《毒理学外源化学物的一般毒性》由会员分享，可在线阅读，更多相关《毒理学外源化学物的一般毒性（57页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、General Toxicity of Xenobiotics 外源化学物的一般毒性 毒性试验设计 实验动物的选择 受试物的处理 染毒方法 剂量选择 毒作用观察 实验动物的选择 哺乳动物 近交系 Inbred Strain 动物经过相当于20代全同胞兄妹单线连续繁殖所得的动物 近交系动物各条染色体上的基因趋于纯合 品系内个体差异趋于零 近交系数大于98 6 品系 保持有特殊的具有遗传特性的突变基因的品系动物 突变系 Mutant Strain 两个近交品系动物之间进行有计划交配所获得的第一代动物 杂交群 Hybrid Strain 动物在开放系统的动物室内饲养 空气未经过净化 动物本身所携带的
2、微生 物状况不明确 要求不携带主要人兽共患病和动物烈性传染病病原 普通级动物 清洁级动物 无传染病的健康动物 不带有对人或动物本身致病的微生物 但不能排除可 经胎盘屏障垂直传播的微生物 无特定病原体 Specefic Pathogen Free SPF 动物 在无菌屏障系统中 剖腹取出胎儿 饲养繁育在无菌隔离器中 饲料 饮水 经过消毒 定期检验 证明动物体内外均无一切微生物和寄生虫的动物 无菌动物 不带有人兽共患病原 烈性传染病病原 常见传染病病原或对实验研究干扰 大的病原体的动物 实验动物的选择 种属和品系 年龄和体重 性别 数量与分组 预检与前处理 年龄和体重 同一批试验动物体重变异范围不
3、应超过该批动物平均体重的20 性别 若具有性别差异 需分别求出雌性与雄性动物各自的LD50 如果试验是为致畸试验作准备 可仅用雌性动物 一般选敏感的性别或雌雄各半 依试验而定 染毒期限越长 开始试验时动物年龄越小 年龄和体重 数量与分组 狗等大动物每组6只 分组遵循随机化原则 选择健康动物 1 2周的检疫期 预检 Acclimation 大 小鼠等小动物每组10只 染毒途径的选择 模拟人在生活和生产环境中 实际接触受试物的途径和方式 便于不同化学物毒性大小的比较 考虑受试物的性质和用途 考虑受试物毒性评价程序的要求 染毒途径 呼吸道 消化道 皮肤 静脉注射 腹腔注射 经呼吸道接触 静式吸入 动
4、式吸入 将实验动物放入附有气体搅拌装置的密闭良好的染毒柜内 一次性输入气态受试物或挥发性液体 使柜内空气中受试物 达到所需浓度 对实验动物染毒一定时间 连续不断地送入含有一定浓度化学物的新鲜空气 同时排出等 量的空气 实验动物暴露于相对稳定的一定浓度的化学物 静态染毒柜 静态染毒柜工作原理 染毒前染毒开始后 http www hope 染毒柜 急性毒性试验 急性毒性试验的目的 测定LD50等急性毒性参数 进行急性毒性分级 初步评价毒效应特征 可能的靶器官和致死原因 为机制研究提供线索 初步评价剂量 反应关系与对人体产生损害的危险性 为亚慢性 慢性毒性作用试验的剂量设计及 观察指标选择提供参考依
5、据 研究化学物急性中毒的预防和治疗措施 染毒前处理 经消化道染毒时 试验前对动物禁食 大鼠 小鼠 隔夜禁食 染毒后禁食2h 大动物 上午喂食前染毒 禁食期间保障饮水 急性毒性试验 毒作用观察 中毒体征及发生过程 体重 病理 生化检查 死亡情况和时间分布 观察时间和周期 体重可以反映动物中毒后的整体变化 脏器大小 外观 色泽 充血 出血 水肿 生化指标测定 组织病理学检查 测定外源化学物的LD50 一般要求计算接触后14天内的总死亡数 记录每只动物死亡的时间 及各剂量组动物的死亡数 急性毒性试验 毒性 分级 大鼠一次经口 LD50 mg kg 大鼠吸入4小时 6只 死亡2 4只 ppm 兔经皮
6、LD50 mg kg 对人可能致死的估计量 g kgg 60kg 剧毒0 0 0 0 0 1 高毒1 10 5 0 05 3 中等毒50 100 44 0 5 30 低毒500 1000 350 5 250 实际 无毒 5000 10000 2180 15 1000 外源化学物急性毒性分级 WHO Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals GHS http www unece org 分级 大鼠经口 LD50 mg kg 大鼠经皮 LD50 mg kg 4h 大鼠吸入 LC50 mg m3 2
7、h 剧毒0 0 0 高毒5 20 20 中等毒50 200 200 低毒500 2000 2000 农药的急性毒性分级 中国 急性毒性 分级 大鼠经口 LD50 mg kg 大致相当于人的致死剂量 mg kgg 人 极毒0 稍尝0 05 剧毒1 500 0 5 中等毒51 4000 5 低毒501 30000 50 实际无毒5001 250000 500 无毒15000 500000 2500 食品急性毒性分级法 中国 1994 蓄积毒性试验 蓄积作用 Accumulation 机体反复多次接触化学物 当化学物进入 机体的速度或总量超过代谢转化排泄的速 度或总量时 化学物或其代谢产物在机体 内
8、逐渐增加并贮留的现象 物质蓄积 Material Accumulation 功能蓄积 Functional Accumulation 机体出现了毒作用表现 蓄积毒性试验的目的 通过试验求出蓄积系数K 了解化学毒物蓄积毒性的强弱 为慢性毒性试验及其它相关试验的剂量选择提供参考 蓄积毒性试验方法 蓄积系数法 生物半减期法 剂量递增法 1 5 0 1LD50 4天 1 52 0 1LD50 4天 1 53 0 1LD50 4天 染毒期间定期称动物体重 调整剂量时按实测体重 蓄积系数法 1 0 1LD50 4天 1 54 0 1LD50 4天 试验组累积发生一半动物死亡即可终止试验 接触剂量已累积达到
9、5个LD50剂量 21天 也可终止试验 剂量固定的20天蓄积法 每组10只动物 雌雄各半 每日染毒 常为灌胃 一次 连续染毒20天 蓄积系数法 对照组 染毒组1 剂量 LD50 染毒组2 剂量 LD50 染毒组3 剂量 LD50 染毒组4 剂量 LD50 1 20 1 2 1 5 1 10 A 1 44 a t 1 2 Use of DDT was banned in the United States in 1972 because of its persistence its tendency to bioaccumulate and its adverse impacts on repr
10、oduction especially in birds United States Fish and Wildlife Service DDT accumulation in the food chain 亚慢性毒性试验 亚慢性毒性试验的目的 确定LOAEL和NOAEL 初步提出此受试物的安全限量 参考数值 确定受试物亚慢性毒效应谱 毒作用特点和靶器官 为慢性毒性试验的剂量设计及观察指标选择提供依据 研究受试物亚慢性毒性损害的可逆性 比较不同动物物种毒效应的差异 为受试物 毒作用机制研究和将研究结果外推到人提供依据 亚慢性毒性试验方法 一种啮齿类 大鼠 一种非啮齿类 犬 雌雄各半 断乳不久
11、染毒途径主要经口 呼吸道和皮肤 动物数量 每组每性别啮齿类 10只 非啮齿类 4只 对照组 低剂量组 NOAEL 中剂量组 LOAEL 高剂量组 1 20 1 5 LD50 组距 3 10倍 亚慢性毒性试验的观察指标 一般性指标 外观体征症状 行为活动 动物体重与摄食 食物利用率 是指动物每食入100g饲料所增长的体重克数 血液学检查 血细胞计数 血红蛋白定量 血液生化检查 肝肾功能 尿液检查 脏器系数 某脏器的湿重与单位体重的比值 通常以100g体重计 实验室检查 系统尸检和病理学检查 生物学标志物 慢性毒性试验 慢性毒性试验的目的 确定LOAEL和NOAEL 为危险性评价和制定安全限量 提
12、供依据 确定受试物慢性毒效应谱 毒作用特点和靶器官 研究受试物慢性毒性损害的可逆性 比较不同动物物种毒效应的差异 为受试物 毒作用机制研究和将研究结果外推到人提供依据 慢性毒性试验方法 一种啮齿类 大鼠 一种非啮齿类 犬 雌雄各半 初断乳 染毒途径主要经口 呼吸道和皮肤 对照组 低剂量组 1 100 LOAEL或 1 1000 LD50 中剂量组 1 50 1 10 LOAEL 1 100 LD50 高剂量组 1 5 1 2 LOAEL 1 10 LD50 组距 5 10倍 动物数量 试验结束时每组每性别啮齿类 10只 非啮齿类 4只 慢性毒性试验的观察指标 一般性指标 外观体征症状 行为活动
13、 动物体重与摄食 食物利用率 是指动物每食入100g饲料所增长的体重克数 血液学检查 血细胞计数 血红蛋白定量 血液生化检查 肝肾功能 尿液检查 脏器系数 某脏器的湿重与单位体重的比值 通常以100g体重计 实验室检查 系统尸检和病理学检查 生物学标志物 亚慢性毒性试验的阳性指标 标准操作规程 Standard Operating Procedure SOP 良好实验室规范 Good Laboratory Practice GLP GLP embodies a set of principles that provides a framework within which laboratory
14、 studies are planned performed monitored recorded reported and archived These studies are undertaken to generate data by which the hazards and risks to users consumers and third parties including the environment can be assessed for pharmaceuticals only preclinical studies agrochemicals cosmetics foo
15、d additives feed additives and contaminants novel foods biocides detergents etc GLP helps assure regulatory authorities that the data submitted are a true reflection of the results obtained during the study and can therefore be relied upon when making risk safety assessments A SOP is a written document instruction detailing all steps and activities of a process or procedure These should be carried out without any deviation or modification to guarantee the expected outcome 亚 慢性毒性试验的观察指标
