《人教版选修一课题3《分解纤维素的微生物的分离》ppt课件4》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人教版选修一课题3《分解纤维素的微生物的分离》ppt课件4（15页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、课题课题3 3 分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离 1 纤维素在生物圈的分布状况 2 纤维素酶的组成及作用 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质 植物 的根 茎 叶等器官都含有大量的纤维素 其中棉 花是自然界中纤维素含量最高的天然产物 纤维素酶是一种复合酶 一般认为它至少包括三 种组分 即CX酶 C1酶和葡萄糖苷酶 前两种酶使 纤维素分解成纤维二糖 第三种酶将纤维二糖分解 成葡萄糖 一 纤维素和纤维素酶 二 纤维素分解菌的筛选 1 纤维素分解菌的筛选方法 2 纤维素分解菌的筛选方法的原理 刚果红染色法 这种方法能够通过颜色反应直 接对微生物进行筛选 即 可根据是否产生透 明圈来筛
2、选纤维素分解菌 三 实验操作 土壤取样选择培养梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维 素分解菌的培养基上 挑选产生透 明圈的菌落 选择培养的目的 增加纤维素分解菌的浓度 确保能够从 样品中分离到所需要的微生物 涉及到的微生物技术主要有 培养基的制作 无菌操作技 术 稀释涂布平板法 选择培养基的作用 土壤取样等 本实验流程与课题2的流程的区别如下 课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿 素为惟一氮源的选择性培养基上 直接分离得到 菌落 本课题通过选择培养 使纤维素分解菌得到增 殖后 再将菌液涂布在鉴别培养基上 其他步骤 基本一致 本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同 1 土壤取样 1 取样的环境
3、是怎样的 作出这种选择的理由是 什么 选择纤维素丰富的环境 如树林中多年落叶形成 的腐殖土 多年积累的枯枝败叶等等 生物与环境的互相依存关系 在富含纤维素的环 境中纤维素分解菌的含量相对提高 因此从这种土 壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境 将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集 实 际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境 一般 应将纸埋于深约10 cm左右腐殖土壤中 2 将滤纸埋在土壤中有什么作用 你认为滤纸应 该埋进土壤多深 2 选择培养 1 选择培养的目的 增加纤维素分解菌的浓度 以确保能够从样品中 分离到所需要的微生物 2 制备选择培养基 旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基
4、 为什么 这个培养基对微生物是否具有选择作用 如果具有 是如 何进行选择的 你能否设计一个对照实验 说明选择培养基的作用 液体培养基 配方中无凝固剂 有选择作用 本配方中的碳源是纤维素 所以能分 解纤维素的 微生物可以大量繁殖 用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照 3 操作方法 将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中 将 锥形瓶固定在摇床上 在一定温度下震荡培养1 2天 直至培养液变浑浊 也可重复选择培养 为什么选择培养能够 浓缩 所需的微生物 在选择培养的条件下 可以使那些能够适应这种 营养条件的微生物得到迅速繁殖 而那些不适应这 种营养条件的微生物的繁殖被抑制 因此可以起到 浓缩 的作用 3
5、梯度稀释 按照课题1的稀释操作方法 将选择培养后的培养 基进行等比稀释 稀释最大倍数到106 4 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 1 制备培养基 参照旁栏中的比例 2 涂布平板 将稀释度为104 106的菌悬液各取 0 1ml涂布在培养基上 30 倒置培养 5 挑选产生透明圈的菌落 参照课本刚果红染色法 挑选产生透明圈的菌落 一般即为分解纤维素的菌落 刚果红染色法 方法一 先培养微生物 再加入刚果红进行颜色反应 方法二 在倒平板时就加入刚果红 这两种方法各有哪些优点与不足 这两种方法各有哪些优点与不足 染色法优优 点缺 点 方法一 方法二 颜色反应基本上是纤 维素分解菌的作用 操作繁琐
6、 刚果红会使菌 落之间发生混杂 操作简便 不存在 菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生 模糊透明圈 有些微生物能 降解色素 形成明显的透明 圈 四 结果分析与评价 一 培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛 选出菌落 二 分离的结果是否一致 设置对照 若对照的培养基在培养过程中无菌落 生长则说明培养基制作合格 如果观察到产生透明 圈的菌落 则说明可能获得了分解纤维素的微生物 如果不同 分析产生不同结果的原因 由于在土壤中细细菌的数量远远远远 高于真菌和放线线菌 的数量 因此最容易分离得到的是细细菌 但由于所取 土样样的环环境不同 也可能得到真菌和放线线菌等不同的 分离结结果 五 课题延伸
7、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选 但是这只是分离纯化的第一步 为确定得到的是 纤维素分解菌 还需要进行发酵产纤维素酶的实验 纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸 等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定 2 纤维素酶能够分解 A 纤维素的微生物 B 淀粉的微生物 C 纤维素 D 淀粉 1 下列材料中纤维素含量最高的是 A 杨树 B 小麦 C 玉米 D 棉花 D C 3 刚果红能与哪项物质形成红色复合物 A 纤维二糖 B 纤维素 C 葡萄糖 D 麦芽糖 B 4 寻找纤维素分解菌应到 A 湿润的环境中 B 富含纤维素的环境中 C 富含无机盐的环境中 D 池塘中 B 5 纤维素分解菌的选择培养基有选择作用 原因在于 其含有 A NaNO3 B KCl C 酵母膏 D 纤维素粉 D 6 选择培养时应将锥形瓶固定在 A 桌子上 B 温箱里 C 窗台上 D 摇床上 D 7 选择培养的结果 培养液变 A 清澈 B 浑浊 C 红色 D 产生透明圈 B 8 刚果红染色时 加入刚果红可在 制备培养基时 梯度稀释时 倒平板时 涂布时 培养基上长出菌落时 A B C D C 9 两种刚果红染色法的结果是 A 均会出现透明圈 B 均不会出现透明圈 C 方法一出现 方法二不出现 D 方法一不出现 方法二出现 A
