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1、北京英才苑网站 http:/ 版权所有盗版必究Sy-6 叶绿体中色素的提取和分离 实验程序一、实验原理叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮中，所以，可以通过研磨法用丙酮提取叶绿体中的色素(若无丙酮亦可用酒精代替)。层析液（在6090下分馏出来20份石油醚 + 2份丙酮 + 1份苯）是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同(溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。)，所以，可以用纸层析法分离出叶绿体中的色素。二、目的要求1.初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。2.探索叶绿体中有几种色素。胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b随层析液在滤纸上
2、扩散速度不同，可以分出四条色素带。三、重点与难点重点: 1.初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。2.探索叶绿体中有几种色素。难点:1.该实验中应注意的问题。2.培养学生独立实验的能力,掌握探究实验的方法。四、材料用具新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)，研钵，小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒(10mL)，天平。丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。五、方法步骤(观察录象)1.研磨 2.滤液 3.把滤液印在滤纸上(与教材不同) 4.层析用毛细吸管划线时间长易损伤纸纤维,效果欠佳,改用玻璃片印迹,效果好。结论:叶绿体含有四种色素,胡萝卜素在最
3、上端,呈橙黄色；其次是叶黄素，呈黄色；中间是蓝绿色的叶绿素a ；下端是黄绿色的叶绿素b。注意:本实验丙酮加入3mL足够，研磨液用杵棒推挤，即可挤出较浓的色素提取液，连同糊状物直接倒入小烧杯，不需过滤，但挤出的研磨液仍可称为“过滤液”。 随堂演练1.通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现四条色素带，从上到下依次为（ ）A.胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素bB.胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素C.叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素D.叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素2.下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述中，不属于实验要求的是（ ）A.提取高等植物叶绿体中的色素 B.用纸层
4、析法分离色素C.了解各种色素的吸收光谱 D.验证叶绿体中所含色素的种类3.用纸层析法将色素进行分离,在滤纸条上出现的最窄的一条色素带的颜色是（ ）A.黄色 B.橙黄色 C.黄绿色 D.蓝绿色4.提取叶绿体中的色素时要加丙酮，其原因是（ ）A.让色素溶解 B.防止叶绿素被破坏C.便于将叶片研磨成匀浆 D.促使叶绿体中色素分离5.在叶绿体色素的提取和分离实验中，在滤纸条上扩散速度最快的色素是（ ）A.叶绿素a B.叶绿素b C.胡萝卜素 D.叶黄素6.绿色植物的光合作用中，叶绿素是（ ）A.光合作用的原料B.光合作用的产物C.能量转换器 D.氢的接受器7.右图为用分光光度计测定叶片中两类色素吸收不
5、同波长光波的曲线图，请判定A和B分别为何种色素（ ）A.叶绿素、类胡萝卜素B.类胡萝卜素、叶绿素C.叶黄素、叶绿素aD.叶绿素a、叶绿素b8.将几株相同的天竺葵放在不同的光下生长，其他条件 都相同，一段时间后，生长状态最差的应是（ ）A.蓝紫光下的天竺葵 B.黄绿光下的天竺葵C.红橙光下的天竺葵 D.红光下的天竺葵9.下列作用不属于叶绿素的功能的是（ ）A.吸收光能 B.利用光能使水分解 C.利用光能合成ATP D.固定和还原二氧化碳参考答案:1.A 2.C 3.B 4.A 5.C 5.C 6.A 7.B 8.D 9.D课后作业1.实验报告册(实验八)2.能力提高练习(1)在圆形滤纸的中央，点
6、上叶绿体色素的提取液进行层析，随着层析液从滤纸的中央向四周扩散，形成四个色素环带，排在最里圈的色素是（ ）A.橙黄色B.黄绿色C.蓝绿色D.黄色(2)生物学家恩格曼将可见光通过三棱镜后照射在丝状绿藻上，发现原来丝状绿藻周围均匀分布的好氧性细菌发生重新分布，不同区域聚集着不同数量的细菌(如图)，请分析回答:细菌重新分布时，主要聚集在 光投射区的绿藻周围。发生这种现象的原因是，绿藻细胞中的叶绿素主要吸收 光，进行 作用，放出的 多，以满足好氧型细菌的需要。(3)在做“叶绿体中色素的提取和分离”实验时，向研钵中加入SiO2的目的是 ，加入 CaC03的目的是 ；在盛有层析液的烧杯上盖上培养皿盖的目的
7、是 ，在滤纸条上扩散速度最慢的色素带是 ，其颜色是 。(4)某同学在做“叶绿体中色素的提取分离”实验时，操作情况如下所述，结果实验失败，请指出其错误所在:将5克新鲜完整的菠菜叶，放在研钵中，加入丙酮、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨。用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线处小心均匀地划出一条滤液细线，并连续迅速地重复划23次。把划好细线的滤纸条插入层析液中，并不断摇晃，以求加快色素在滤纸条上的扩散。参考答案:1.(略) 2.(1)B (2)(1)红光和蓝紫 (2)红光和蓝紫 光合 氧气 (3)了使研磨充分 防止在研磨过程中，叶绿素受到破坏 防止层析液挥发叶绿素b黄绿色 (4)未去除粗叶脉和将叶剪碎，这样降低了叶绿素的提取率 上一次滤夜细线未干燥，即进行下一次划线，使滤液线过粗或纸上色素量较低 由于摇晃，层析液接触液线，溶解了色素。- 3 -
