2020版 生物 高考冲刺总复习-- 专题12 基因工程、细胞工程、胚胎工程及生物技术的安全性--(附解析)

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1、专题十二 基因工程、细胞工程、胚胎工程及生物技术的安全性构建知识体系串联主干知识考点1基因工程和蛋白质工程(对应学生用书第101页)核心整合知识内化融会贯通1基因工程的基本工具2基因工程的操作步骤(1)获取目的基因的三种方法从基因文库中获取化学法人工合成:通过DNA合成仪利用化学方法直接合成。(2)基因表达载体的构建重组质粒的构建基因表达载体的组成构建过程(3)将目的基因导入受体细胞的“三种类型”导入植物细胞农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法(本法针对单子叶植物)导入动物细胞显微注射法导入微生物(细菌)转化法(4)目的基因的检测与鉴定的方法检测目的基因是否导入受体细胞:DNA分子杂交技术。检

2、测目的基因是否转录出mRNA:分子杂交技术。检测目的基因是否翻译成蛋白质:抗原抗体杂交技术。个体生物学水平鉴定:根据表达性状判断。3蛋白质工程(1)流程图写出流程图中字母代表的含义:A转录,B.翻译,C.分子设计,D.多肽链,E.预期功能。(2)基本途径:从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列。(3)对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质,必须通过基因修饰或基因合成实现。真题再做思悟方法体验感悟1(2019江苏高考)下列生物技术操作对遗传物质的改造,不会遗传给子代的是()A将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌,筛选获得基因工程菌B将花青素代谢基因导入植

3、物体细胞,经组培获得花色变异植株C将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的奶牛D将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者,进行基因治疗D将含胰岛素基因表达载体的重组质粒转入大肠杆菌获得的转基因菌,可以通过二分裂将胰岛素基因传给后代,A不符合题意;将花青素代谢基因导入植物体细胞,再经植物组织培养获得的植株所有细胞均含有花青素代谢基因,花青素代谢基因会随该植物传给后代,B不符合题意;将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的奶牛所有细胞均含有肠乳糖酶基因,可以遗传给后代,C不符合题意;该患者进行基因治疗时,只有淋巴细胞含有该腺苷酸脱氨酶基因,性原细胞不含该基因,故不能遗传给后代,

4、D符合题意。故选D。2(2019全国卷)基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。回答下列问题。(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括_和_。(2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是_。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的_。(3)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_。解析:(1)基因文库包括基因组文库和cDNA文库。(2)生物体细胞内DNA复制开始时是利用解旋酶进行解旋的,而在体外利用PCR技术扩增目的

5、基因时,则是通过加热至9095 进行解旋的,二者都破坏了碱基对之间的氢键。(3)在PCR过程中,要加热至9095 ,所以使用热稳定性高的Taq酶,而不使用在高温下会失活的大肠杆菌DNA聚合酶。答案:(1)基因组文库cDNA文库(2)解旋酶加热至9095 氢键(3)Taq酶热稳定性高,而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活3(2019江苏高考)图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体质粒P0具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。请回答下列问题: 图1图2(1)EcoRV酶切位点为GATATCCTATAG,EcoRV酶切出来的线性载体P1为_末端。(2)用TaqDN

6、A聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理,在两端各添加了一个碱基为_的脱氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在_酶作用下,形成重组质粒P3。(3)为筛选出含有重组质粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到A、B、C三类菌落,其生长情况如下表(“”代表生长,“”代表不生长)。根据表中结果判断,应选择的菌落是_(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是_、_。菌落类型平板类型ABC无抗生素氨苄青霉素四环素氨苄青霉素四环素(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒,拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、

7、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR鉴定时应选择的一对引物是_。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400 bp片段,原因是_。解析:(1)根据题意分析,EcoRV酶识别的序列是GATATC,并且两条链都在中间的T与A之间进行切割,因此其切出来的线性载体P1为平末端。(2)依题意并据图分析,目的基因两侧为黏性末端,且露出的碱基为A,则在载体P1的两端需要各加一个含有碱基T的脱氧核苷酸,以便形成具有黏性末端的载体P2,再用DNA连接酶将P2与目的基因连接起来形成重组质粒P3。(3)根据以上分析已知,限制酶(EcoRV酶)切割后破坏了四环素抗性基因,但是没有破坏氨苄青霉素

8、抗性基因,因此含有重组质粒P3的菌落在含有四环素的培养基中应该不能生长,而在含有氨苄青霉素的培养基中能生长,结合表格分析可知,应该选择B类菌落。根据表格分析,A类菌落在氨苄青霉素和四环素的培养基中都能够生长,说明其导入的是P0;C类菌落在任何抗生素的培养基中都不能生长,说明其没有导入任何质粒。(4)据图分析,根据目的基因插入的位置和PCR技术的原理分析,PCR鉴定时应该选择的一对引物是乙和丙;根据题意和图形分析,某同学用图中的另外一对引物(甲、乙)从某一菌落的质粒中扩增出了400bp的片段,说明其目的基因发生了反向连接。答案:(1)平(2)胸腺嘧啶(T)DNA连接(3)BA类菌落含有P0C类菌

9、落未转入质粒(4)乙丙目的基因反向连接4(2017全国卷)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题:(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是_。(2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用_作为载体,其原因是_。(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比,大肠杆菌具有_(答出两点即可)等优点。(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质

10、是_(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是_。解析:(1)人是真核生物,从人的基因组文库中获得的基因A有内含子,而受体细胞大肠杆菌是原核生物,原核生物基因中没有内含子,相应的就没有切除内含子对应的RNA序列的机制,故无法表达出蛋白A。(2)噬菌体是专一性侵染细菌的病毒,以细菌为宿主,而昆虫病毒侵染的是昆虫,以昆虫为宿主。家蚕属于昆虫,故应选用昆虫病毒作为载体。(3)与家蚕相比,大肠杆菌具有繁殖快、容易培养等优点,故要高效地获得蛋

11、白A,可选用大肠杆菌作为受体。(4)检测基因A是否翻译出蛋白A,可用抗原抗体杂交法。(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验中,S型细菌的DNA可以使R型细菌发生转化,说明可调控多糖荚膜产生的基因整合到了R型细菌的DNA分子中并成功得以表达。也就是说DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体并进行表达,这就为基因工程理论的建立提供了启示。答案:(1)基因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出蛋白A(2)噬菌体噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕(3)繁殖快、容易培养(4)蛋白A的抗体(5)DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体5(2017全国卷)

12、几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题:(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是_。提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是_。(2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是_。(3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是_(答出两点即可)。(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是_。(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是_。解析:(1)与老叶相比,嫩叶组织细胞易破碎,容易提取到几丁质酶的mRNA。提取RNA时,提取液中添加RNA酶抑制剂可防止RNA被RNA酶催化降解。(2)以mRNA为模板,按照碱基互补配对原则,在逆转录酶的作用下,通过逆转录(反转录)可以获得cDNA。(3)因该目的基因是通过逆转录形成的,无表达所需的启动子,也无在受体细胞内进行复

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