《谷氨酰胺通过一个Kras基因调控代谢途径促进胰腺癌生长》由会员分享，可在线阅读，更多相关《谷氨酰胺通过一个Kras基因调控代谢途径促进胰腺癌生长（35页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、谷氨酰胺通过一个Kras基因调控的代谢途径促进胰腺癌的生长 臧诗蕾 ME1 malicenzyme 苹果酸脱氢酶MDH1 malatedehydrogenase 苹果酸酶OAA oxaloacetate 草酰乙酸GOT1 aspartatetransaminase 天冬氨酸转氨酶1 提要 目录 研究历程 Gln Glu Glu KG 确证转氨酶GOT1 GOT1对Gln代谢的影响 4 1 2 3 Asp生物合成的路径探索 该通路在PDAC生长中的必需性 Kras基因的调控 结论和讨论 8 5 6 7 研究基础 Gln在PDAC中的重要性 PDAC pancreaticductaladenoca
2、rcinoma 胰导管癌 Figure1 aPDACproliferationrequiresbothglucoseandglutamine Cellswereplatedinthecompletemedia 10mMglucoseand2mMGln whichwasreplacedthefollowingdaywithglucoseorGln freemediumsupplementedwith10 dialyzedFBS 1 Gln Glu 1 Gln Glu 探索Gln代谢在PDAC生长中的作用 RNAi GLS GFP 绿色荧光蛋白 GLS 谷氨酰胺酶 glutaminase 是酰胺酶
3、的一种 是一种催化L 谷氨酰胺水解成L 谷氨酸和氨的反应的酶 1 Gln Glu 探索Glu在PDAC生长中的作用 Glu能够在Gln缺乏时维持肿瘤生长 1 Gln Glu Glu可以通过两条路径转化成 KG 酮戊二酸 2 Glu KG 单独的 KG不能在缺乏Gln时维持肿瘤细胞生长 但是和NEAA联用可以维持肿瘤细胞的增殖 2 Glu KG 2 Glu KG 验证转氨酶在PDAC代谢Gln中的重要性 方法 3 确证转氨酶GOT1 验证转氨酶在PDAC代谢Gln中的重要性 结果 3 确证转氨酶GOT1 验证是哪种转氨酶 3 确证转氨酶GOT1 3 确证转氨酶GOT1 3 确证转氨酶GOT1 探
4、究GOT1在Gln代谢中发挥的作用 4 GOT1对Gln代谢产物的影响 探究GOT1在Gln代谢中发挥的作用 4 GOT1对Gln代谢产物的影响 磷酸戊糖途径 4 该通路对Gln代谢氧化还原平衡的影响 DCFDA 荧光探针进行活性氧检测G6PD 葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 IDH1 异柠檬酸脱氢酶 各通路关键酶对ROS的影响 4 该通路对Gln代谢氧化还原平衡的影响 OAA malate过程对ROS的影响 4 该通路对Gln代谢氧化还原平衡的影响 苹果酸对ROS的影响 4 该通路对Gln代谢氧化还原平衡的影响 Gln代谢通路模型 5 Asp生物合成的路径探索 Gln Asp中关键酶确证 5 Asp
5、生物合成的路径探索 验证该路径的其他部分是否为PDAC生长所必需 6 该通路在PDAC生长中的必须性 ASP KG可以缓解PDAC缺乏Gln GLS和GOT1干扰时促进肿瘤生长 部分缓解Gln缺乏或GOT1干扰 GOT1存在 OAA 苹果酸 6 该通路在PDAC生长中的必须性 证明OAA或苹果酸是通过平衡氧化还原状态维持细胞增殖 6 该通路在PDAC生长中的必须性 体内实验 移植瘤 6 该通路在PDAC生长中的必须性 正常细胞的对照试验 6 该通路在PDAC生长中的必须性 Kras基因在Gln代谢中的作用malldevelopedbyGu GOT1和GLUD1转录水平 GOT1和GLUD1蛋白
6、表达水平 对抑制剂的敏感性 7 Kras基因的调控 Kras基因在Gln代谢中的作用 Kras干扰后 在转录和蛋白水平GOT1减少 GLUD1增加 PDAC细胞对AOA敏感 而EGCG无太大影响Kras干扰后 细胞对AOA具有一定的抵抗力 对EGCG反而有一定的敏感性 7 Kras基因的调控 结论 该文章揭示了PDAC细胞代谢必须的一条路径 即Gln通过转氨酶GOT1和GOT2代谢 这些反应使细胞质的Asp转化成OAA 苹果酸 然后变成丙酮酸维持PDAC细胞生长 同时维持细胞氧化还原状态的平衡 而且此路径并不是正常细胞所必需的 讨论 1 GOT1在PDAC中是一条有别于正常细胞代谢的途径 可否探索其在肺癌中是否存在 2 在确证天冬氨酸转氨酶GOT1时 EGCG和AOA的给药剂量不同 是否为一个很可靠的对照 3 该文章对其研究通路的每一步反应时从代谢底物的分析循序渐进 步步论证 这种研究方法为我们提供一个思路 4 本文中的Gln代谢通路通过维持癌细胞细胞氧化还原平衡促进癌细胞生长 我们的谷氨酰胺药物作用机制是否有打破癌细胞氧化还原平衡状态的作用 谢谢
