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1、动物细胞培养和核移植技术 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 那么动物细胞常用的技 术手段呢？ 植物组织培养 植物体细胞杂交 问题探讨 动物细胞工程的技术手段 动物细胞培养、动物细胞核移植、 动物细胞融合、生产单克隆抗体等 动物细胞工程技术的基础 动物细胞培养 从动物机体中取出相关的组织， 将它分散成单个细胞，然后，放在 适宜的培养基中，让这些细胞生 长和增殖。 原理：细胞增殖 动物细胞培养的过程（见课本） 动物胚胎或幼龄动物的组 织、器官（取材） 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 传代培养 无限传代 单个细胞 加培养液 （分解细胞间的蛋白） 原代培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶剪碎 细胞株 细胞系
2、 动物组织细胞间隙中含 有一定量蛋白质 遗传物质 未改变 遗传物质 已改变 细胞株和细胞系的区别： 1、遗传物质 2、培养代数 原代培养： 传代培养： 原代培养与传代培养的区别 分装之前，10代以前 分装后继续培养，10代以后 1、无菌、无毒的环境 动物细胞培养的条件 添加一定量的抗生素 定期更换培养液 培养液和培养器具无菌处 理 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养 补充合成培养基中 缺乏的物质 葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长 因子、动物血清、血浆等 培养基的不同 是动物细胞培 养和植物组织 培养最重要的 区别 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、
3、温度和PH 36.5 +0.5度 PH为7.2-7.4 动物细胞培养的条件 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境： O2和CO2 （95%空气和5% CO2 ） 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织 做动物细胞培养材料？ 1、较植物组培培养基有何独特之处？ 独特之处有：1、液体培养基 2、 成分中有动物血清等 这些组织或器官上的细胞生 命力旺盛，分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞 分散成单个细胞？ 防止细胞间接触抑制现象，使细胞与 培养液更充分接触 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织 培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞 数目增多，而不
4、能发育成个体 5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能 6、动物细胞培养过程中特别要注意什么？ 注意时间的控制 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋 白酶吗？为什么？ 不能，因为两者的最适PH不同， 而正常组织细胞的生存环境与胰蛋 白酶的最适PH较接近 动物细胞培养植物组织培养 植物细胞的全能性 细胞株、细胞系植物体或组织 获得细胞 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无 病毒植株等 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 液体培养基 固体培养基 细胞增殖 培养结果 培养目的 培养基特有 成分 培养基性质 原理 （1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干 扰素、单克隆抗体等。 （2）培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 （3）用
5、于检测有毒物质 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究 动物细胞培养的应用 如何使动物细胞的全能性表达出来? 利用动物细胞核移植技术 动物核移植： 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已 经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并 发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终 发育为动物个体。分为胚胎细胞核移植和 体细胞核移植（难度高） 用核移植的方法得到的动物。 克隆动物： 动物体细胞核移植技术 黑面绵羊去核卵母细胞 白面绵羊乳腺细胞核 重组细胞 动物细胞培养 （或早期胚胎培养 ） 早期胚胎 胚胎移植 另一头绵羊的子宫 妊娠、出生 克隆羊多利 细胞核移植 1、卵母细胞为减数第二次分裂中期的次级卵 母细胞 2
6、、原因？ 细胞比较大，易操作 细胞质中含有使体细胞核全能性表达 出来的物质 3、克隆过程运用的技术手段？ 动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植 4、多利的大部分性状与谁一样？ 白面绵羊 5、结论？ 高度分化的体细胞核具有全能性 克隆动物的研究意义 1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.作为异种移植的供体 4.保护濒危动物 体细胞核移植技术存在的问题 1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过 大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。 2.成功率非常低 3、克隆动物食品的安全性问题。 1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细 胞（ ） A细胞系 B细胞株 C原代
7、细胞 D传代细胞 2、动物细胞工程技术的基础是 （ ） A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养 A D 3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 A.培养基不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条 件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞 不能D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。 A 教学反馈 4、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ） 无毒的环境 无菌的环境 培养基 需要加入血清 温度与动物体温相似 需要O2，不需要CO2 CO2能调节培养 液PH A、 B、 C、 D、 D 5、动物细胞培养的特点 （ ） 细胞贴壁 有丝分裂 细胞
8、 分化 接触抑制 减数分裂 原代培养一般传110代 A、 B、 C、 D、 A 7.动物细胞培养与植物细胞培养的重要 区别在于-（ ） A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进 行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞 不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞 只能培养成植株。 A 8.关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是( ) A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过 渡过程中 B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸 、 无机盐、生长素和动物血清等 C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分 泌蛋白 D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白 酶处理 D 9.下列哪
9、项不属于体细胞核移植技术的 应用（ ） A.加速家畜遗传改良进程，促进优良 畜群繁育 B.保护濒危物种 C.获得组织器官异体移植的供体 D.大量产生紫杉醇 D 10、下图是动物细胞培养的基本过程示 意图。请据此回答： 1）容器A中放置的是动物器官或组织 。它一般取自 _。 （2）容器A中的动物器官或组织首先 要进行的处理是 ，然后用 酶处理，这是为了 使细胞分散开来，这样做的目的是 。 动物胚胎或幼龄动物 剪碎 胰蛋白 使细胞与培养液充分接触，便于培养 （3）培养首先在B瓶中进行，瓶中的 培养基成分有 _等 。在此瓶中培养一段时间后，有许多 细胞衰老死亡，这是培养到第 代，到这时的培养称为_ 。 （4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶 中，用 处理，然后配置成 ，再分装。 动物血清 10 原代培养 胰蛋白酶 细胞悬液
