起 始神经元在脊髓各节段 各核团中的分布 节段 L3 10 1 1土2 13336 749 94 72 57077711041097 99669 13 5057 10 J IL 6 18 2 几 竺 核 T L 7 护 一 口山 八U C l lQ 产 产 勺 O 产 O 八 一Q 曰 一 月 钻 月了 一匕 J一月 峪一一 一 匕 一一 一nU 一
14、n 曰 一O 于 J工 一 丘IJ一 布一U Q 一洲J 1 二 一 J g O口工 一 布一一 一 IC 上 ICPe 12 1 讨 论 一 关于实验的方法问题 一 关于狗的内脏大神经 左内脏大神经在左隔脚外侧离开交感干进入腹腔 近 左肾上腺上外缘处向内发一分支 在 此分支处有一恒定的小神经节 长 1 mm 宽0 smm 此点可能与猫的内脏大神经不同 据报导 猫的该神经中常有大小不 一 数目不等的神经节存在 本文在节的上方切断可使 该神经全部纤维与HR P接触 二 关于H RP在神经断端的吸收及污染 有人报导 面神经中枢端涂H RP结晶后 在相应核团中出现的标记细胞数比用其它方 法为多 奋
15、取下肠系膜下节及其远端的神经 放入特制的有HR P培养基的试管内 一定时间 后也可在神经节中看到标记细胞 本文采用涂抹方法效果较好 防止酶污染附近组织的问题十分重要 因为它可能影响对实验结果的评定 乃 本文 在 涂酶 的过程中严防污染 用胶膜覆盖附近组织并用塑料套管进行保护 可以使污染减少到最小程 度 三 关于 C T 一H R P和HRP的敏感性比较 夕 C T 一 H P具有很高的灵敏度已被实验所证实 本文采用 CT 一 H 法 的实验例与 单纯HRP法实验例相比 在标记细胞出现的频率上没有明显 的增多 这可能是 由于本文用 0 一d 法反应之故 有待进一步探讨 本文在观察结果上没作三种给
16、酶方法的 比较 二 关于内脏大神经交感节前神经元在脊髓内的节段性分布 本文1 1例动物表明 标记细胞出现在术侧胸 一腰 的1 4个节段 胸 一 节段出现的频率 较高 Cum ming用染质溶解的方法证明狗的该神经节前神经元右侧位于 胸 一腰 左侧为 脚 一腰 而在胸 一3 节段内没有发现 这可能是逆行淡变法所不足 之处 碳村等用HR P法 观察大鼠内脏大神经交感节前神经元 认 为分布在胸 一腰 节段 K u 等在猫的 材料中发现 位于胸 一腰 节段 并发现一例标记细胞的9 5 位于胸 9 节段 可见本文结果与上 述作 者结果不完全相同 但本文发现从胸 开始 出现较多的标记细胞 这一点与其他作者一致 本 文发现脚 三个节段 标记细胞出 现较多 各例动物标记细胞出现的最高频率均在此三 个 节段内 于恩华等在猫腹腔神经节中注射HRP后 发现胸 一 节段最为密集 可见较集 中地 肉3 一4个脊做节段发出较多的交感节前纤维 可能是该神经起始神经元节段分布的规律 三 关于内脏大神经交感节前神经元在脊髓中的位置和分布 本文所见的标记细胞均位于术侧四个区域之中 即ILp IL众 不C ICP e 此点
