半抗原免疫原的制备

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实验一 半抗原免疫原的制备,实验目的:1 了解半抗原免疫原的合成方法及基本原理;2 将半抗原吲哚乙酸用混合酸酐法与载体蛋白牛血清白蛋白偶联。,吲哚乙酸,分子量: 175.18,半抗原-载体连接方法3,氯甲酸异丁脂法,半抗原-COOH,载体蛋白-NH2,Cl-COO-CH2CH(CH3)2,半抗原-COO-COO-CH2CH(CH3)2,半抗原-CO-NH-载体蛋白,实验原理:,HO-CH2CH(CH3)2,试剂和仪器:试剂:吲哚乙酸(IAA),牛血清白蛋白(BSA),三正丁胺,N-N二甲基甲酰胺(DMF),氯甲酸异丁酯,NaOH;仪器:反应器,磁力搅拌器,微量加样器,滴管等。,实验步骤:52.3mgIAA 2mlN-N二甲基甲酰胺(DMF) 75l三正丁胺 40l氯甲酸异丁酯 磁力搅拌分钟 形成IAA混合酸酐210mgBSA 11ml蒸馏水11mlDMF 420l1mol/lNaOH 搅拌,实验步骤:将IAA混合酸酐逐滴加入到BSA溶液中继续搅拌1h200l1mol/lNaOH搅拌5h反应物装入透析袋 对10%DMF透析d 对蒸馏水透析4d取出反应物分装-20 保存,不断搅拌,思考题:小分子半抗原为什么要与载体蛋白先偶联才能作为免疫原?载体蛋白的选择原则。半抗原与载体偶联时,因其所带基团的不同需不同连接方法,试加以简述。,

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