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1、实习实习实习实习 注意事注意事项项项项 实验实验 室要求 实习实习 目的 学习习方法 绘图绘图 要求 1 实验实验 室要 求 n实验实验 室要求 n 三勿 勿迟到 勿衣冠不整 勿带食 品 n严格按照实验规 程办事 爱护实验设备 发现损 坏切片或设备要及时登记 以 便实验室工作人员及时更换或维修 n保持实验室清洁卫生 不要随地吐痰 乱 扔纸屑等废弃物 n班干安排课后值日生 清扫地板 清理桌 凳 关好门窗 水电 实验要求 实习实习 目 的 学习习方法绘图绘图 要求 2 实习实习 目的 n通过观察切片 观看录像 多媒体课件 与图片 模型等 加深对组织 与器官基 本结构的认知 从而更加深刻透彻地掌握
2、组织学的基本理论 实习目的 实验实验 室要 求实习实习 目 的 学习习方法绘图绘图 要求 3 n学习过习过 程中务务必充分使用教材 实习实习 指 导导 图谱图谱 录录像 多媒体课课件 模型等 上课前先预习有关理论课内容 自行按照 实习指导要求观察切片 做到 三多 多 动手 多动口 多动脑 前后联系 对 照学习 融会贯通 达最佳效果 n正确理解平面与立体 局部与整体 结结构 与功能 静态态与动态动态 的关系 组织切片是经过一系列复杂的过程制作 而成的 一般仅取组织或器官的一部分 由于切片部位和方向的不同 可以呈现不 同的形态结构 HE切片制作方法 实验实验 室要 求实习实习 目 的 学习习方法绘
3、图绘图 要求 学习方法 4 n从不同水平观观察辨别组织别组织 切片结结构特点 同一组织的不同切片 在光镜下也可有不同 的表象 有时为人工假象 这是由于制作 切片时组织 或器官的生理状态 固定及染 色方法的不同造成的 n按照由肉眼 低倍 高倍镜顺镜顺 序观观察切片 肉眼 直接观察标本的大小 形状与颜色 低倍 移动标本 全面观察 基本认识各结 构的大致分布 选择典型局部高倍观察 高倍 低倍下有目的对准某结构加以放大 对其深入观察 实验实验 室要 求实习实习 目 的 学习习方法绘图绘图 要求 学习方法 5 n绘图绘图 工具 彩色铅笔 红蓝铅 笔 橡 皮 尺规等 n绘图绘图 格式 见图例 章节内容 如
4、 第一周实验 上皮组织 居中 所绘图约 占整个页面的1 2或2 3 居中或 偏无注字一侧 图名 图正下方 居中 应写明结构与 内容 如 小肠绒毛纵切面结构 图名下隔1 2行注明 材料嗜碱性 basophilia n特殊染色 镀银染色 甲苯胺蓝染色 台盼蓝染色等 光镜技术 电镜技术 组织化学 放射自显 影 图像分析 细胞培养 组织工程 图4 图 5 6 研究内容 发发展简简 史研究技术术 光镜镜使用方法 17 透射电镜术电镜术 transmission electron microscopy TEM n用于观察组织细 胞的超微结构 n戊二醛 锇酸双重固定 树脂包埋 超 薄切片 50 80nm 厚
5、 电子染色 醋酸 铀 柠檬酸铅 n根据电子束在不同结构上被散射程度的 差异表现为电 子密度高 黑或深灰色 和电子密度低 浅灰色 图 7 光镜技术 电镜技术 组织化学 放射自显 影 图像分析 细胞培养 组织工程 研究内容 发发展简简 史研究技术术 光镜镜使用方法 18 扫扫描电镜术电镜术 scanning electron microscopy SEM n用于观察组织细 胞表面结构 具有真实 的立体感 无需制备切片 图 8 光镜技术 电镜技术 组织化学 放射自显 影 图像分析 细胞培养 组织工程 研究内容 发发展简简 史研究技术术 光镜镜使用方法 19 组织组织 化学术术 histochemis
6、try n应用化学 物理 生物化学 免疫学或分 子生物学的原理和技术 与组织学技术结 合而产生 在组织切片显示某种物质的存 在和分布状态 n分类 一般组织化学术 糖 脂 酶 核酸染色 免疫组织化学术 抗原与抗体特异性结合 原理 检测组织 中的肽与蛋白质 原位杂交术 核酸分子杂交 检测DNA mRNA片断 图 9 图 10 13 图 14 光镜技术 电镜技术 组织化学 放射自显 影 图像分析 细胞培养 组织工程 研究内容 发发展简简 史研究技术术 光镜镜使用方法 20 放射自显显影术术 autoradiography n概念 通过活细胞对某种放射性物质的 特异性摄入 以显示该物质在组织和细 胞内
7、的分布 含量和代谢过程 借以反 映细胞的功能状态 n应用举例 用3H标记的胸腺嘧啶核苷研究DNA合 成和细胞增殖状态 用125I 观察甲状腺滤泡内碘化部位 图 15 光镜技术 电镜技术 组织化学 放射自显 影 图像分析 细胞培养 组织工程 研究内容 发发展简简 史研究技术术 光镜镜使用方法 21 图图像分析术术 image analysis 又称形态计态计 量术术 morphometry n应用数学和统计学原理对组织 切片提供的 平面图像进行分析 从而获得立体的组织 细胞内有形成分的数量 体积 表面积等 参数 从量的角度显示结构与功能的关系 体视视学 stereology n根据连续的组织切片
8、应用计算机进行三维 重建 以获得微细结构的立体模型 图 16 光镜技术 电镜技术 组织化学 放射自显 影 图像分析 细胞培养 组织工程 研究内容 发发展简简 史研究技术术 光镜镜使用方法 22 细细胞培养术术 cell culture n把从机体取得的细胞在体外模拟体内的 条件下进行培养 培养组织块 或器官则 称组织培养术或器官培养术 n用于研究细胞 组织的代谢 增殖 分 化 形态和功能变化 各种理化因子对 活细胞的影响 n培养条件 营养 生长因子 pH值 渗 透压 O2和CO2浓度 温度 控制污染 n用相差显微镜观察 光镜技术 电镜技术 组织化学 放射自显 影 图像分析 细胞培养 组织工程
9、研究内容 发发展简简 史研究技术术 光镜镜使用方法 23 组织组织 工程 tissue engineering n用细细胞培养术术在体外模拟拟构建机体组织组织 或器官的技术术 n正在构建的有皮肤 软软骨 骨 肌腱 骨 骼肌 血管 角膜等 其中以组织组织 工程 皮肤较为较为 成功 已成为为商品用于治疗烧疗烧 伤伤 皮肤静脉性溃疡溃疡 等疾病 图 17 18 光镜技术 电镜技术 组织化学 放射自显 影 图像分析 细胞培养 组织工程 研究内容 发发展简简 史研究技术术 光镜镜使用方法 24 n研究包括四个方面 种子细细胞 即增殖旺盛的细细胞 多为为干 细细胞 细细胞外基质质 可用生物材料 如牛胶原
10、和人工合成高分子材料 构建组织组织 或器官 即把细细胞置于细细胞 外基质质中进进行三维维培养 并形成所需要 的形状 将构建物移植机体的方法 图 19 光镜技术 电镜技术 组织化学 放射自显 影 图像分析 细胞培养 组织工程 研究内容 发发展简简 史研究技术术 光镜镜使用方法 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 本章重点内容 n组织组织 学 组织组织 嗜酸性 嗜碱性的概念 n组织组织 学学习习方法要点 n石蜡切片术术和超薄切片术术的基本原理 n光镜镜的使用方法 nHE染色法 50 图
11、图1 心脏脏 左 器官 右 组织组织 光镜图镜图 上皮组织 结缔组织 肌组织 51 图图2 心脏脏 心肌细细胞光镜图镜图 52 图图3 心脏脏 上 肌丝结丝结 构电镜电镜 图 下 肌丝丝蛋白质质构成 模式图图 肌动蛋白 原肌球蛋白 肌钙蛋白 细肌丝 粗肌丝 肌球蛋白杆 肌球蛋白头 53 图图4 HE染色 垂体远侧远侧 部 54 图图5 镀银镀银 染色 小脑脑皮质质神经经元 55 图图6 醛醛复红红与偶氮焰红红染色染色 肥大细细胞和弹弹性纤维纤维 56 图图7 透射电镜图电镜图 浆细浆细 胞 57 图图8 扫扫描电镜电镜 图图 血细细胞 58 图图9 PAS反应应 小肠肠上皮杯状细细胞的粘原颗颗
12、粒 59 图图10 免疫组织组织 化学原理模式图图 抗原 抗体 荧光素 辣根过氧化物酶 胶体金 60 图图11 免疫组织组织 化学 荧荧光素标记标记 毛细细血管内皮细细胞呈vWF阳性 61 图图12 免疫组织组织 化学 辣根过过氧化物酶标记标记 胰岛岛B细细胞呈胰岛岛素阳性 62 图图13 免疫组织组织 化学电镜电镜 图图示上皮细细胞膜MAM 6蛋白 A 胶体金标记标记 B 辣根过过氧化物酶标记标记 63 图图14 原位杂杂交 脐脐静脉内皮细细胞呈心房钠钠尿肽肽阳性 64 图图15 放射自显显影 示幽 门门部胃小凹底的干细细胞 3H标记标记 的胸腺嘧啶嘧啶 核苷标记标记 65 图图16 计计算机三维维重建 示肝小叶血管 66 图图17 体外培养的成纤维细纤维细 胞 左 HeLa细细胞 右 倒置显显微镜图镜图 67 图图18 体外培养的平滑肌细细胞 免疫组织组织 化学染色显显示肌动动蛋白 68 图图19 实验实验 中的组织组织 工程耳 69
