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1、RNA相关知识及提取原理一一RNA的梨解原理么异硫氰酸胍/苯酚法V细胞在变性剂异硫氰酸胍的作用下被裂解,同时核虾白体上的蛋白变性,核酸释放Y释放出来的DNA和RNMA由于在特定pH下溶解度的不同而分别位于整个体系中的中间相和水相,从而得以分离6胍盐/8-巯基乙醇法丫盐酸胍裂解样本,抑制RNase的活性丫8-巯基乙醇变性蛋白巳.g日薯国ERNA相关知识及提取原理一一RNA各附尽理沉派法介质吸附力吸附材料纯化原理1_低益高PH值结台被戛阴离子交换树脂高盐低PH值洗脱碟珠磁性微粒挂上不同基团可吸附并携带RNA.TMNG日曹切RNA相关知识及提取方法原理一RNA提取流程巳实验举例及实验中注意点志特殊组
2、织FINA的捐重一RNA的评价与鉴定l一RNA的保护(TIANGE四吴吴吴_RNA提取流程1、样本前处理2、细胞裂解3、RNA的纯化及获得文根RNA提取流程一一样品前处理注意点选择新鲜血液,不得超过4小时鲜组织，生长旺盛的组迷择处于生长旺盛的时期收集细腓穴根A1选择新鲜的幼嫩组织RNA提取流程一一样品前处理中万何保府样序将新鲜血液先进行红细胞裂解,得到的白细胞;后加入一定量的TRNzol,-70C保存较长时间-一一夜氨或加入RNase抑制剂中保有蒙免反复冻融去掉培养基,加入一定量TRNzo170保存较长时间RNA提取流程恍序前处理的目的:高散,均一,细胞集或细胞液白样品的前处理方式液氮研磨匆浆或液氮研磨应用红细胞裂解液处理蛋白酶K处理四国国邦亿TiANeEi一RNA提取流程一一祥品前处理Q&AQ-1:样品量是否越多越好?t不是、移-一一大春RNA得根|/皙中各温温昌皇要林应按比得-率实际得率处理样品量rCTIANGE余RNA提取流程一一桦品前处理Q&AQ-2:如何保证研磨过程和匀浆中RNA不被降解?A-2:研磨过程要迅速,名时尽量谴免外源RNA酶污染;匀栓过程中一定要保证组纸积裂解深充分接触,命量在匀浆前将组织低温切割成小块加入裂解液中,用腾保RNA不被降解。RNA提取流程1、样本前处理2、细胞裂解办3、RNA的纯化及获得文标在稣d八
