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1、课时知能训练一、选择题1(2012长沙模拟)甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是()A甲方法可建立该细菌的基因组文库B乙方法可建立该细菌的cDNA文库C甲方法要以脱氧核苷酸为原料D乙方法需要逆转录酶参与2在基因工程操作中限制性核酸内切酶是不可缺少的工具酶。下列有关限制性核酸内切酶的叙述错误的是()A一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B限制性核酸内切酶的活性受温度和pH等因素的影响C限制性核酸内切酶可以从某些原核生物中提取D限制性核酸内切酶也可以识别和切割RNA3(2011金华十校联考)下列有关基因工程的叙述错误的是()A最常用的载体是大肠杆菌的
2、质粒B工具酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶C该技术人为地增加了生物变异的范围，实现种间遗传物质的交换D基本原理是DNA具有双螺旋结构以及遗传信息传递和表达方式相同4下图为基因表达载体的模式图。下列有关基因工程中载体的说法错误的是(双选)()A基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C图中启动子位于基因的首端，是核糖体识别和结合的部位D抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因二、非选择题5(2011东北师大附中检测)下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：本发明利用转基因番茄作为生物反应器生
3、产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段拼接而成，并且在胰岛素COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV 35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。(1)本专利是采用_方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因是_。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用_技术。(2)根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是_。构建的基因表达载体中不会含有_(从
4、下列选项中选择)。目的基因CaMV 35S启动子果实专一性启动子2A12 引物标记基因 内含子滞留序列终止密码子 终止子(3)如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用_技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测_。6下图为培育转基因小鼠的部分过程示意图。请回答下列问题：(1)若需在短时间内获得较多的外源基因，通常采用_技术。(2)图中的A细胞通常为_细胞，将外源基因导入该细胞常用的方法是_。(3)仔鼠出生后可用其尾巴进行DNA检测，通过_方法，检测出携带外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相应的蛋白质，可从转基因小鼠中提取蛋白质，并用相应的抗体进行_杂交，若有杂交带出现，则表明小鼠体内的外
5、源基因_。(4)在外源基因导入小鼠的A细胞时，外源基因可能随机地插入到该细胞的DNA中。这些细胞有的能发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析外源基因插入后导致有些A细胞死亡的最可能原因_。7(2011石景山模拟)口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示。请据图回答。(1)口蹄疫病毒的VP1蛋白进入动物体内，能引起机体产生特异性免疫应答。VP1蛋白在免疫反应中称为_。(2)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，要获得VP1基因可用_的方法合成DNA，再用_将VP1基因片
6、段切下。(3)过程的培养基中除了加入各种必需营养物质和_等激素外，还需要添加_筛选出含有重组质粒的叶片小段。(4)获得表达VP1蛋白的番茄植株以后，需要进行免疫效力的测定。具体方法是：将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射一次，三次后检测豚鼠血液内产生的_的数量。为了使结果可信，应设两组对照，分别注射_和_。(5)口蹄疫疫苗注射到豚鼠体内后，首先由_进行处理和呈递，最终激活B细胞，使其大量增殖分化成_和_，前者分泌大量抗体，后者在豚鼠再次受到感染时发生免疫应答。答案及解析1【解析】甲图描述的为该细菌的基因组文库，只要利用DNA限制性核酸内切酶将其原有的DNA切断即可，不需要以脱氧核
7、苷酸为原料。乙图描述的为细菌的部分基因文库，乙方法需要逆转录酶参与，并需要以脱氧核苷酸为原料。【答案】C2【解析】限制性核酸内切酶只能识别并且切割特定的DNA序列。酶容易受到温度和pH等环境因素的影响。限制性核酸内切酶可以在原核生物中提取。【答案】D3【解析】基因工程的基本原理是基因重组，不同生物的DNA具有相同的结构以及遗传信息传递和表达方式相同是基因工程赖以完成的基础；基因工程中的工具酶是限制性内切酶和DNA连接酶，最常用的载体是大肠杆菌质粒。该技术可克服生殖隔离现象，实现种间遗传物质交换，按照人的意愿使生物发生变异。【答案】D4【解析】由于受体细胞有植物、动物和微生物之分，以及目的基因导
8、入受体细胞的方式不同，因此，基因表达载体的构建也会有所差别，不可能是千篇一律的。启动子是基因中转录的起点，是RNA聚合酶识别和结合的部位，而不是核糖体。【答案】BC5【解析】本题考查基因工程的知识。由题意可知，所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段拼接而成，所以本专利是采用人工合成方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因是密码子具有简并性，基因序列不同，蛋白质可以相同。基因表达载体组分比较多，主要是以下几个：目的基因、CaMV 35S启动子、果实专一性启动子2A12、标记基因。如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用DNA分子杂交技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测目的基因是否转录出mRNA。【答案】(1)人工合成密码子具有简并性，基因序列不同，蛋白质可以相同PCR(2)农杆菌的Ti质粒(3)DNA分子杂交目的基因是否转录出mRNA6【答案】(1)PCR(2)受精卵显微注射法(3)DNA分子杂交抗原抗体已表达(4)外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达7【答案】(1)抗原(2)逆转录限制性核酸内切酶(3)生长素和细胞分裂素卡那霉素(4)特异性抗体未转基因的番茄叶片提取液弱毒疫苗(5)吞噬细胞浆细胞(效应B细胞)记忆B细胞4
