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1、与耐药性相关的细菌的酶 1 耐药机制 l1灭活酶或钝化酶 l2 抗生素的渗透障碍 l3 靶位的改变 l4 其它 拮抗物 2 细菌在环境中产生多种酶 与细菌的致病 性 侵袭力 耐药性等有关 u 内酰胺酶 u钝化酶 u乙酰转移酶 u酯化酶 3 内酰胺酶 内酰胺酶是一群酶 已知就有170种以上 是细菌 对 内酰胺类抗生素耐药主要作用机制 内酰胺酶通过其作用位点Ser OH对 内酰胺环上的羧 基碳发生亲核攻击使环打开 形成由酯键连接的酰酶 复合物中间体 然后迅速水解酰酶中间体的酯键使酶 再生 释放已失活的 内酰胺部分 细菌因此产生耐药性 其水解效率是细菌耐药性的主 要决定因子 4 内酰胺酶 较常用的是
2、根据一种Ambler分类法分成 A B C D四类 另一常用的是Bush功能分类法 主要的酶有头孢菌素酶 青霉素 酶 广谱酶 超广谱酶 金属酶等 G 球菌产生 内酰胺酶一直较少发生进化 G 杆菌主要产生超广谱 内酰胺酶 ESBLs 尤以大肠埃希 菌 肺炎克雷伯菌 产酸克雷伯菌多见 另一类重要的头孢菌素酶为几乎所有的肠杆菌科 除了沙门菌属 和克雷伯菌属的某些种 和铜绿假单胞菌产生 称为AmpC酶 自然状态下细菌产生此酶的量很少 但某些细菌如阴沟肠杆菌 弗氏枸橼酸杆菌等在 内酰胺类抗生素的作用下可大量诱导产 生 导致细菌对除碳青酶希类之外的所有 内酰胺类抗生素耐 药 5 钝化酶分类 u氨基糖苷类钝
3、化酶 是质粒介导 由G 菌及 部分G 菌产生 已知的钝化酶有三类 乙酰 转移酶 核苷转移酶 磷酸转移酶 u氯霉素乙酰转移酶 灭活氯霉素 u红霉素酶和其他灭活酶 6 超光谱 内酰胺酶 ESBLs 的检测结 果分析 l室内质量控制 l阴性质控 ATCC 25922 l不产ESBL的标准菌株大肠埃希菌 l阳性质控 ATCC 700603 l产头孢噻肟型ESBL的标准菌株肺炎克雷伯菌 7 超光谱 内酰胺酶 ESBLs 的检测结 果分析 执行标准 根据NCCLS对抗菌药物敏感性试验K B法 表型确证试验 本实验室采用Oxoid药敏纸片 头孢他啶 头孢他啶 棒酸 头孢噻肟 头孢噻肟 棒酸 现将2007年以
4、来本实验室对临床送检标本培养出的 136例大肠埃希菌 102例克雷伯菌属的ESBLs表型确 定结果分别进行统计 8 超光谱 内酰胺酶 ESBLs 的检测结 果分析 表1 136 例 大 肠 埃 希 菌 ESBLs 表 型 确 定 结 果 统 计 表 标本类型 总例数 产ESBLs酶例数 ESBLs 阳 性 率 血液 18 6 0 33 尿液 67 5 0 07 痰 51 24 0 4 合计 136 35 0 26 结果显示 血培养标本大肠埃希菌产ESBLs菌株约占33 尿液标本大肠埃希菌产ESBLs菌株约占7 痰标本大肠埃希菌 产ESBLs菌株约占47 9 超光谱 内酰胺酶 ESBLs 的检测
5、结 果分析 表2 35 例 大 肠 埃 希 菌 ESBLs 阳 性 表 型 确 定 结 果 统 计 表 标本类型 头孢他啶型 头孢噻肟型 ESBLs 阳 性 率 头孢他啶型 头孢噻肟型 血液 2 6 0 20 0 86 尿液 2 5 0 25 0 83 痰 4 20 0 16 0 84 合计 6 29 0 17 0 83 附 表示头孢他啶 头孢噻肟同时阳性的表型 表2表明头孢噻肟型为大肠埃希菌产ESBLs的主要表型 约占83 头孢他啶型 占17 该统计结果符合相关文献报导的在中国境内产ESBLs菌株大多为头 孢噻肟型的报道 35例中检测出一例很少见的 头孢他啶和头孢噻肟同时阳 性的表型 通过联
6、系临床了解到 该例标本来自一位患慢性疾病的老年病人 可能与病人的机体免疫状态及长期使用广谱抗生素的既往史密切相关 10 超光谱 内酰胺酶 ESBLs 的检测结 果分析 表3 102 例 克 雷 伯 菌 属 ESBLs 检 测 结 果 统 计 表 肺 炎 克 雷 伯 菌 产 酸 克 雷 伯 菌 标本类型 例数 头孢 头孢 ESBLs 例数 头孢 头孢 ESBLs 他啶型 噻肟型 阳性率 他啶型 噻肟型 阳性率 血液 2 尿液 6 1 0 17 2 痰 87 6 29 0 40 5 1 0 20 合计 95 6 30 0 38 7 1 0 14 表3表明 临床标本肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株占38 其中痰标本占了 40 痰标本克雷伯菌属中产酸克雷伯菌产ESBLs菌株约占20 总的克雷伯菌属为39 为痰中主要产ESBLs菌属 而头孢他啶型与头孢 噻肟型的比例约为1 6 和大肠埃希菌ESBLs表型比例分配基本相同 11 超光谱 内酰胺酶 ESBLs 的检测结 果分析 由于国内医疗界对使用抗生素的控制不 是很严格 加之 内酰胺酶的不断进化发 展 ESBLs的阳性率将随着临床不规范 的用药越来越高 应该引起大家警醒 12 与耐药性相关的细菌的酶 13
