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1、脑脊液和浆膜腔积液检验 1 一脑脊液检查 n脑脊液的生理 n脑脊液标本的采集 n检测项目 n脑脊液检查的临床应用 2 脑脊液生理 n 脑脊液 cerebrospinal fluid CSF n是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体 成人平均总量约150ml n血脑屏障 blood brain barrier BBB 对血浆各种成分通透性各有不同 其中 n通透性高的有 Na Cl Mg离子及乙醇等 n其次为 清蛋白 葡萄糖 Ca离子 尿素和肌 酐等 n最难通过有 Fbg 补体 抗体 胆固醇 胆红 素等 概念 脑脊液 cerebrospinal fluid CSF 血脑屏障 blood brai
2、n barrier BBB 3 生理 70 脉络丛 30 细胞间隙 侧脑室 第三脑室 室间孔 中脑导水管第四脑室 蛛网膜下腔及脑池 中间孔两侧孔 超滤作用 主动分泌 蛛网膜绒毛 血管及神经根间隙 吸收 4 标本采集 nCSF标本一般通过穿刺取得 n部位 腰椎 特殊情况下可由小脑延髓池或侧脑 室 n压力测试 穿刺成功后先作压力测定 正常在80 180mmH2O超过200mmH2O放出CSF量应控 制在2ml内 低于80mmH2O可作动力试验以了解 有无蛛网膜下腔阻塞 n采集 采CSF于3支无菌试管中 每管1 2ml 采 集顺序如下 1细菌学检查 2化学学检查 3理学学检查 如怀疑恶性肿 瘤可再留
3、1 管作细胞 学检查 5 标本采集的注意事项 n细胞破坏或CSF凝固影响细胞计数和分类 n糖分解致GLU结果偏低 n细菌自溶或死亡影响细菌检出率 n化学检查 肝素抗凝 n一般性状检查 EDTA抗凝 送检及时 抗凝剂选择 6 CSF检查项目 显微镜检查 免疫学检查 化学检查 病原学检查 理学检查 7 理学检查 n颜色 n透明度 n凝固性 n压力 8 CSF颜色 9 红色时新旧出血鉴别 10 黄色 黄变症 11 透明度 混浊原因 脑脊液中细胞成分增多 脑脊液中细菌 真菌增多 脑脊液中蛋白质增多 几种常见脑脊液 正常脑脊液 清晰透明 化脓性脑膜炎 结核性脑膜 病毒性脑炎 神经梅毒 明显混浊 毛玻璃样
4、轻度混浊 透明外观 12 凝固性 nCSF的凝固性表现形式 nCSF的凝固性的临床意义 n正常CSF 静置12 24h不形成薄膜 凝块或沉淀 n化脓性 标本静置1 2h可形成凝块或沉淀 n结核性 静置12 24h标本表面有纤细网膜形成 n黄色胶冻 蛛网膜下腔梗阻 n CSF循环受阻 蛋白质高达15g L时 薄膜 pellicle 凝块 clot 沉淀 正常CSF标本 化脓性脑膜炎 结核性脑膜炎 黄色胶冻状 不形成 13 比密测定 n 正常人腰穿CSF比密为 1 006 1 008 n比密增高 见于颅内高压 n比密降低 见于脑脊液分泌增多 14 显微镜检查 1 细胞计数 2 白细胞分类计 数 3
5、 细胞学检查 显微镜检查 15 1 细胞计数 n 细胞计数 n参考值 n1 红细胞 无 n2 白细胞 n成人 0 10 106 L n儿童 0 15 106 L n新生儿 0 30 106 L 细胞总数计数 白细胞计数 1 细胞计数 细胞计数方法 手工显微镜计数 16 2 白细胞分类计数 n方法 直接分类和染色分类 n参考值 n淋巴细胞和单核细胞为主 两者之比约7 3 n中性粒细胞可见少量 n偶见软脑膜和蛛网膜细胞 室管膜细胞 脉络 膜细胞 17 3 细胞学检查 n细胞成分 n可见免疫活性细胞 单核吞噬细胞 多形核白细胞 肿瘤细胞 n细胞收集方法 离心沉淀 细胞玻片离心仪 n染色方法 n可用综
6、合应用多种染色鉴别 n 吖啶橙荧光染色 肿瘤细胞等 nPAS染色 鉴别原淋与腺癌细胞 18 CSF细胞计数和分类的临床意义1 n增高常见于 化脓性脑膜炎化脓性脑膜炎 结核性脑膜炎结核性脑膜炎 新型隐球菌性脑膜炎新型隐球菌性脑膜炎 病毒性脑炎病毒性脑炎 中枢神经系统 感染性疾病 蛛网膜下腔出 血 中枢神经肿瘤 脑寄生虫病 19 白细胞数量细胞分类 化脓性脑膜炎显著升高以N为主 结核性脑膜炎中度升高早期N为主 后期以L为主 可 有浆细胞 病毒性脑膜炎 脑炎 轻度增高以L为主 新型隐球菌性脑 膜炎 中度增高以L为主 1 常见NS系统感染性疾病细胞计数与分类 特点细胞数 10 50 106 L为轻度升
7、高 50 100 106 L为中度 增高 200 106 L以上为显著增高 20 CSF细胞计数和分类的临床意义2 n n n 均匀血性脑脊液 可见大量红细胞 N明显增高 出血2 3天后可见吞噬细胞 细胞数正常或稍高 L为主 可见肿瘤细胞 找到白血病细胞是脑膜白血病证据 细胞数可增高 可见E及浆细胞增高 沉淀可查出虫卵 原虫 幼虫等 2 蛛网膜下腔出血 3 中枢神经肿瘤 4 脑寄生虫病 21 二 化学检查 蛋白质检查 蛋白质定量试验 蛋白质定性试验 葡萄糖测定 氯化物测定 酶学检查 ALT AST CK LD NSE 22 蛋白定性试验 Pandy test Ross Jone test 和
8、Nonne Apelt test 蛋白质与苯酚结合成 不溶性蛋白盐而产生 白色混浊 球蛋白在饱和硫酸铵 溶液中产生白色混浊 或沉淀 参考值 阴性或弱阳性 原理 对球蛋白敏感 灵敏 度较差 灵敏度高 方法学 评价 23 蛋白质定量试验 磺柳酸 硫代硫酸钠 比浊 1 蛋白沉淀剂比浊法 丽春红S 考马斯 亮蓝 2 染料结合比色法 参考值 成人 腰池 200 400mg L 小脑延髓池100 250mg L 脑室 50 150mg L 对灵敏度和精密 度较高 对 pH要求高 简便 快速 无需特 殊仪器 标本量大 对球蛋白和白蛋白沉 淀能力不同精密度差 方法学评价 代表方 法 24 蛋白质检查的临床意义
9、 n1 血脑屏障通透性增加 n脑膜炎 化脓性脑膜炎显著增高 结 核性脑膜炎中度增高 病毒性脑膜炎 轻度增高 n出血 内分泌或代谢性疾病 脑室或 蛛网膜下腔出血 糖尿病毒性神经病 变 甲状腺功能减退 尿毒症及脱水 n药物中毒 如乙醇 酚噻嗪 苯妥因 25 蛋白质检查的临床意义 n2 脑脊液循环障碍 n脑部肿瘤或椎管梗阻如蛛网膜下腔粘连 n蛛网膜下腔梗阻时 蛋白质10g L以上 脑脊液呈胶冻状 有蛋白 细胞分离 现象 n3 鞘内Ig合成增加 n如多发性硬化症 神经梅毒 26 葡萄糖测定 常用方法 n葡萄糖氧化酶 法 n己糖激酶法 特异性更高 n方法学评价 n测定应及时 久 时间放置应加适 量氟化钠
10、抑制细 菌或细胞利用葡 萄糖 n理想采血时间应 在禁食4小时后 参考值 2 5 4 4mmol L 27 临床意义 n1 减低 n 中枢神经系统细菌性 真菌性感染 化脓性感染 时降低最为严重且早期就可明显降低 结核性其次 n 中枢神经系统肿瘤 脑膜瘤时脑脊液葡萄糖含量 明显降低甚至为零 n 脑寄生虫病 脑囊虫病 血吸虫 弓形虫病时 n2 升高 n血糖升高或下丘脑受损伤 28 氯化物测定 n脑脊液中氯化物含量影响因素 n脑脊液自身理化性质 n血浆氯化物含量 n血液PH值影响 n方法 n滴定法 比色法 电量法 离子选择电极法 后者目前常用 n参考值 120 130mmol L 29 氯化物测定的临
11、床意义 n减低 见于 n 细菌性 真菌性脑膜炎 n结核性脑膜炎下降显著 可低于102mmol L n 低氯血症 n呕吐 肾上腺功能减退 n增高 见于 n尿毒症 呼碱 等 30 病原学检查 n1 标本离心取沉淀涂片作 n染色 n 革兰氏染色 抗酸染色 墨汁染色或苯胺黑染 色 荧光染色 n涂片镜检 血吸虫卵 肺吸虫卵 阿米巴 弓形虫等 n2 细菌培养 血平板 巧克力平板CO2 环境培养 中国蓝平板 动物接种 真 菌培养 31 脑脊液检查的临床应用 n1 中枢神经系统感染性疾病的诊断与鉴 别诊断 n2 脑血管病诊断与鉴别诊断 n3 脑肿瘤诊断 n4 中枢神经系统疾病治疗及疗效观察 32 常见中枢神经
12、感染疾病CSF检查特 点 33 二 浆膜腔积液检验 n浆膜腔 serous cavity 是人体的胸腔 心 包腔 腹腔和关节腔的统称 正常情况下仅含 少量液体起润滑作用 n浆膜腔积液 病理情况下浆膜腔内大量液体潴 留形成的积液 根据产生原因及其性质不同分 为 n漏出液 transudate n渗出液 exudate 34 漏出液和渗出液 n漏出液 n是通过毛细血管滤出 并在组织间隙或浆膜腔 内积聚的非炎症性组织 液 多为双侧性 n原因有 n毛细血管流体静压增高 n血浆胶体渗透压减低 n淋巴回流受阻 n钠水潴留 n渗出液 n是毛细血管通透性增高 以致液体 血液内大分子 物质和细胞从血管渗出至 血
13、管外 组织间隙及浆膜 腔形成的积液 n原因 n 微生物的毒素 n缺氧 n炎性介质等 漏出液 渗出液 35 标本采集与保存 n 采集 分装4管 n第1管 细菌学检查 注意无菌 及时 n第2管 化学检查 n第3管 一般性状检查 理学 n第4管 细胞检查 n理学和细胞学检查可加EDTA K抗凝 n化学检查可加肝素 穿刺术采集 n第1管 细菌学检查 注意无菌 及时 n第2管 化学检查 n第3管 一般性状检查 理学 n第4管 细胞检查 保存 n理学和细胞学检查可加EDTA K抗凝 n化学检查可加肝素 36 检查项目 理学检查 免疫学检查 显微镜检查 化学检查 量 比密 透明度 颜色 粘蛋白定性 蛋白定量
14、 乳酸铁测定 葡萄糖测定 酶学检查 细胞计数 细胞分类 染色体检查 细胞学检查 CEA AFP TAP CA 125 SCCP 细菌学检查 涂片染色 培养 动物接种 37 理学检查 n1 量 n正常时量较少 n病理情况下液体较多其程度与病变轻重及部 位有关 n2 比密 n 渗出液 1 018 n漏出液 1 015 38 一般性状检查 n3 颜色 n 正常为清亮 淡黄色液体 n病理时变化多样 一般渗出液色深些 n1 红色 淡红 鲜红 暗红等 多由穿刺损伤 结核 肿瘤 出血性疾病所致 n2 白色 呈脓性或乳白色 多因白细胞增加 胸导 管阻 塞破裂 大量脂肪变性细胞 n3 绿色 铜绿假单胞菌感染 n
15、4 棕色 阿米巴感染 n5 黄色或淡黄 黄疸 n6 黑色 曲霉菌感染 n7 草黄色 尿毒症引起的心包积液 39 一般性状检查 n4 透明度 与其所含细胞 细菌 蛋白质量 有关 n正常浆膜腔液 清晰透明 n渗出液 不同程度混浊 n乳糜液 脂浊 n漏出液 清晰透明 n5 凝固性 n正常 无凝块 n漏出液 无凝块 n渗出液 有凝块 也可因纤溶酶溶解无凝块 40 化学检查 n1 粘蛋白定性试验 Rivalta test n粘蛋白等 电点在PH3 5 在稀酸溶液中产生白色 沉淀 漏出液为阴性 渗出液多为阳性 n2 蛋白质定量 n1 方法与血清蛋白定量一致 n漏出液一般小于25g L 电泳清蛋白相对较高
16、大分子蛋 白相对较少 n渗出液大于30g L 电泳谱与血清蛋白电泳一致 n 2 常以积液蛋白与血清蛋白比大于0 5为渗出液 的判断指标之一 41 化学检查 n3 葡萄糖定量 n漏出液葡萄糖含量较血糖稍低 n渗出液多明显降低 3 33mmol L n4 乳酸铁 lactate iron 测定 n 鉴别细菌性和非细菌性感染 升高提示细菌 感染 42 显微镜检查1 n1 细胞计数 nRBC意义不大 nWBC n渗出液 500 106 L n漏出液 100 106 L n2 脱落细胞学检查 HE染色 组化等 n3 寄生虫及虫卵 离心镜检 4 染色体检查 数量和形态异常 43 显微镜检查2 44 细菌学检查 n 1涂片染色 n革兰氏染色 n抗酸染色 n2培养 n细菌培养 n真菌培养 n厌氧培养 n3动物接种 45 临床应用 n1 渗出液与漏出液鉴别 n2 寻找病因 n3 结核与恶性积液鉴别 良性与恶性积 液鉴别 46 结核性与恶性胸腔积液鉴别表 47 良性与恶性腹腔积液鉴别表 48 漏出液与渗出液鉴别表 49 谢谢 50 51
