实验 影响酶促反应的因素

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1、 影响酶促反应的因素 课堂目标 1掌握影响酶作用的几个因素及 实验的 原理 2以严谨的科学态度进行实验操作,准 确记录。并对结果进行讨论分析,完成 实验报告 实验原理 酶促反应在低温时,反应速度较慢甚至停止。 随着温度升高,反应速度逐渐加快。当达到最 适温度时,酶促反应速度达最大值。人体内大 多数酶的最适温度在 37左右。如温度过高, 反应速度反而下降,甚至停止。这主要由于酶 蛋白因高温变性失活之故。 酶活性与溶液pH有关,pH既影响酶蛋白本身构 象,也影响底物解离程度,从而改变酶与底物 结合和催化作用。故每种酶都有其最适pH的作 用环境。过酸过碱均可引起酶蛋白变性而降低 或失去活性。唾液淀粉

2、酶的最适pH为6.8。氯离 子对该酶活性有激动作用,铜离子则有抑制作 用。 本实验利用碘与淀粉及其水解产物(大分子 糊精、麦芽糖)的颜色反应,来比较唾液淀粉酶 在不同条件下催化淀粉水解的速度,从而判断 温度、pH、激动剂和抑制剂对酶活性的影响。 淀粉糊精麦芽糖 与碘呈 蓝色 与碘呈 紫色至红色 与碘 不呈色 试剂 11淀粉溶液 2新鲜配制的稀释唾液 3不同pH缓冲液 (1)pH6.8缓冲液 (2)pH5.0缓冲液 (3)pH8.0缓冲液 40.9NaCI溶液(即生理盐水) 51CuSO4溶液 6碘液 操作 1温度对酶活性的影响 (1)取试管三支,编号,按下表加入试剂 (2)混匀后,三支试管分别

3、置于冰浴、沸水浴 、恒温水浴(37)中预温5分钟。再向各管加 入稀唾液5滴,继续在原水浴中放置10分钟。 (3)取出各管,各滴加碘液1滴(切忌摇动),观 察颜色并记录。 管号 试剂(滴) 123 pH6.8缓冲液151515 1淀粉溶液555 2pH对酶活性的影响 (1)取试管三支,编号,按下表加入试剂 (2)将各管摇匀,同时置37水浴中恒温10分钟 (3)取出各管,各滴加碘液1滴(切忌摇动),观 察颜色并记录。 管号 试剂(滴) 123 pH5.0缓冲液15 pH6.8缓冲液15 pH8.0缓冲液15 1淀粉溶液555 稀唾液555 3激动剂、抑制剂对酶活性的影响 (1)取试管三支,编号,按

4、下表加入试剂 (2)将各管摇匀,同时置37水浴中恒温10分钟 (3)取出各管,各滴加碘液l滴(切忌摇动),观察 颜色并记录。 管 号 试剂(滴) 123 蒸馏水10 0.9 NaCl溶液10 1CuSO4溶液10 pH6.8缓冲液151515 1淀粉溶液 555 稀唾液 555 实验报告 1结合本次实验,说说影响酶作用的几个因素 2根据实验结果,正确填写下列各表,并作简 单分析 (1)温度影响 试管号实验条件加碘液后 颜色 结果分析 1 冰 浴 2 沸水浴 3 恒温水浴 (2)pH影响 (3)激动剂与抑制剂影响 试管号 实验条件 加碘液后 颜色 结果分析 1pH5.0 2pH6.8 3pH8.0 试管号 实验条件加碘液后 颜色 结果分析 1蒸馏 水 20.9NaCL溶 液 3lCuS04溶液 思考題 加入碘液观察结果以前,切忌摇动。你 不妨试试在观察后把不起蓝色反应的试管 摇动几下,或再滴加碘液,很可能会变为 蓝色。这是什么缘故?

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