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1、【引用】常用 pH缓冲溶液的配制和 pH值2011-05-13 20:01:24| 分类： 生物 |字号 订阅本文引用自 DSC常用 pH 缓冲溶液的配制和 pH 值http:/) 整理： zfg序号 溶液名称 配制方法 pH 值1 氯化钾-盐酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl 与 25.0 ml 0.2 mol/L KCl 混合均匀后，加水稀释至 100 ml1.72 氨基乙酸-盐酸 在 500 ml 水中溶解氨基乙酸 150 g，加480 ml 浓盐酸，再加水稀释至 1L 2.33 一氯乙酸-氢氧化钠在 200 ml 水中溶解 2 g 一氯乙酸后，加40 g NaOH，溶解完全后
2、再加水稀释至 1 L2.84 邻苯二甲酸氢钾-盐酸把 25.0 ml 0.2 mol/L 的邻苯二甲酸氢钾溶液与 6.0 ml 0.1 mol/L HCl 混合均匀，加水稀释至 100 ml3.65 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠把 25.0 ml 0.2 mol/L 的邻苯二甲酸氢钾溶液与 17.5 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至 100 ml4.86 六亚甲基四胺-盐酸 在 200 ml 水中溶解六亚甲基四胺 40 g，加浓 HCl 10 ml，再加水稀释至 1 L 5.47 磷酸二氢钾-氢氧化钠把 25.0 ml 0.2 mol/L 的磷酸二氢钾与23.6 ml 0.
3、1 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至 100 ml6.88 硼酸-氯化钾-氢氧化钠把 25.0 ml 0.2 mol/L 的硼酸-氯化钾与4.0 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至 100 ml8.09 氯化铵-氨水 把 0.1 mol/L 氯化铵与 0.1 mol/L 氨水以2：1 比例混合均匀 9.110硼酸-氯化钾-氢氧化钠 把 25.0 ml 0.2 mol/L 的硼酸-氯化钾与43.9 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀，加 10.0水稀释至 100 ml11氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠 把 49.0 ml 0.1 mol/L 氨基乙酸-氯化钠
4、与 51.0 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀 11.612磷酸氢二钠-氢氧化钠把 50.0 ml 0.05 mol/L Na2HPO4 与 26.9 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至 100 ml12.013氯化钾-氢氧化钠把 25.0 ml 0.2 mol/L KCl 与 66.0 ml 0.2 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至100 ml13.0一、常用溶液的配制（文章来自： 医药园 (http:/) 整理：zfg）（一）溶液配制注意事项1药品要有较好的质量 试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，GR）、分析试剂（A
5、ntalytical reagent，A R）化学纯（Chemical pure，CP ）和实验试剂（Laboratory reagent，LR）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。2药品称量要精确。3配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在 50 万欧姆以上，pH在 5.57.0 之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。（二）0.067（1/15 ）Mol/L 磷酸缓冲液11/15Mol/L
6、磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，AR）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入 1 000ml 容量瓶内，再稀释至刻度（ 1 000ml）。21/15Mol/L 磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者 Na2HPO42H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入 1 000ml 容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。3按附表的比例，配制成不同 pH 值的缓冲溶液。附表 1 磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH 1/15Mol/L 1/15Mol/L pH 1/15Mol/L 1/15Mol/L Na2HPO4 KH2PO4 N
7、a2HPO4 KH2PO45.8 8.0 92.0 7.1 66.6 23.45.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.06.0 12.2 87.8 7.3 76.8 23.26.1 15.3 84.7 7.4 80.8 19.26.2 18.6 81.4 7.5 84.1 15.96.3 22.4 77.6 7.6 87.0 13.06.4 26.7 73.3 7.7 89.4 10.66.5 31.8 68.2 7.8 91.5 8.56.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.86.7 43.5 56.5 8.0 94.7 5.36.8 49.6 50.4 8.1 95.8
8、 4.26.9 55.4 44.6 8.2 97.0 3.07.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0（三）0.15Mol/L PB 液附表 2 0.15Mol/LPB 液配制法pH 0.15Mol/L Na2HPO4（ml） 0.15Mol/L NaH2PO4（ml）6.4 26.5 73.56.6 37.5 62.56.8 49.0 51.07.0 61.0 39.07.2 72.0 28.07.4 81.0 19.07.6 87.0 13.0Na2HPO42H2O 分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含 26.7g/L。Na2HPO412H2O 分子量=358.22
9、0.15Mol/L 溶液含 53.7g/L。NaH2PO4H2O 分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含 20.7g/L。NaH2PO42H2O 分子量=156.03 0.15Mol/L 溶液含 23.4g/L。（四）0.2Mol/L PB 缓冲液附表 3 0.2mol/L PB 缓冲液配制法pH 0.2 Mol/L Na2HPO4（ml） 0.2Mol/L NaH2PO4（ml）5.8 8.0 92.06.0 12.3 87.76.2 18.5 81.56.4 26.5 73.56.6 37.5 62.56.8 49.0 51.07.0 61.0 39.07.2 72.0 28.0
10、7.4 81.0 19.07.6 87.0 13.07.8 91.5 8.58.0 94.7 5.30.2Mol/L Na2HPO42 H2O 溶液 35.61g/LNa2HPO412 H2O 溶液含 71.64g/L0.2Mol/LNaH2PO4H2O 溶液含 27.60g/LNaH2PO42 H2O 溶液含 31.21g/L欲配 0.1Mol/L PB 缓冲液则在 0.2Mol/L PB 缓冲液的基础上加 H2O 稀释 1 倍即可。欲配制 PBS 液时，则在溶液中加 0.85的 NaCl 溶液即可。（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）（0.15Mol/L PH 7.2）NaCl 8.0g
11、KCl 0.2gNa2HPO4 1.15g（如为 Na2HPO412H2O，则为 2.89g）KH2PO4 0.2g将上述试剂依次溶于 1 000ml 去离子水中，完全溶解后， 115高压灭菌10min15min，存在 4冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。http:/) 整理： zfg1硼酸（3BO3）0.2Mol/L 硼酸：硼酸 12.37g 加水至 1 000ml。2硼砂（Na2B4O7 ）0.05Mol/L 硼砂：硼砂 19.07g 加水至 1 000ml。附表 4 不同 pH 的 0.2Mol/L 硼酸缓冲液配制法pH 0.05Mol/L硼砂（ml）0.2M
12、ol/L硼酸（ml）pH 0.05Mol/L硼砂（ml）0.2Mol/L硼酸（ml）7.4 1.0 9.0 8.2 3.5 6.57.6 1.5 8.5 8.4 4.5 5.57.8 2.0 8.0 8.7 6.0 4.08.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0（七）巴比妥缓冲液1pH8.2 离子强度 0.05Mol/L 巴比妥缓冲液巴比妥钠 47.6g蒸馏水 3 000ml 1.17N HCl 55.0ml（1.17 N HCl=193ml 浓 HCl 加 1 807ml 蒸馏水） 将 4.76g 巴比妥钠溶于 3 000ml 蒸馏水。 加 1.17 N HCl 55ml。 用 HCl
13、 调节 pH 到 8.2，并加蒸馏水至 4 265ml。2pH8.4 0.06Mol/L 巴比妥缓冲液巴比妥 1.84g巴比妥钠 10.30g加蒸馏水至 1 000.00ml3pH8.6 0.06Mol/L 巴比妥缓冲液巴比妥 1.66g巴比妥钠 12.76g加蒸馏水 1 000.00ml（八）0.2Mol/L 醋酸盐缓冲液 见表附表 5附表 5 0.2Mol/L 醋酸盐缓冲液配制法pH pH23370.2Mol/LTris（ml）0.1Mol/LHCl（ml）23370.2Mol/LTris（ml）0.1Mol/LHCl（ml）9.108.9525 5 8.067.9025 27.58.92
14、8.7625 7.5 7.967.8225 30.08.758.6025 10.5 7.877.7325 32.58.628.4825 12.5 7.777.6325 35.08.508.3725 15.5 7.667.5225 37.58.408.2725 17.5 7.547.4025 40.08.328.1825 20.0 7.367.2225 42.5（九）三羟甲基甲烷盐酸缓冲液（TrisHCl 缓冲液）不同 pH，0.05Mol/L25ml0.2Mol/L 三羟甲基氨基甲烷加 ml0.1NHCl，加水稀释至 100ml（见下表）附表 6 TrisHCl 缓冲液配制法pH pH23 3
15、70.2Mol/LTris(ml)0.1MHCl(ml) 23 370.2Mol/LTris(ml)0.1MHCl(ml)9.10 8.96 25 5 8.05 7.90 25 27.58.92 8.78 25 7.5 7.96 7.82 25 30.08.74 8.60 25 10.0 7.87 7.73 25 32.58.62 8.48 25 12.5 7.77 7.63 25 35.08.50 8.37 25 15.0 7.66 7.52 25 37.58.40 8.27 25 17.5 7.54 7.40 25 40.08.32 8.18 25 20.0 7.36 7.22 25 42.58.23 8.10 25 22.5 7.20 7.05 25 45.08.14 8.00 25 25.0 25 三羟甲基氨基甲烷（Tris）分子量=121.140
