《临床血液学基础检验常见问题的应对 ppt课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《临床血液学基础检验常见问题的应对 ppt课件（70页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、临床血液学基础检验 常见问题的应对 崔巍 中国科学院北京协和医院 医学实验室质量和能力认可准则 1 范围 2 规范性引用文件 3 术语和定义 4 管理要素 5 技术要素 6 附录 CNAS CL43 医学实验室质量和能力认可准则 在临床血液学检验领域的应用说明 5 4 检验前程序 5 4 2 出凝血检验 应使用枸橼酸钠抗凝剂 血液与抗凝剂的体积比一般为9 1 当标本HCT 0 55时 应对血液与抗凝剂的体积比调整 红细胞比容 HCT 增高的处理 HCT 55 时 血浆相对减少 调整抗凝剂 采血量不变 Hct增大 所需抗凝剂减少 总量减少 所需抗凝剂 ml 100 Hct 血液 ml 0 001
2、85 针对3ml血量1 9抗凝的采血管 取出多余抗凝剂 多余抗凝剂 ml 0 3 ml 所需抗凝剂 ml 用注射器取2 7ml静脉血 因取出抗凝剂过程破坏采血管 负压 需告知临床用注射器采血后 取下针头 缓慢注射 5 4 检验前程序 5 4 8 应根据检验项目明确列出不合格标本的类型 如有凝块 采集量不足 肉眼观察有溶血的标本等 和处理措施 不合格标本处理 高脂血 乳糜血 处理方法 10000g超速离心15min 取下层清亮血浆测定 采集量不足 凝块 溶血标本 影响 血细胞破裂后 可以释放多种物质 激活凝血系统 处理方法 重新抽血 5 5 检验程序 5 5 1 应制定如下标准 程序 血细胞分析
3、的显微镜复检标准 复检规则设置流程 确定方案确定方案 仪器校准 比对 确定镜检阳性标准 双盲法 仪器检测和镜检 设定 调整复检规则 满足预设定目标 验证实验 N Y 实验方案 实验仪器 覆盖每个系列 室间质评合格 实验目的 通用同一规则 个性化规则 同一份标本 规则可操作性 标本量 镜检人员 预期目标 漏诊率 临床可接受水平2 n异型淋巴细胞 5 n存在异常红细胞 n可见NRBC n存在巨大血小板 n存在血小板聚集 统计分析 复检规则设置流程 确定方案及目标 仪器校准 比对 确定镜检阳性标准 双盲法 仪器检测和镜检 设定 调整复检规则 满足预设定目标 验证实验 N Y 复检率20 30 假阴性
4、 5 血液病患者不能漏诊 验证参考复检规则 阳性率假阳性率 阴性率假阴性率 符合率推片率 XE 210014 23 23 71 59 61 2 45 73 83 37 94 XT 1800i14 06 21 50 61 98 2 45 76 04 35 56 XS 800i13 90 19 54 63 86 2 70 77 76 33 44 N 1223 优化参考复检规则 假阴性率下降但推片率过高 工作中实现难度增大 推片复检规则以此为基础 从降低假阳性入手 阳性率假阳性率 阴性率假阴性率符合率推片率 XE 210014 39 24 94 58 38 2 29 72 77 39 32 XT 1
5、800i14 23 22 40 61 08 2 29 75 31 36 63 XS 800i13 98 20 77 62 63 2 62 76 61 34 75 假阳性的主要触发规则假阳性的主要触发规则 WBC x109 L 30 PLT x109 L 1000 不成熟粒细胞 原始细胞 核左移 异型淋巴细胞 WBC x109 L 30 PLT x109 L 1000 不成熟粒细胞 有核红细胞 异常红细胞 血小板聚集 WBC x109 L 30 PLT x109 L 1000 不成熟粒细胞 血液科全推 XE 2100XE 2100XT 1800i XT 1800i XS 800i 优化假阳性的主
6、要触发规则优化假阳性的主要触发规则 XE 2100 WBC x10 9 L 30 PLT x10 9 L 1000 不成熟粒细胞 原始细胞 核左移 异型淋巴细胞 XT 1800i WBC x10 9 L 30 PLT x10 9 L 1000 不成熟粒细胞 有核红细胞 异常红细胞 血小板聚集 XS 800iXS 800i WBC x10 9 L 30 PLT x10 9 L 1000 不成熟粒细胞 血液科全推 序号相关参数复检界定标准 1WBC 30 0 109 L 2Hb 180 g L 3MCV 105 fl 4RDW 22 5DC无分类 6Neut 20 0 109 L 7Lym 5 0
7、 109 L 8Mono 1 5 109 L 9Eos 2 109 L 10Baso 0 5 109 L 11RBC IP MessageRBC 聚集 或RBC 碎片或 RBC 溶血不良或双形性红细胞等 12WBC IP Message原始细胞 13WBC IP Message未成熟粒细胞 14WBC IP Message有核红细胞 Sysmex XE 2100 5000 15PLT 1000 109 L 16PLT IP MessagePLT 异常分布或PLT 聚集 17RBC IP Message不均一性红细红细 胞 Sysmex XT 1800i 15PLT 1000 109 L 16W
8、BC IP MessageWBC 异常散点图图 17WBC IP Message不典型和 或变变异Lym 18WBC IP Message核左移 Sysmex XS 800i 15PLT 1000 109 L 16WBC IP Message核左移 17WBC IP Message不典型和 或变变异Lym 18PLT IP MessagePLT 异常分布或PLT 聚集 19RBC IP Message不均一性红细胞 血常规复检规则的统计分析 阳性率假阳性率 阴性率假阴性率符合率推片率 XE 210013 57 16 43 67 13 2 86 80 70 30 00 XT 1800i13 33
9、 16 68 66 89 3 11 80 21 30 01 XS 800i13 74 16 35 67 05 2 78 80 87 30 09 复检规则设置流程 确定方案及目标 仪器校准 比对 确定镜检阳性标准 双盲法 仪器检测和镜检 设定设定 调整复检规则调整复检规则 满足设定目标 满足设定目标 验证实验验证实验 N Y 5 5 5 5 检验程序检验程序 5 5 1 CNAS CL43 2019 应制定如下标准 程序 当检测样本存在影响因素 如有核红细胞 红细胞凝集 等 时 对仪器检测结果可靠性的判定和纠正措施 淋巴细胞百分比增高 绝对值增高 白细胞数 DIFF通道散点图异常 淋巴细胞群异常
10、 未分类 原始细胞及异型淋巴区荧光强度增强 IMI 散点图异常 报警提示 原始细胞 异型淋巴细胞 有核红细胞等 计数结果可信度低 需复查 可能出现幼稚细胞 有核红细胞增多 有核红细胞增多 处理方法有核红细胞增多 处理方法 有核红细胞检测通道 显微镜镜检 确认异常白细胞及有核红细胞 计数NRBC 计数白细胞分类 计算WBC总数 病例 外周血有核红细胞增加 红细胞碎片红细胞碎片 PLT计数假性增高 电阻抗方法尤为明显 PLT直方图右侧尾部曲线明显抬高 大血小板 聚集血小板 小红细胞 红细胞碎片 不均一性小细胞低色素性改变 RBC HGB MCH MCHC减低 MCV略减低 RDW增高 报警提示 F
11、ragments ANISO Anemia RBC直方图底部变宽 RET通道散点图可示RBC碎片区 红细胞碎片红细胞碎片 处理方法处理方法 特殊通道 显微镜镜检 冷凝集素综合征 原因 血浆中存在冷凝集素 主要为IgM类抗体 在低温时使自 身红细胞发生凝集 0 4 凝集反应高峰 37 凝集消失 表现 MCHC 360g L MCH 36pg Hb假性增高 RBC假性减低 1 37 水浴半小时后立即重新测定 2 遇严重冷凝集标本时 可延长水浴时间或手工计数RBC 2ml 37 预温的生理盐水 10 l37 预温后的血液标本 滴入37 预温的计数盘 先观察RBC有无聚集 若RBC散在分布 用高倍镜计
12、数中央大方格内四角和正中 5个中方格内的RBC数量 通过公式手工计算MCH和MCHC 在LIS系统中修改结果 冷凝集素综合征 处理方法 血小板减少的处理流程 PLT计数减少 报警信息图 形 1 不染色 血小板稀释液 2 染色 瑞氏 显微镜镜检 计数PLT 确定PLT减少原因 真性血小板减少 发仪器报告 假性血小板减少 发镜检结果 注明形态变化 触发复检规则 血小板聚集 血小板卫星现象 巨大血小板 PLT直方图异常 采用特殊通道重新计数PLT 假性血小板减少 血小板聚集 更换肝素抗凝重新抽血 鉴别是否为 抗凝剂引起 仪器法PLT升高 镜下无血小板聚集 EDTA诱导聚集 报告注明 更换枸橼酸钠抗凝
13、剂重新抽血 仪器法PLT仍然减少 镜下发现血小板聚集 仪器法PLT升高 镜下无血小板聚集 EDTA和枸橼酸钠 诱导聚集 报告注明 仪器法PLT减少 镜下血小板聚集 肝素诱导聚集 报告注明 毛细血管法 采集末梢血 显微镜计数PLT 稀释 1 草酸铵 2 盐酸普鲁卡因 0 38ml稀释液 0 02ml血 涂片边缘 尾部 5 6 检验程序的质量保证 5 6 1 室内质控体系应符合如下要求 质控图应包含以下信息 质控图的中心线和控制界线 质控图中心线的确定 更换新批号试剂或仪器重要部件维修后 应重新确定 质控品均值 设定新批号质控图的中心线 新批号质控品的每个项目应和现用质控品做平行检测 在每天不同时
14、段检测 检测3 4天 至少累积10个数据 对数据进行离群值检验 剔除超过 3s数据 计算平均数 以此均值作为质控图的中心线 质控图的中心线和控制限设定 设定新批号标准差 依据前3 5个批次相同项目的加权CV 乘以累积均值 加权CV 2 30 2 1 29 2 2 28 30 29 28 设定新批号控制限 SD 加权CV 累计靶值 用标准差的倍数表示控制限 质控图的中心线和控制限设定 浮动均值法 XB分析 回顾性质量控制 原理 通过对MCV MCH和MCHC的均值变动 实现对仪器质量监控 每个正常成熟红细胞的体积及其所含有血红蛋白 或单位红细胞 容积中所含有血红蛋白则相对稳定 不受血液稀释 浓缩
15、 病理 性或技术性因素而有明显的增减 操作 连续20个标本的MCV MCH MCHC多组均值 MCV靶值89 5fl MCH靶值30 5pg MCHC靶值339g L 控制限一般定为 3 血液分析仪可自动获取数据 进行浮动均值法计算 浮动均值法 XB分析 注意事项 工作班次处理少于100个标本时 不宜使用浮动均值法 所选的标本应随机化 化疗 儿童 缺铁性贫血和巨幼红细胞贫血等异常病 理结果不能超出1 3 MCHC可作为仪器失控最敏感指标 5 6 检验程序的质量保证 5 6 1 CNAS CL43 2019 室内质控体系应符合如下要求 失控判断规则 应规定质控规则 全血细胞计数至少使用13s和2
16、2s规则 失控报告 应包括失控情况的描述 核查方法 原因分析 纠正措 施及纠正效果的评价等内容 应检查失控对之前患者样 品检测结果的影响 失控失控 失控信号的出现受多种因素的影响 例如 质控品质量问题或失效 错拿或错放质控品 仪器维护不良 失控处理 当得到失控信号时 可考虑如下步骤去寻找原因 1 重测同一质控品 此步用以查明是否存在随机误差 如是随机误差 则重测的结果应在允许范围内 在控 如果重测结果仍不在允许范围 则可以进行下一步操作 2 新开一瓶新质控品 重测失控项目 如果新质控结果正常 考虑原质控可能室温放置过长变 质或被污染 如果结果仍不在允许范围 则进行下一步 失控处理 3 检查仪器状态 光源需更换 比色杯需清洗或更换 仪器需清洗 等 重测质控 如果结果仍不在允许范围 则进行下一步 4 检查试剂 通过更换试剂以查明原因 如不是试剂问题 则进行下一步 5 重新校准 重测失控项目 用新校准液校准仪器 排除校准液原因 6 请专家帮忙 如果前5步均未能得到在控结果 可能仪器出现故障 失控记录填写失控记录填写 失控未纠正失控未纠正 处理原则 13S对随机误差敏感 当系统误差较大时也出现
